ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ分析蓮須、蓮子心揮發性成分

王文通　江漢美　軒菲洋

摘要：采用頂空固相微萃取結合氣質聯用技術（HS-SPME-GC-MS）對蓮須、蓮子心揮發性成分進行分析，合理有效地利用中藥資源。結果表明，蓮須中檢測出24種揮發性成分，含量最高的是右旋萜二烯（14.12%）;蓮子心中檢測出26種成分，含量最高的是右旋萜二烯（52.63%），蓮須、蓮子心中含有己醛、壬醛、右旋萜二烯、樟腦、癸醛、1-石竹烯、十五烷、萜品烯、苯乙醇9種共有揮發性成分。

關鍵詞：蓮須;蓮子心;藥用部位;HS-SPME-GC-MS;揮發性成分

中圖分類號：R284.2;O657.7+1? ? ? ? ?文獻標識碼：A

文章編號：0439-8114（2020）03-0137-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.03.030

Analysis of volatile components in Nelumbinis stamen and Nelumbinis plumula

by HS-SPME-GC-MS

WANG Wen-tong，JIANG Han-mei，XUAN Fei-yang

（Hubei University of Chinese Medicine/Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Wuhan 430065，China）

Abstract： HS-SPME-GC-MS was used to analyze the volatile constituents of Nelumbinis stamen and Nelumbinis plumula in different medicinal parts of lotus， so as to make rational and effective use of traditional Chinese medicine. The results showed that 24 kinds of volatile components were detected in lotus seed， the highest content was D-Limonene（14.12%）; 26 kinds of components were detected in lotus seed， the highest content was D-Limonene （52.63%）; 9 kinds of common volatile components were hexanal， nonanal， D-Limonene， alcanfor， decanal， 1-caryophyllene， pentadecane， g-terpinene and phenylethyl alcohol in lotus seed.

Key words： Nelumbinins Stamen; Nelumbinis Plumula; different medicinal parts; HS-SPME-GC-MS; volatile components

蓮須（Nelumbinis Stamen）為睡蓮科植物蓮（Nelumbo nucifera Gaertn.）的干燥雄蕊。夏季開花時選晴天采收，蓋紙曬干或陰干。固腎澀精，用于遺精滑精，崩漏帶下，尿頻。蓮子心（Nelumbinis Plumula）為睡蓮科植物蓮的成熟種子中的幼葉及胚根。清心安神，交通心腎，澀精止血。可用于治療心腎不交、熱入心包、失眠遺精等。蓮的雄蕊、胚根、葉、種子、花托、根莖節部等均可藥用。因此，蓮不同藥用部位揮發性成分的研究可以更合理高效的利用中藥資源，經查閱，已有研究采用HS-SPME-GC-MS分析荷花、蓮葉揮發性成分[1，2]，但未有采用HS-SPME-GC-MS對蓮須、蓮子心揮發性成分進行分析。蓮須揮發油中脂肪酸（棕櫚酸為主）含量最高，其次為萜烯類化合物[3]。蓮子心中揮發油主要成分為棕櫚酸、9，17-十八碳二烯醛和亞油酸等[4]。本試驗首次采用頂空固相微萃取結合氣質聯用技術對蓮須和蓮子心中揮發性成分進行分析和比較，探討蓮的不同藥用部位揮發性成分的差異，旨在從揮發性成分的角度為臨床合理用藥提供依據。

1? 材料與方法

1.1? 儀器

手動固相微萃取（SPME）進樣裝置（德國IKA公司）;Agilent6890/5973型氣相-質譜-計算機聯用儀（美國Hewlett-Packard公司）;頂空瓶（15 mL）;65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纖維頭（美國Supelco公司）;ALC-210.2型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司d=0.01 g）。

1.2? 藥材

蓮須、蓮子心購自湖北強康中藥飲片有限公司，經湖北中醫藥大學鑒定教研室鑒定為正品。

1.3? 方法

1.3.1? 藥材預處理? 蓮子心、蓮須形小質軟，不宜打粉，取適量蓮子心用研缽碾碎后過篩備用，取蓮須適量用剪刀剪碎備用。

1.3.2? GC-MS色譜和質譜條件

1）GC條件。色譜條件HP-5MS石英毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;程序升溫從50 ℃開始，以10 ℃/min升溫至230 ℃;載氣高純度He（99.999%）;柱流速0.8 mL/min;進樣口溫度230 ℃。

2）MS條件。EI源;離子源溫度230 ℃，電離電壓70 eV;四級桿溫度150 ℃;掃描質量范圍35～550 m/z。

1.3.3? 頂空固相微萃取條件? 綜合考察確定頂空固相微萃取的最佳條件為：取預處理過的蓮須樣品1 g，置于15 mL頂空瓶中，瓶上部留有2/3的空間，立即加蓋密封，固定于固相微萃取裝置，插入裝有65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭的手動進樣器，在120 ℃下平衡15 min后，再壓縮手柄伸出萃取頭萃取20 min，取出，立即插入氣相色譜儀進樣口（進樣口溫度230 ℃），解析3 min，不分流進樣。蓮子心的試驗條件同上。

2? 結果與分析

在設定的GC-MS條件下對頂空固相微萃取法獲得的蓮子心、蓮須揮發性成分進行3次分析鑒定后，經化學工作站數據處理及用面積歸一化法從各總離子流中計算各組分相對百分含量，按各峰的質譜圖經NIST質譜數據庫檢索，并結合相對保留時間，確定各個組分。其中蓮須鑒定出24個組分，蓮子心鑒定出26個組分。具體結果見圖1、圖2及表1。由表1可知，蓮須和蓮子心的揮發性成分既有相同組分，又有獨有成分。通過HS-SPME-GC-MS鑒定出蓮須的24種揮發性成分，占揮發性成分總量的89.66%。鑒定出蓮子心的26種揮發性成分，占揮發性成分總量的91.29%。其中含有己醛、壬醛、右旋萜二烯、樟腦、癸醛、1-石竹烯、十五烷、萜品烯、苯乙醇9種相同的揮發性成分。

蓮須中揮發性成分含量最高的是右旋萜二烯，占揮發性成分的14.12%，其次為對苯二甲醚（8.30%）、1-石竹烯（7.25%）、樟腦（4.73%）、2-正戊基呋喃（4.29%）、己醛（3.96%）、萜品烯（3.96%）、壬醛（3.60%）、3-亞甲基-1，5，5-三甲基環己烯（3.51%）、氧化石竹烯（3.15%）。其中對苯二甲醚、2-正戊基呋喃是區別于蓮子心所特有的含量較高的揮發性成分。對苯二甲醚是一種較為常見的有機合成原料，氣味芳香，常用于香料、日用化學品、煙用香精、食品等合成及制備[5]。

蓮子心中揮發性成分含量最高的是右旋萜二烯，占揮發性成分的52.63%。其次為萜品烯（6.64%）、苯乙醇（3.15%）、十二烷（2.53%）、正己醇（2.42%）、2，3，5，6-四甲基吡嗪（1.95%）、十五烷（1.84%）、壬醛（1.77%）、樟腦（1.73%）、（7Z）-7-十四碳烯（1.70%）。其中苯乙醇、十二烷、正己醇、2，3，5，6-四甲基吡嗪是區別于蓮須所特有的含量較高的揮發性成分。苯乙醇多存在于小葉女貞、小葉丁香、小葉杜鵑花等植物中。制煙時加入適宜濃度吡嗪類化合物可給卷煙加香[6]。現代研究指出，發酵法是未來生產2，3，5，6-四甲基吡嗪一種較為可行的方法[7]。

3? 討論

蓮須揮發性成分主要是萜烯、芳香族化合物、脂肪醛等化合物;蓮子心揮發性成分主要是萜烯、烯烴、芳香族化合物。右旋萜二烯為蓮須、蓮子心揮發性成分中含量最高的成分，但含量差異較大，為無色液體，有似鮮花的清淡香氣。右旋萜二烯屬于萜烯類化合物。萜烯類化合物具有對植物種子萌發的化感作用，表現為抑制現象[8]、抑菌[9]等藥理作用。萜烯類化合物也存在于花椒、蕓香科果皮等植物中[9，10]。通過對比發現，利用HS-SPME-GC-MS方法鑒定出的蓮須和蓮子心中揮發性成分和傳統揮發油提取方法如水蒸氣蒸餾法鑒定出的揮發性成分存在一些差異，說明不同的方法對試驗結果存在一定影響。HS-SPME-GC-MS法分析揮發性成分具有自動便捷、快速高效、不需有機溶劑、安全環保等優點，為藥材提取分析縮短了時間并提高了效率。經過對蓮不同藥用部位更詳盡全面的對比和分析，為更好的利用藥材資源創造了條件，避免資源浪費，同時也為完善中藥質量標準提供了科學依據。

參考文獻：

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[7] 侯孝元，顧如林，梁文龍，等.利用發酵法生產四甲基吡嗪研究進展[J].生物技術通報，2016，32（1）：58-64.

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[9] 劉? 路，周? 瓊，李添寶.南桔果皮揮發油化學成分分析[J].中國南方果樹，2014，43（5）：33-38.

[10] 孫曉萍，吉永知代，李學成.花椒中萜烯類化合物的GC/MS分析[J].中國調味品，2007（5）：61-63.

收稿日期：2019-03-27

基金項目：湖北省技術創新專項重大項目（2016ACA146）

作者簡介：王文通（1994-），男，吉林松原人，在讀碩士研究生，研究方向為中藥及其制劑的物質基礎，（電話）15926261905（電子信箱）751511146@qq.com;通信作者，江漢美，女，教授，主要從事中藥及其制劑的物質基礎研究，（電子信箱）13807186811@163.com。