菠蘿蜜低聚肽的免疫調(diào)節(jié)作用研究

郝云濤,珠 娜,劉欣然,毛瑞雪,劉 睿,康家偉,烏 蘭,胡佳妮,李 勇

(北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系,北京 100191)

人體免疫系統(tǒng)可識(shí)別和清除外來(lái)病原微生物及體內(nèi)的突變細(xì)胞、衰老死亡細(xì)胞或其它有害成分,以保持機(jī)體健康、避免各種疾病的發(fā)生[1]。但隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏加快,許多外界因素如工作壓力和心理壓力加大、空氣污染及重金屬暴露、肥胖等使人類(lèi)免疫系統(tǒng)功能降低,各種疾病的發(fā)病率呈增長(zhǎng)趨勢(shì)[2-6]。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及細(xì)胞分子生物學(xué)的發(fā)展,人們意識(shí)到機(jī)體免疫系統(tǒng)缺陷及功能失調(diào)與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。因此,從調(diào)節(jié)免疫功能入手,防治機(jī)體疾病已得到廣泛重視。

免疫調(diào)節(jié)劑可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,對(duì)免疫功能低下、繼發(fā)性免疫功能缺陷和某些腫瘤等疾病具有防治作用;目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于免疫調(diào)節(jié)劑的研究主要集中在中藥、化學(xué)性藥物及生物制劑,近年來(lái)從食物中提取的生物活性肽對(duì)免疫功能的調(diào)節(jié)作用成為研究熱點(diǎn)[7-8]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,人參低聚肽、海參寡肽、烏雞肽等均具有免疫調(diào)節(jié)的作用[9-11]。菠蘿蜜引進(jìn)我國(guó)已有上千年歷史,營(yíng)養(yǎng)成分豐富,具有多種保健功效[12-14]。有研究指出,菠蘿蜜果肉及種子蛋白含量豐富,遠(yuǎn)高于其他常見(jiàn)水果[15-16]。菠蘿蜜低聚肽(jackfruit oligopeptides,JOPs)是利用生物酶解技術(shù)從菠蘿蜜果肉及種子中制取得到的小分子生物活性肽,主要成分是活性小分子寡肽,具有高于蛋白質(zhì)和多肽的生物活性[17]。但目前未見(jiàn)有關(guān)JOPs功能的研究報(bào)道,JOPs在免疫調(diào)節(jié)功能領(lǐng)域的研究更是處于空白。本研究通過(guò)JOPs長(zhǎng)期干預(yù)BALB/c小鼠,系統(tǒng)探究了JOPs的免疫調(diào)節(jié)作用,為其作為增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的新型保健食品的開(kāi)發(fā)及應(yīng)用提供研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

160只SPF級(jí)BALB/c雌性健康小鼠 6～8周,體重18～22 g,由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào):SYXK(京)2016-0041;JOPs 淡黃色固體粉末,主要成分為分子量<1000 Da的寡肽,具體分子量分布為71～110 Da(7.4%)、150～379 Da(80%)、515～1 113 Da(12.6%),海南盛美諾生物技術(shù)有限公司;刀豆蛋白A(ConA) 西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;胎牛血清 索萊寶公司;RPMI1640培養(yǎng)基 Hyclone公司;小鼠淋巴瘤細(xì)胞(YAC-1細(xì)胞) 北京愛(ài)特蒙科技有限公司;噻唑藍(lán)(MTT) 西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;姬姆薩染液 北京寶瑞杰科技有限公司;印度墨水 北京寶瑞杰科技有限公司;雞紅細(xì)胞、綿羊紅細(xì)胞(SRBC) 北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

Eppendorf高速冷凍離心機(jī)(Eppendorf AG)、Bio-Rad550型酶標(biāo)儀 美國(guó)伯樂(lè)公司;Sanyo二氧化碳培養(yǎng)箱 日本三洋公司;CK40-SL倒置顯微鏡 OCI公司;FACSCalibur流式細(xì)胞儀 北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部中心實(shí)驗(yàn)樓提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 160只SPF級(jí)BALB/c雌性健康小鼠分籠飼養(yǎng),4只/籠,自由飲水、飲食,飼喂普通飼料。小鼠飼養(yǎng)于動(dòng)物房屏障環(huán)境,溫度24～26 ℃,相對(duì)濕度50%～60%,保持12 h/12 h光暗周期節(jié)律室內(nèi)照明,照明時(shí)間7:00～19:00。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與用藥 160只BALB/c小鼠,適應(yīng)1周后依據(jù)體重隨機(jī)分成5組:空白對(duì)照組、乳清蛋白組(0.40 g/kg·bw),及低、中、高3個(gè)JOPs干預(yù)組(0.20、0.40、0.80 g/kg·bw),各組再依據(jù)體重隨機(jī)分成4個(gè)亞組(8只/組)。灌胃干預(yù),空白對(duì)照組灌蒸餾水,其余各組灌規(guī)定濃度的乳清蛋白、JOPs水溶液。灌胃1次/d,連續(xù)30 d,干預(yù)結(jié)束行小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、血清溶血素水平測(cè)定、抗體生成細(xì)胞檢測(cè)、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、小鼠體重及免疫器官相對(duì)重量檢測(cè)、ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、NK細(xì)胞活性檢測(cè)及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟T淋巴細(xì)胞亞群比例。

1.2.3 小鼠體重及免疫器官相對(duì)重量檢測(cè) 取同一亞組小鼠共40只,稱(chēng)重后頸椎脫臼處死小鼠,分離胸腺及肝臟并稱(chēng)重,計(jì)算臟器指數(shù)[9]。

1.2.4 遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、血清溶血素水平測(cè)定、抗體生成細(xì)胞檢測(cè) 取同一亞組小鼠共40只,實(shí)驗(yàn)第26 d腹腔注射2%(v/v)SRBC 0.2 mL免疫小鼠,4 d后相同時(shí)間測(cè)量小鼠左后足跖部厚度,然后同一部位皮下注射20%(v/v)SRBC 20 μL,24 h后測(cè)量同一部位足跖部厚度,均測(cè)量3次,取平均值,觀察足跖增厚度[18]。摘眼球法采血,放置1 h后離心收集血清,進(jìn)行血清溶血素水平測(cè)定[9]。頸椎脫臼處死小鼠,剖取脾臟,進(jìn)行抗體生成細(xì)胞檢測(cè)(Jerne改良玻片法)[19]。

1.2.6 腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 取同一亞組小鼠共40只,均腹腔注射20%(v/v)雞紅細(xì)胞1 mL。30 min后,頸椎脫臼處死小鼠,腹腔注射2 mL生理鹽水,輕揉腹部20次后剪開(kāi)腹壁,移液槍吸取1 mL腹腔洗液,平均滴加至載玻片上2個(gè)瓊脂圈內(nèi),放于內(nèi)墊溫濕紗布的搪瓷盤(pán)內(nèi),移至37 ℃ CO2培養(yǎng)箱溫育30 min。之后用生理鹽水漂洗,洗去未貼片的細(xì)胞。晾干后,以丙酮甲醇(1∶1)溶液進(jìn)行固定,然后4%(v/v)Giemsa-PBS染色30 min,再用雙蒸水進(jìn)行漂洗晾干。油鏡下觀察雞紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬情況,每張片均計(jì)數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞,計(jì)算吞噬率及吞噬指數(shù)[9]。

1.2.7 小鼠ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)與NK細(xì)胞活性檢測(cè) 取同一亞組小鼠共40只,稱(chēng)重后頸椎脫臼處死小鼠,分離胸腺及肝臟并稱(chēng)重,計(jì)算臟器指數(shù);無(wú)菌條件下取脾,于400目篩網(wǎng)上輕輕研磨,適量Hank’s液過(guò)濾,用Hank’s液洗2次(每次1000 r/min離心10 min)。再用RPMI 1640完全培養(yǎng)液1 mL懸浮細(xì)胞,1%冰醋酸稀釋并計(jì)數(shù)。RPMI1640完全培養(yǎng)液將細(xì)胞濃度調(diào)至2×107個(gè)/mL,采用LDH法進(jìn)行NK細(xì)胞活性測(cè)定;細(xì)胞濃度調(diào)至3×106個(gè)/mL,采用MTT法檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞增殖能力[20]。

1.2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟T淋巴細(xì)胞亞群比例 取同一亞組共40只小鼠脾臟,制備1×106個(gè)/mL的脾細(xì)胞懸液(方法同1.2.6)。各小鼠編2支對(duì)應(yīng)試管,加細(xì)胞懸液100 μL/管,然后分別加入不同熒光素標(biāo)記的CD3ε、CD4、CD25、CD8a抗小鼠單克隆抗體,并以各單克隆抗體的同型對(duì)照作陰性對(duì)照,消除因抗體非特異性結(jié)合至細(xì)胞表面所產(chǎn)生的背景。室溫避光孵育15～20 min。每管加800 μL Cell staining buffer細(xì)胞染色緩沖液(cell staining buffer)洗滌2次,加入250 μL cell staining buffer重懸細(xì)胞,用BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD3+T細(xì)胞及CD4+、CD8+、CD4+CD25+T細(xì)胞亞群百分比,以未加抗體的對(duì)照管進(jìn)行空白定標(biāo),各管收集1×105個(gè)細(xì)胞,使用BD CellQuest軟件包收集并分析數(shù)據(jù)[10]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果與分析

2.1 JOPs對(duì)小鼠體重及免疫器官相對(duì)重量的影響

各組間初始體重、終末體重均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);JOPs中、高劑量組小鼠脾臟指數(shù)顯著大于空白對(duì)照組(P<0.05),并且中劑量組小鼠脾臟指數(shù)顯著大于乳清蛋白組(P<0.05);各組小鼠胸腺指數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05),見(jiàn)表1。

表1 JOPs對(duì)小鼠體重和免疫器官相對(duì)重量的影響Table 1 Effect of JOPs on body weight and relative weight of immune organs in mice

2.2 JOPs對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響

與空白對(duì)照組及乳清蛋白組比較,JOPs中、高劑量組小鼠反映脾淋巴細(xì)胞增殖能力的血清光密度差值,及足跖增厚度均顯著提高(P<0.05);而JOPs低劑量組與空白對(duì)照組及乳清蛋白組相比,小鼠血清光密度差值及足跖增厚度無(wú)顯著差異(P>0.05),見(jiàn)表2。

表2 JOPs對(duì)小鼠細(xì)胞免疫功能的影響Table 2 Effect of JOPs on cellular immune function in mice

2.3 JOPs對(duì)小鼠體液免疫功能的影響

JOPs中、高劑量組小鼠溶血空斑數(shù)顯著高于空白對(duì)照組及乳清蛋白組(P<0.05)。JOPs高劑量組小鼠血清溶血素水平顯著高于空白對(duì)照組(P<0.05),且JOPs低、高劑量組小鼠血清溶血素水平顯著高于乳清蛋白組(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 JOPs對(duì)小鼠體液免疫功能的影響Table 3 Effect of JOPs on humoral immune function in mice

2.4 JOPs對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

相對(duì)于空白對(duì)照組,JOPs各劑量組小鼠碳廓清吞噬指數(shù)a、巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬率(P<0.05)均顯著提高;相對(duì)于乳清蛋白組,JOPs中、高劑量組小鼠碳廓清吞噬指數(shù)a、巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)顯著提高(P<0.05),見(jiàn)表4。

表4 JOPs對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響Table 4 Effect of JOPs on phagocytosis of monocyte-macrophages in mice

2.5 JOPs對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

相比空白對(duì)照組與乳清蛋白組,JOPs 中、高劑量組小鼠NK細(xì)胞活性均顯著升高(P<0.05);而JOPs低劑量組與空白對(duì)照組及乳清蛋白組相比,小鼠NK細(xì)胞活性差異不顯著(P>0.05),見(jiàn)表5。

表5 JOPs對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響Table 5 Effect of JOPs on the activity of NK cells in mice

2.6 JOPs對(duì)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響

JOPs高劑量組小鼠脾臟CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞亞群比例與CD4+CD25+/CD4+T細(xì)胞比值顯著高于空白對(duì)照組及乳清蛋白組(P<0.05);此外,JOPs低、高劑量組小鼠脾臟CD4+/CD8+比值顯著高于乳清蛋白組(P<0.05);相比空白對(duì)照組,JOPs低劑量組小鼠脾臟CD4+/CD8+比值顯著增高(P<0.05),JOPs高劑量組小鼠脾臟CD4+/CD8+比值有增高的趨勢(shì)(P=0.062),見(jiàn)表6。

表6 JOPs對(duì)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響Table 6 Effect of JOPs on T lymphocyte subsets of spleen in mice

3 討論

機(jī)體免疫系統(tǒng)的功能分為適應(yīng)性免疫與固有免疫,其中適應(yīng)性免疫包括細(xì)胞免疫及體液免疫,固有免疫包括單核-巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞的作用。T淋巴細(xì)胞在機(jī)體免疫系統(tǒng)中起著極為重要的作用,它與某些特異性抗原或細(xì)胞相互接觸時(shí),發(fā)揮免疫功能,在機(jī)體的固有免疫及適應(yīng)性免疫中均具有重要作用[21]。ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)采用ConA誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞,使其發(fā)生母細(xì)胞增殖反應(yīng),增殖細(xì)胞中線粒體水解酶將MTT分解成藍(lán)紫色結(jié)晶,通過(guò)檢測(cè)OD值變化,間接反映T淋巴細(xì)胞增殖能力;DTH實(shí)驗(yàn)通過(guò)二次綿羊紅細(xì)胞干預(yù)24 h后小鼠足跖部增厚程度反映T淋巴細(xì)胞反應(yīng)程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示JOPs干預(yù)對(duì)小鼠體重變化及胸腺指數(shù)無(wú)顯著性影響(P>0.05);JOPs中、高劑量組小鼠脾臟指數(shù)顯著高于空白對(duì)照組,且中劑量組脾臟指數(shù)顯著高于乳清蛋白組(P<0.05),提示JOPs對(duì)增加小鼠脾臟指數(shù)具有一定作用。相比空白對(duì)照組及乳清蛋白組,JOPs中、高劑量干預(yù)組小鼠ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力與遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力顯著增高(P<0.05),表明JOPs可以促進(jìn)小鼠細(xì)胞免疫功能,與Yang等[22]的研究結(jié)果相似。

抗體是B淋巴細(xì)胞經(jīng)抗原刺激增殖分化成漿細(xì)胞后,合成的能夠與對(duì)應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白,主要分布于血清或體內(nèi)外分泌物中,在體液免疫中發(fā)揮重要作用,是衡量機(jī)體體液免疫功能的重要指標(biāo)[23-24]。抗體生成細(xì)胞檢測(cè)采用SRBC免疫小鼠,在補(bǔ)體參與下,分泌抗體的脾細(xì)胞將周?chē)鶶RBC溶解,出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)空斑,空斑數(shù)即等同抗體生成細(xì)胞數(shù);血清溶血素檢測(cè)利用SRBC免疫后小鼠血清中出現(xiàn)的溶血素(SRBC抗體),在補(bǔ)體參與下使SRBC發(fā)生溶血反應(yīng)釋放血紅蛋白,通過(guò)檢測(cè)血紅蛋白含量間接反映溶血素水平。與HE等[10]的研究結(jié)果類(lèi)似,本實(shí)驗(yàn)中JOPs 中、高劑量組小鼠的抗體生成細(xì)胞數(shù)顯著高于空白對(duì)照與乳清蛋白組;JOPs高劑量組小鼠血清溶血素水平顯著高于空白對(duì)照組,且JOPs低、高劑量組血清溶血素水平明顯高于乳清蛋白組(P<0.05)。由此可推斷,JOPs能夠明顯增強(qiáng)小鼠體液免疫功能。

單核-巨噬細(xì)胞是固有免疫的重要組成部分,是炎性反應(yīng)中主要的調(diào)節(jié)細(xì)胞,還對(duì)適應(yīng)性免疫反應(yīng)起關(guān)鍵性作用[25]。小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)利用體內(nèi)碳顆粒清除速率和血碳濃度,在一定范圍內(nèi)呈指函數(shù)關(guān)系,校正肝脾重量的影響,通過(guò)吞噬指數(shù)a反映機(jī)體單核-巨噬細(xì)胞吞噬能力;腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)利用機(jī)體內(nèi)腹腔巨噬細(xì)胞能直接吞噬雞紅細(xì)胞的特性,根據(jù)顯微鏡下觀察到的雞紅細(xì)胞吞噬情況計(jì)算吞噬率及吞噬指數(shù),推斷單核-巨噬細(xì)胞的吞噬功能。本研究發(fā)現(xiàn),相對(duì)于空白對(duì)照組,JOPs各劑量干預(yù)組小鼠碳廓清能力、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率及吞噬指數(shù)顯著增高,且JOPs中、高劑量組小鼠碳廓清吞噬指數(shù)a、巨噬細(xì)胞吞噬率與吞噬指數(shù)顯著高于乳清蛋白組(P<0.05),表明JOPs可明顯提高小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能,與朱振平等[26]的研究結(jié)果類(lèi)似。NK細(xì)胞是有別于T細(xì)胞與B細(xì)胞的一類(lèi)淋巴細(xì)胞,它可直接殺傷靶細(xì)胞,在免疫監(jiān)視、抗腫瘤和抗感染的早期過(guò)程中起著重要作用[27]。NK細(xì)胞活性檢測(cè)利用YAC-1細(xì)胞被NK細(xì)胞殺傷后釋放的LDH使乳酸鋰脫氫,進(jìn)而使NAD還原為NADH,后者經(jīng)遞氫體使碘硝基氯化四氮唑(INT)被還原為紫紅色甲臜類(lèi)化合物,通過(guò)比色測(cè)定OD值間接反映NK細(xì)胞活性。本研究表明,對(duì)比空白對(duì)照組及乳清蛋白組,JOPs 中、高劑量組均具有較高的NK細(xì)胞活性,說(shuō)明JOPs可以增強(qiáng)小鼠NK細(xì)胞活性。

細(xì)胞免疫中最為重要的T淋巴細(xì)胞包含多種功能各異的T淋巴細(xì)胞亞群,共同發(fā)揮免疫調(diào)控作用,其中CD3+細(xì)胞代表成熟T淋巴細(xì)胞,是細(xì)胞免疫中主要的活性細(xì)胞,它按CD表型又分Th細(xì)胞(CD4+輔助/誘導(dǎo)性T細(xì)胞)與Tc細(xì)胞(CD8+抑制性/細(xì)胞毒T細(xì)胞)。CD4+T細(xì)胞能夠協(xié)助B細(xì)胞分泌抗體及調(diào)節(jié)其它T細(xì)胞的免疫應(yīng)答,CD8+T細(xì)胞常表現(xiàn)為細(xì)胞毒活性及免疫抑制性,是主要的細(xì)胞毒效應(yīng)細(xì)胞;CD4+T細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞數(shù)量和比值變化能夠反映機(jī)體免疫功能狀態(tài),CD4+T細(xì)胞數(shù)量降低、CD8+T細(xì)胞數(shù)量增加、CD4+/CD8+比值降低表明機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài),臨床上預(yù)示著疾病惡化[28]。CD4+CD25+T細(xì)胞可高表達(dá)IL-2受體的α鏈(CD25分子)和轉(zhuǎn)錄因子Foxp3,抑制自身反應(yīng)性T細(xì)胞所介導(dǎo)的病理性免疫應(yīng)答[1]。本研究JOPs高劑量干預(yù)組小鼠脾臟CD3+T細(xì)胞、CD3+CD4+T細(xì)胞亞群比例,及CD4+CD25+/CD4+T細(xì)胞比值均高于空白對(duì)照組及乳清蛋白組,JOPs低、高劑量干預(yù)組小鼠脾臟CD4+/CD8+比值顯著高于空白對(duì)照組及乳清蛋白組或有高于的趨勢(shì)(P<0.05)。CD4+T細(xì)胞可活化為T(mén)h細(xì)胞,其中Th1細(xì)胞可分泌IFN-γ、TNF、IL-2、GM-CSF等,發(fā)揮細(xì)胞免疫效應(yīng),并激活巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞;Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-10、IL-13等,介導(dǎo)體液免疫。因此,可推斷JOPs增強(qiáng)小鼠細(xì)胞與體液免疫功能的可能機(jī)制,即JOPs提高CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值,Th1、Th2細(xì)胞增加,進(jìn)而增大相應(yīng)細(xì)胞因子的釋放量,增強(qiáng)細(xì)胞及體液免疫功能、單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能與NK細(xì)胞活性。此外JOPs增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用優(yōu)于乳清蛋白,表明其功效并非單純由小鼠蛋白質(zhì)攝入增加所引起。本研究為JOPs作為一種有效增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的新型功能性保健食品及藥品的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù),但其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)探究。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明長(zhǎng)期服用JOPs可顯著增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫、體液免疫、單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能及NK細(xì)胞活性(P<0.05),機(jī)制可能與其提高CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值有關(guān)。本研究為JOPs在增強(qiáng)機(jī)體免疫功能方面的應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù),但其具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)去探究和驗(yàn)證。