氣相色譜檢測果蔬中有機磷農藥殘留的方法

楊 紅

（云南省新平縣農產品質量安全檢驗檢測站，云南新平 653400）

農業是我國的重要產業，在經濟發展中發揮著十分重要的作用。近年來，隨著經濟的不斷發展，各種新技術、新工藝被引入農業生產中，進一步提高了我國的農業發展水平。然而，農業迅速發展的同時也帶來了農產品農藥殘留的問題，制約了農業的可持續發展，需要采取有效措施來解決這一問題。目前，在種植果蔬的過程中，所使用的農藥主要有有機磷農藥、有機氯農藥、氨基甲酸酯類農藥和擬除蟲菊酯類農藥等。

1 有機磷農藥與氣相色譜法

有機磷農藥因為具有效果好、起效快的優勢，使其在農產品施肥中被廣泛應用。大部分有機磷，結構不穩定，具有較強的揮發性，在自然環境條件下容易分解，即使這部分有機磷進入生物體內，生物體內的酶也會對其有一定程度上的分解作用，因此這部分有機磷在食物中殘留的時間相對較短，攝入者一般以急性中毒居多[1]。但是，也存在部分有機磷在特定的環境下會存留較長的時間，甚至會在生物體內不斷積累。例如馬拉硫磷，該農藥對于水生生物而言具有很高的毒性，同時也會對人體的免疫功能造成一定程度的影響。果蔬中的有機磷有多種檢測方法，主要有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質譜法等。在這些檢測方法中，氣相色譜法具有較大的優勢，主要表現在以下3方面：首先，氣相色譜法有著較高的分離效率，分析檢測對象的速度快，對于樣品的要求也不高；其次，氣相色譜法具有很高的檢測靈敏度，操作起來相對便捷；最后，氣相色譜法的成本相對較低，有著較高的經濟效益，正是因為這些優勢，使其在果蔬有機磷農藥的檢測中被廣泛應用。

2 基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法

2.1 原理將采集好的含有有機磷農藥的樣品置于富氫焰上進行一定程度的燃燒，然后在此基礎上以HPO碎片的形式放射出波長為526 nm的特性光；將放射出的光經過濾片選擇處理，并用光電倍增管接收，在接收到放射出的特性光之后，對其進行一定程度的轉換，使其成為電信號，之后將轉換而成的電信號經過微電流放大器放大并進行有效記錄。經過一系列的處理后，便能夠獲得樣品的峰面積，將其與標準品的峰面積進行有效的對比分析，并在此基礎上進行檢測[2]。

2.2 試劑實驗試劑包含丙酮、二氯甲烷、氯化鈉、無水硫酸鈉以及農藥標準品（敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環磷、馬拉硫磷各100 ug/mL）。

2.3 設備實驗中所用到的儀器設備有組織搗碎機、勻漿機、旋轉蒸發儀、電動振蕩器以及Agilent 7890A（FPD）氣相色譜儀等。

2.4 樣品處理將樣品按照要求除去非可食部分后搗碎，裝瓶備用。選取25 g的樣品置于燒杯中，加入50 mL的水和100 mL的丙酮，放進勻漿機勻漿2 min，將勻漿液經濾紙和布氏漏斗過濾后移入分液漏斗中。向濾液（取100 mL）中加入15 g氯化鈉，并進行劇烈振搖，振搖時間控制在2 min左右，然后再靜置10 min，使有機相與水相分層。然后在水相中加入50 mL二氯甲烷再振蕩2 min，靜置待分層。將丙酮和二氯甲烷提取液混合后經玻璃漏斗（裝有25 g無水硫酸鈉）脫水后濾入燒瓶中，可用二氯甲烷多次洗滌容器，洗滌液并入燒瓶中一起處理。最后運用旋轉蒸發儀對濾液進行濃縮，直到近干狀態，并在此基礎上運用丙酮定容至5 mL，放置備用。

3 AOAC萃取法

3.1 原理將經過提取和進化操作后的樣品濾液注入氣相色譜儀中，農藥組分經毛細管柱分離，并運用火焰光度檢測器對其進行有效檢測，保留時間定性，利用外標法定量。

3.2 試劑實驗所用試劑有丙酮、AOAC萃取填料、乙酸乙腈（濃度為1%）以及農藥標準品（敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環磷、馬拉硫磷各100 ug/mL）。

3.3 設備實驗所用儀器有純化管、組織搗碎機、旋轉蒸發儀、勻漿機、電動振蕩器以及Agilent 7890A（FPD）氣相色譜儀等。

3.4 樣品處理將樣品按照要求除去非可食部分后搗碎，裝瓶備用。稱取15 g待測樣品置于離心管中，然后在離心管中加入15 mL濃度為1%的乙酸乙腈。將其放置在電動振蕩器上進行振蕩操作，振蕩時間控制在1 min左右。隨后再將AOAC萃取填料也放置其中，進行振搖操作，振搖完成后將所有的有機相轉移到純化管中，再次進行振搖。最后，吸取2 mL的提取液放到旋轉蒸發儀上氮吹至近干，并在此基礎上使用丙酮定容至2 mL，放置備用。

4 氣相色譜測定

首先，選取1 ul標準溶液以及試樣凈化液，將其注入氣相色譜儀中，根據農藥組分的保留時間和峰面積進行有效定性及定量[3]。

在式（1）中，X指試樣中的有機磷含量；A1指實驗中待測樣品中被測組分的峰面積；A2指農藥標準溶液中被測組分的峰面積；V1與V3分別指試樣提取的總體積以及試樣最后的定容體積；V2指吸取出用于檢測的提取溶液的體積；C指標準液的濃度；m則指試樣的質量。

5 結果與分析

經過檢測分析，發現4種有機磷農藥混合標準液在特定的環境下得到了有效分離，分析過程消耗時間較短，經過檢測得到的色譜峰峰形較好，分離度較為理想。根據實驗與分析發現：敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環磷、馬拉硫磷這4種有機磷標準溶液在特定的范圍內具備較為良好的線性關系，這一范圍具體為0.04～0.5 ng。具體線性測定結果如表1所示。

表1 線性測定結果

首先，對樣品中的農藥殘留量進行一定程度的檢測，檢測計算出樣品中待測組分農藥殘留量的本底值。這一操作完成后，可以向其中添加一定量的標準溶液，然后運用基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法以及AOAC萃取法對其加標回收率進行有效測定。實驗結果表明：采用基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法測出4種有機磷農藥的加標回收率大致在86%～92%，而采用AOAC萃取法得出的4種有機磷農藥的加標回收率則在88%～93%。

6 結語

本文主要針對氣相色譜檢測果蔬中有機磷農藥殘留方法進行研究與分析，首先介紹了有機磷農藥與氣相色譜法，然后在此基礎上闡述了基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法與AOAC萃取法[4]，指出了兩種方法的原理、所用試劑、設備以及試樣的處理流程，并分別針對這兩種常用的氣相色譜檢測方法進行了實驗分析。實驗結果表明：運用這兩種方法進行處理，敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環磷、馬拉硫磷4種有機磷的回收率都相對較高，但是AOAC萃取法操作簡單，能夠達到更高的效果，安全性也更好，適合廣泛使用與推廣[5]。