徐王彪 陳潔紅
肺炎支原體(mycoplasma pneumonia, MP)是引起人支原體肺炎的病原體,支原體肺炎的發病率以青少年為最高,是兒童呼吸道感染的常見類型。發病初期表現為感冒樣全身癥狀,繼而出現發熱及陣發性刺激性咳嗽為主的呼吸道癥狀,嚴重可伴發多系統器官損害,臨床也有個別死亡病例報道[1]。由于肺炎支原體感染的臨床表現和胸部X線檢查都不具有典型性,因而很難做出準確診斷。目前,肺炎支原體感染的快速診斷主要依靠血清學抗體檢測[2-3]。本研究擬通過分析兒童呼吸道感染者中肺炎支原體感染的陽性率,以及性別、年齡分布、發病季節性等特點,為臨床診斷、治療及預防提供參考。
1.1 一般資料 回顧性分析2018年7月至2019年6月來安慶市第二人民醫院兒科門診及住院部就診呼吸道感染兒童1 256例的臨床資料。按性別分為男童組692例和女童組564例;按年齡分為0歲~組166例、1歲~組505例、4歲~組349例、7歲~組143例以及10~14歲組93例;按季節分為春季組(3月~5月)393例、夏季組(6月~8月)272例、秋季組(9月~11月)197例和冬季組(12月~次年2月)394例。
1.2 標本采集 用真空采血管對每位兒童采靜脈血2 mL,以3 000 r /min離心10 min 分離血清待檢。
1.3 觀察指標及檢測方法 檢測試劑為日本富士康必歐株式會社提供的賽樂迪亞-麥可Ⅱ肺炎支原體抗體檢測試劑盒(被動凝集法)。嚴格按照試劑盒說明書進行操作,倍比稀釋血清,加入等量未致敏粒子和致敏粒子(未致敏粒子和致敏粒子須加入血清稀釋液溶解30 min后方可使用)。在水平振蕩器上進行充分混勻,15~30℃避光靜置3 h后觀察結果,實驗同時設置陰性和陽性對照,檢測肺炎支原體總抗體滴度(包括IgM型抗體和IgG型抗體)。根據試劑盒說明書判讀陰陽性結果:<1∶40判斷為陰性,≥1∶40判斷為陽性,并注明滴度。
1.4 統計學方法 用SPSS 17.0軟件包進行數據分析,計數資料用頻數和率表示,率的比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義;多組間的兩兩比較,根據檢驗的組數調整檢驗水準,檢驗水準α=0.05/n,n=組數。
2.1 肺炎支原體抗體檢測結果 1 256例呼吸道感染患兒,肺炎支原體抗體陽性率為26.4%(332/1 256)。男童陽性率為24.6%(170/692),低于女童陽性率28.7%(162/564),但差異無統計學意義(χ2=2.761,P=0.097)。
2.2 不同年齡組肺炎支原體抗體檢測陽性率結果 0歲~組陽性率最低為3.6%,7歲~組陽性率最高為44.8%,各組間差異有統計學意義(χ2=114.072,P<0.001)。兩兩比較顯示,0歲~組與1歲~組、4歲~組、7歲~組、10~14歲組比較,差異均有統計學意義(χ2=22.567、64.680、74.208、58.635,P<0.001);1歲~組與4歲~組、7歲~組、10~14歲組比較,差異均有統計學意義(χ2=35.138、40.509、22.076,P<0.001)。見表1。
2.3 不同季節肺炎支原體抗體檢測陽性率分布情況 冬季和春季陽性率較高,分別為31.0%、29.0%,夏季和秋季陽性率較低,分別為20.2%、20.8%,各組間差異有統計學意義(χ2=14.099,P=0.003)。見表2。

表1 不同年齡段肺炎支原體抗體陽性率比較
注:與0歲~組比較,*P<0.001;與1歲~組比較,#P<0.001

表2 不同季節肺炎支原體抗體檢測陽性率分布
注:與冬季組比較,*P<0.008
2.4 肺炎支原體抗體陽性結果滴度分析 在332例陽性結果中,滴度1∶40共65例,占19.6%;滴度1∶80共75例,占22.6%;滴度≥1∶160共192例,占57.8%。
支原體是目前發現最小最簡單的原核生物,自然界分布廣泛,與人類相關的有3種:肺炎支原體、人型支原體和生殖器支原體。其中肺炎支原體可黏附在宿主氣管或支氣管上皮細胞表面,引起細胞膜損傷,伸出微管吸取胞內營養、釋放溶細胞酶和過氧化氫等引起細胞腫脹、壞死等,從而導致咽炎、支氣管炎或非典型肺炎等[4]。由于支原體肺炎的臨床表現易與細菌或病毒感染相混淆,且支原體對抑制細菌細胞壁合成的抗生素或抗病毒類藥物均不敏感,因此,快速、準確地對肺炎支原體感染做出診斷,是進一步采取有效治療措施的關鍵。
分離培養、PCR核酸檢測和血清學試驗是診斷肺炎支原體感染的主要方法[5-6]。雖然病原體培養是診斷的“金標準”,但由于肺炎支原體生長緩慢、培養條件苛刻,不能及時做出臨床診斷;PCR核酸檢測因為假陽性率較高等也難以獲得廣泛開展;血清學試驗則以其快速、簡便等特點更容易為臨床所接受,尤其近年開展的血清肺炎支原體抗體檢測項目具有較高的敏感性、特異性及陽性檢出率,在MP診斷中已經得到了廣泛的應用[7-8]。
本研究對1 256例呼吸道感染兒童MP抗體檢測資料進行回顧性分析,結果顯示1 256例患兒中MP抗體的陽性檢出率為26.4%,高于江蘇海安地區的16.8%[9],與佛山市順德區的26.64% 相接近[10],表明近年來MP感染率呈逐漸增高的趨勢并存在地域差異分布的特點。從性別分布特點分析,女童感染MP的陽性率略高于男童,但差異無統計學意義(P>0.05)。從年齡分布特點分析,0歲~組MP抗體陽性率最低(3.6%),7歲~組MP抗體陽性率最高(44.8%),各組間差異有統計學意義(P<0.05),0歲~組、1歲~組分別與其他各組兩兩比較,差異均有統計學意義。0歲~組MP抗體陽性率最低及1歲~組較低的原因,一方面可能嬰兒體內有來自母體和母乳喂養中保護性抗體的存在;另一方面可能與嬰幼兒活動范圍較小,MP感染機會少有關[11];也可能存在嬰幼兒免疫系統發育不成熟,初次感染MP后抗體生成不足等情況。因此對0~3歲兒童應結合臨床癥狀病史及其他檢查進行分析判斷[11]。7歲~組兒童MP抗體陽性率最高及4歲~組、10~14歲組兒童陽性率較高的原因可能與其活動范圍大,經常處于人群密集如幼兒園、學校、食堂等公共場所,而MP帶菌者和患者是主要傳染源,相互之間交叉感染有關,因此臨床上應加強對學齡前及學齡期兒童MP抗體檢測來進行鑒別是否MP感染。從季節分布特點分析,以冬季和春季陽性率較高,夏季和秋季陽性率較低,與相關文獻[11-12]報道冬、春兩季陽性率較高的結果一致,這可能與兩季氣候寒冷,呼吸道抵抗力差,有利于MP感染與傳播有關,因此更應重視兒童冬春季呼吸道感染的MP抗體檢測。另外,被動凝集法檢測MP抗體滴度需≥1∶160方有較強的診斷意義[13],滴度與癥狀往往成正相關。在本研究的332例MP抗體陽性檢測結果中,有19.6%和22.6%患兒的抗體滴度分別為1∶40和1∶80。較低的抗體滴度,可能與MP感染后抗體出現及達到峰值的時間延遲有關,也可能為既往MP感染后體內IgG型抗體殘留有關,因此需要臨床醫師結合患者癥狀做出診斷,或可進行試驗性治療,如有需要可在1周后重復測定MP抗體,復查后仍然為較低抗體滴度則為既往MP感染后體內IgG型抗體殘留;復查后抗體滴度升高則為MP現癥感染,有利于臨床醫師進行鑒別診斷。
總之,應用被動凝集法對呼吸道感染兒童進行肺炎支原體抗體檢測,是一種方便、實用的方法,有利于盡早明確診斷,及時開展有效的抗感染治療,同時MP抗體滴度檢測對治療的療效評估有一定的指導意義。