TNF-α、IL-1β及IL-6水平用于評估川崎病患兒發生冠狀動脈損傷的臨床價值

黃宏琳 黃育坤 林淑斌 郭瑞芳

【摘要】 目的：探討TNF-α、IL-1β及IL-6水平用于評估川崎病（KD）患兒發生冠狀動脈損傷的臨床價值。方法：選取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患兒88例，根據是否合并冠狀動脈損傷（CAL）分為非CAL組（n=29）和CAL組（n=59），并選取同時期健康體檢兒童50例為對照組。測定血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I（cTnI）;超聲檢測左心室射血分數（LVEF）、左心室短軸縮短分數（LVFS）。結果：KD組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;KD組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與對照組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。治療前，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL組，差異均有統計學意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與非CAL組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。治療后，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL組，差異均有統計學意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平與非CAL組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關（P<0.05），與CK-MB無顯著相關性（P>0.05）;血清IL-1β、IL-6與CK-MB、cTnI均無相關性（P>0.05）。結論：檢測血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作為診斷KD合并冠狀動脈損傷的輔助指標，可應用于臨床。

【關鍵詞】 川崎病 冠狀動脈損傷 腫瘤壞死因子α 白細胞介素-1β 白細胞介素-6

Clinical Value of TNF-α， IL-1β and IL-6 in Evaluating Coronary Artery Injury in Children with Kawasaki Disease/HUANG Honglin， HUANG Yukun， LIN Shubin， GUO Ruifang. //Medical Innovation of China， 2020， 17（04）： 0-015

[Abstract] Objective： To investigate the clinical value of TNF-α， IL-1β and IL-6 levels in evaluating coronary artery injury in children with kawasaki disease （KD）. Method： A total of 88 cases of KD children admitted to our hospital from June 2014 to September 2016 were selected. According to the combination of CAL or not， they were divided into non-CAL group （n=29） and CAL group （n=59）， and 50 healthy children in the same period were selected as the control group. Serum tumor necrosis factor （TNF-α）， interleukin-1β （IL-1β）， interleukin 6 （IL-6）， creatine kinase isoenzyme （CK-MB） and cardiac troponin I （cTnI） were measured. The left ventricular ejection fraction （LVEF） and left ventricular short axis shortening fraction （LVFS） were measured by ultrasound. Result： The levels of TNF-α， IL-1β， IL-6 and cTnI in KD group were higher than those in control group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between KD group and control group （P>0.05）. Before treatment， TNF-α， IL-1β， IL-6， cTnI in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF and LVFS between CAL group and non CAL group （P>0.05）. After treatment， TNF-α， IL-1β and IL-6 in serum of CAL group were higher than those of non CAL group， the differences were statistically significant （P<0.05）; there were no significant differences in serum CK-MB， LVEF， LVFS and cTnI between CAL group and non CAL group （P>0.05）. There was a significant positive correlation between serum TNF-α and cTnI （P<0.05）， but no significant correlation with CK-MB （P>0.05）; there were no correlation between serum IL-1β， IL-6 and CK-MB， cTnI （P>0.05）. Conclusion： The detection of serum TNF-α， IL-1β and IL-6 levels can be used as auxiliary indicators for the diagnosis of KD complicated with coronary artery injury and can be applied in clinical practice.

[Key words] Kawasaki disease Coronary artery injury TNF-α IL-1β IL-6

First-authors address： Xiamen Childrens Hospital， Xiamen 361006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.04.003

川崎病（Kawasaki disease， KD）是一種病因不明，以全身中、小血管炎性反應為主要癥狀的急性發熱、出疹性小兒疾病。KD的主要危害是造成全身中小動脈血管擴張而引發冠狀動脈損傷（coronary artery lesion， CAL），是目前造成小兒后天獲得性心臟損傷的主要原因，且合并CAL會增加KD治療難度，影響預后。免疫系統高度活化及細胞因子的級聯放大效應是CAL的病理基礎，其形成是多種炎性因子損傷血管內皮細胞所致[1-3]。因此，了解CAL程度對于治療方案的制定及治療效果評估具有非常重要的臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月-2016年9月本院收治的KD患兒88例，其中典型KD 62例，不完全KD 26例;男61例，女27例;年齡6個月～7歲，平均（2.5±1.2）歲;發熱至確診平均時間（4.5±2.2）d。選取同時期健康體檢兒童50例為對照組。CAL診斷標準：（1）<5歲兒童冠狀動脈內徑>3 mm;（2）≥5歲兒童冠狀動脈內徑>4 mm;（3）任一年齡段兒童冠狀動脈內徑是鄰近段的1.5倍以上[4-5]。納入標準：（1）年齡6個月～7歲，性別不限;（2）患者均符合第七版諸福棠實用兒科學關于KD診斷標準[3]，符合日本MCLS研究會標準。（3）均為首次發病，急性期入院。排除標準：（1）入院前已診斷川崎病并靜脈注射丙球蛋白者;（2）合并其他感染，如膿毒癥者。治療前對88例患兒行心臟超聲檢查，根據是否合并CAL分為非CAL組（n=29）和CAL組（n=59）。治療采用丙種球蛋白（IVIG）靜注和阿司匹林口服治療。患兒家長知情同意且簽署知情同意書，該研究已經醫院倫理學委員會批準。

1.2 方法 患者于治療前后、對照組于體檢時采集清晨空腹靜脈血3 mL，離心取血清，測定腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素-6（IL-6）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和肌鈣蛋白I（cTnI）。TNF-α、IL-1β和IL-6均采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定，試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，操作嚴格按照說明書進行;CK-MB采用邁瑞BS800全自動生化分析儀測定;cTnI采用貝克曼庫爾特DXI800全自動化學發光免疫分析儀測定;同時，超聲檢測試驗者冠狀動脈及左心室射血分數（LVEF）、左心室短軸縮短分數（LVFS）。

1.3 觀察指標 （1）比較KD組與對照組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況。（2）比較治療前后CAL組與非CAL組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況。（3）分析KD患兒血清TNF-α、IL-6與CK-MB、cTnI的相關性。

1.4 統計學處理 采用SPSS 22.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗，相關性采用Person相關性分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組一般資料比較 非CAL組男16例，女13例;年齡6個月～6歲，平均年齡（2.3±1.0）歲。CAL組男31例，女28例;年齡6個月～6歲，平均（2.6±1.1）歲。對照組男35例，女15例;年齡6個月～6歲，平均（2.5±1.1）歲。三組一般資料比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 KD組與對照組血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 KD組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;KD組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與對照組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.3 CAL組與非CAL組治療前血清TNF-α、IL-1β、IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 治

療前，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6、cTnI水平均高于非CAL組，差異均有統計學意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF及LVFS水平與非CAL組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。見表2。

2.4 CAL組與非CAL組治療后血清TNF-α、IL-1β、

IL-6、CK-MB、cTnI和心功能情況比較 治療后，CAL組血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均高于非CAL組，差異均有統計學意義（P<0.05）;CAL組血清CK-MB、LVEF、LVFS及cTnI水平與非CAL組比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。見表3。

2.5 KD患兒血清TNF-α、IL-1β、IL-6與CK-MB、cTnI的相關性分析 KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關（r=0.612，P=0.021），與CK-MB無顯著相關性（r=0.362，P=0.087）;血清IL-1β與CK-MB、cTnI均無相關性（r=0.114、0.412，P=0.637、0.120）;IL-6與CK-MB、cTnI均無相關性（r=0.277、0.396，P=0.532、0.201）。

3 討論

KD是一種以全身血管炎性反應為主要癥狀的血管綜合征，常引起冠狀動脈炎、冠狀動脈擴張、冠狀動脈瘤及冠狀動脈血栓等并發癥，給患兒健康造成極大威脅[4-6]。川崎病的病因尚未形成統一的結論，但是眾多研究發現，川崎病的急性期伴隨著免疫系統的激活，多種免疫指標的異常，表現為B細胞的多克隆活化、T細胞的異常增殖及多種細胞因子的分泌異常，可能還存在著外周血淋巴細胞凋亡延遲[7]。活化T細胞、單核細胞及激活的克隆B細胞釋放大量的細胞因子和炎性介質，相互促進，在血液循環中級聯放大，引起血管內皮凋亡增加，最終導致血管的損傷[7]。研究發現，TNF-α、IL-6、IL-1β、干擾素-γ、超敏C反應蛋白、血小板生長因子等均參與了川崎病血管炎性損害過程[8-11]。TNF-α由活化的巨噬細胞、單核細胞和T細胞產生，具有多種生物學效應，其能誘導內皮細胞黏附因子的表達和活化，促使血小板和白細胞黏附于血管內皮表面，從而引起血管壁的損傷和血管內凝血[12]。同時TNF-α能引起血管內皮細胞結構的改變，抑制細胞內皮生長，影響內皮細胞損傷的修復[13]。本組KD患兒血清TNF-α顯著高于健康兒童，而且并發CAL的患兒血清TNF-α顯著高于非CAL患兒，差異均有統計學意義（P<0.05），提示KD患兒CAL的發生與TNF-α對血管內皮的損傷有一定的關系，積極控制炎性反應的發展，降低患兒血清TNF-α水平對預防CAL的發生可能有一定療效。IL-1β主要由活化的單核-吞噬細胞產生，是一種炎性反應前期細胞因子，活化內皮細胞，起著免疫調節的作用[14]。本組KD患兒血清IL-1β顯著高于健康兒童，且并發CAL的患兒顯著高于非CAL患兒，差異均有統計學意義（P<0.05），提示IL-1β參與了KD發生時的血管炎性反應。IL-6由活化的Th2細胞、單核吞噬細胞和成纖維細胞等產生，能促進B細胞分化，分泌自身抗體，引起細胞內皮毒性作用，同時IL-6的升高可引起淋巴細胞凋亡延遲，免疫過度激活損傷血管內皮[15]。本組KD患兒血清IL-6水平顯著升高，且CAL患兒血清IL-6顯著高于非CAL患兒，差異均有統計學意義（P<0.05），提示IL-6同樣參與了KD的疾病過程，同時在冠狀動脈炎性損傷中發揮了一定的作用。

另外本研究對KD患兒的心功能也做了檢測，結果顯示在KD患兒中，雖然伴隨著炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6的異常升高，但是心功能指標（LVEF和LVFS）與健康兒童比較，差異均無統計學意義（P>0.05），提示本組KD患兒的心臟損傷臨床癥狀較輕，尚未損害到心功能。進一步進行CK-MB和cTnI的檢測，KD組血清cTnI水平高于對照組（P<0.05），但血清CK-MB比較，差異無統計學意義（P>0.05），同樣證實了本組患兒的心臟損傷較輕。當KD患兒心功能尚未出現異常時，超聲檢測KD往往不能明確診斷，因此血清炎性因子的檢測對于早期的KD確診具有一定的優勢[16]。對TNF-α、IL-1β和IL-6與心臟損傷指標CK-MB和cTnI的相關分析顯示，KD患兒血清TNF-α與cTnI水平呈顯著正相關（P<0.05），由此可知，KD患兒血清TNF-α水平的升高對預測早期心肌損傷有一定的臨床意義。

綜上所述，TNF-α、IL-1β和IL-6在KD的疾病過程中顯著升高，且TNF-α的水平對預測早期心肌損傷有一定的臨床意義，因此，檢測血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平可作為診斷KD合并冠狀動脈損傷的輔助指標應用于臨床。

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（收稿日期：2019-07-11） （本文編輯：姬思雨）