防風種子生活力快速測定方法的研究

常麗君

摘 要 試驗先采用不同濃度TTC溶液對防風種子進行生活力測定，篩選出防風種子生活力測定所用的最佳TTC溶液濃度；再用該濃度不同染色時間對防風種子進行生活力測定，篩選出最佳染色時間。結果表明，適宜防風種子生活力測定的條件為1.0%TTC溶液染色3h。

關鍵詞 防風；種子；生活力

防風為傘形科防風屬多年生草本植物，春、秋二季采挖未抽薹植株的根，除去須根和泥沙，曬干后入藥。最早收載于《神農本草經.上品》，具有祛風解表，勝濕止痛等功效，主產于我國黑龍江、吉林、遼寧、內蒙古、河北、寧夏、甘肅、陜西、山西等地。近年來，在中醫藥現代化和中醫藥產業發展的推動下，防風種植面積逐年增大，防風都是以種子繁殖的，種子的生產在實際生產過程中一直不被重視，基本上是藥材生產的副產品，還處于農戶自繁自售的狀態，其生產缺乏統一的質量標準和檢驗規程，從而導致防風種子質量層次不齊、商品種子慘偽等現象嚴重。這不但增加了投入成本，而且嚴重影響了防風種苗質量，并最終影響藥材的質量和品質。因此，根據防風種子生產的現狀和問題，應該制定相關的標準，使得在進行種子檢驗時，有一定的參考依據，同時也有利于加強市場的規范化，從而保障消費者的利益。

種子生活力是指種子胚胎在一定的環境下，通過一定的刺激，其萌芽的潛在能力。它也是衡量種子品質和價值的主要參考依據，種子生活力越高，在之后生長過程中，其潛力越大。對藥用植物來說，種子質量的好壞，活力的高低更為重要，它不僅會影響植物的生長，而且直接影響到藥材質量和品質。為了確定防風種子生活力的最佳染色濃度和時間，該實驗用TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑）對防風種子進行染色，希望通過該實驗可以有效的為防風種子的檢測制定相關依據。

1 試驗材料

防風種子于2019年10月采自甘肅省隴西縣首陽中藥材產業園區，種子采集后在隴西縣中醫藥研究院種子種苗檢測中心進行生活力測定。

2 試驗方法

四唑法（TTC）測定種子生活力的原理：有生命活力的種子會進行呼吸代謝，代謝過程中產生的氫可以將TTC由無色變為紅色。

由以上原理可以進行判定，如果TTC被染成了深紅色，可以推斷，該種子進行了呼吸代謝，從而可以判斷種子生活力相對較強，反之則不具備種子生活力。

本試驗主要研究了不同TTC濃度和不同染色時間兩個因素對防風種子生活力測定的影響。

3 試驗步驟

3.1 試劑配制

第一步，在小燒杯中分別放入已經稱取好的TTC粉末，質量分別是0.5g、1.0g、1.5g、2.0g；第二步，在每一個燒杯內都加入濃度為95%的乙醇進行溶解；第三步，依次在加入乙醇后的燒杯內加入20毫升蒸餾水進行搖勻，并通過0.1mol/L的氫氧化鈉溶液將溶液PH調到中性；最后一步，再次利用蒸餾水進行稀釋定容，這樣就配好了不同濃度的TTC溶液。

3.2 操作步驟

先將防風凈種子放在35℃水浴鍋中浸泡24h使種子充分吸脹，然后根據種子外形沿胚著生部位縱向切開種子（兩部分均含胚和胚乳），棄去一半后將另一半種子置于染色盤中，加入TTC溶液后于35℃恒溫箱中進行染色后觀察染色結果（TTC溶液以剛好浸沒種子為宜）。每個處理做2次重復，每個重復100粒種子。

3.3 結果觀察

染色結束后倒出TTC溶液，再用蒸餾水將種子清洗2-3次，觀察種胚的染色情況（必要時可借助放大鏡或低倍顯微鏡）。凡種胚全部或2/3部分被染成紅色或淡紅色即為具有生活力的種子，種胚不被染色的即為死種子。

4 結果分析

4.1 種子生活力對不同濃度TTC溶液的不同反應

表1是我們將處理好的防風種子浸泡在不同濃度的TTC溶液中五個小時所得的結果。根據表1數據，我們可以發現，當TTC的濃度為0.5%時，種子生活力為74%，當TTC濃度達到1%時，種子生活力大幅度增加，所以TTC濃度為0.5%被排除。我們再通過表一可以觀察，濃度逐漸增長，但是種子生活力卻沒有大幅度增長，反而濃度為1.5%到濃度2%時，種子生活力不變，這樣通過我們分析可以得出，測定防風種子生活力TTC的最佳濃度為1%。

4.2 不同染色時間對種子生活力測定的影響

將處理好的種子放到最佳濃度的TTC溶液中，并每隔一個小時進行觀察統計所得出的。表2中我們可以得知，當染色一小時之后，種子生活力為70.5%；染色兩小時后，種子生活力為75%；到了第三個小時之后，種子生活率達到了81%，再往后隨著時間的增加，種子生活力并沒有明顯的增加。所以，可以推斷出防風種子生活力測定的最佳染色時間為三個小時。

5 結論

首先，本實驗排除其他可能影響的原因，對最佳濃度進行選擇。通過將種子放置在不同濃度的TTC溶液中，從而得出TTC溶液最佳濃度為1%。其次，實驗在將種子放置在1%的TTC溶液中，每隔一小時，進行記錄，最終確定，染色時間為3小時效果最佳。綜上所述，測定防風種子生活力的最佳條件為1%的TTC溶液進行染色三小時。