唐禎臻,范世珍,林 潔,于波海
(1.大連大學附屬中山醫院 檢驗科,遼寧 大連116001;2.廣州中醫藥大學深圳醫院,廣東 深圳518034)
尿路感染(UTI) 好發于各年齡段女性和老年男性患者,由各種病原菌感染引起,少量為真菌感染[1]。中段尿定量培養為實驗室診斷尿路感染的金標準,但是該法一般需要3-4 d才能獲得檢驗結果,存在一定的假陰性率,不利于尿路感染的快速早期診斷[2]。SysmexUF-1000i(簡稱UF-1000i)尿有形成分分析儀檢測細菌采用獨立通道,將細菌的核酸成分進行特異染色并抑制參雜物的非特異染色,對尿液中的細菌進行定量檢測,用于尿路感染的快速診斷和篩檢[3]。本研究對497例大連大學附屬中山醫院住院疑似尿路感染的患者尿標本進行UF-1000i尿有形成分檢測,并與定量中段尿細菌培養結果對比,旨在評估UF-1000i的細菌聯合白細胞檢測在UTI篩查中的應用價值,為臨床提前預判診斷和治療UTI提供實驗依據。
1.1 一般資料選取2018年4月-2018年10月于我院住院疑似尿路感染的497例患者,清潔中段尿(或導尿管留尿)標本10 ml于無菌管中。其中男140例,平均年齡78.56歲;女357例,平均年齡68.11歲。無菌管中尿標本先進行尿細菌培養試驗,后迅速進行尿有形成分分析,從標本收集到完成接種及尿有形成分分析不得超過2 h。患者均有尿頻、尿急、尿痛等尿路感染癥狀。陽性標準為白細胞(WBC)計數>25個/μL和細菌(BACT)計數>380個/μL,并對陽性標本做進一步分析。
1.2 儀器與試劑日本Sysmex醫用電子有限公司生產的UF-1000i尿有形成分分析儀、配套試劑及質控品。貝瑞特生物技術有限責任公司提供的血瓊脂培養基、沙保羅瓊脂培養基和顯色培養基。全自動微生物鑒定儀為西門子醫學診斷產品有限公司。
1.3 尿細菌培養,菌種鑒定一般菌培養采用接種環取無菌試管中尿標本三區劃線血瓊脂培養基上。溫度為35℃培養18-24 h,肉眼觀察菌落并計數。革蘭陰性菌≥105cfu/ml,革蘭陽性菌≥104cfu/ml為尿定量細菌培養結果陽性,出現兩種以上雜菌生長,且沒有優勢菌時則被判為混合污染。培養陽性結果的菌株用全自動微生物鑒定儀進行菌種鑒定。真菌培養采用接種環取尿標本密集劃線于沙保羅瓊脂培養基生長并于顯色培養基上鑒定。
1.4 UF-1000i尿有形成分分析將接種完成后的無菌試管尿液標本立即進行UF-1000i尿有形成分分析儀檢測,詳細記錄白細胞和細菌計數結果。結果以WBC計數>25個/μL和BACT計數>380個/μL的標本記為陽性。
1.5 統計學分析采用SPSS19.0統計軟件進行統計學分析。繪制白細胞和細菌計數的ROC曲線,記錄診斷的cut off值,并計算診斷試驗各個相關評價指標。
2.1 住院患者尿細菌培養結果497例住院疑似尿路感染送檢尿標本培養結果陽性278例,陽性率為55.94%。其中,革蘭陰性桿菌168例(60.43%),革蘭陽性球菌65例(23.38%),真菌33例(11.87%)。病原菌分布以大腸埃希菌(33.81%)為首,其次依次為肺炎克雷伯桿菌(15.47%)、屎腸球菌(15.11%)和糞腸球菌(4.68%)等致病菌;真菌以白色假絲酵母(6.47%)和熱帶假絲酵母(3.60%)為主。見表1。

表1 278份住院尿液標本病原菌分布及構成比﹝%﹞
2.2 UF-1000i WBC計數和BACT計數診斷住院患者尿路感染的ROC曲線下面積及cut off值以臨床診斷尿路感染中段尿定量培養為金標準將UF-1000i尿有形成分分析儀檢測所得WBC、BACT結果繪制ROC曲線。WBC和BACT診斷住院患者尿路感染ROC曲線下面積(AUC)分別為0.860(95%CI:0.810-0.901)和0.917(95%CI:0.875-0.948),見圖1。從SPSS輸出表中獲得WBC和BACT的cut off值分別為64個/μL和880.6個/μL。

圖1 WBC和BACT診斷住院患者尿路感染的ROC曲線圖
2.3 WBC計數和BACT計數診斷住院患者尿路感染的診斷性能評價以WBC 64個/μL和BACT 880.6個/μL為cut off值,計算兩者單獨診斷住院患者尿路感染的診斷性能和兩者聯合應用的診斷性能指標。單獨應用時細菌計數具有較好的敏感性和特異性。兩試驗并聯時敏感性為97.04%。兩試驗串聯時特異度為97.9%。見表2。

表2 WBC和BACT計數診斷住院患者尿路感染的診斷性能評價
UF-1000i尿有形成分分析儀不僅能定量檢測出尿中白細胞數量,還能精準檢測出細菌數量。但其不能區分活菌與死菌,可能將其他有形成分如氣泡、灰塵、結晶、脂肪等誤認為細菌,導致結果假陽性[4]。如標本采集不合格有污染菌、放置時間過長細菌生長或采樣前患者已使用過抗菌藥物等,都會影響尿培養結果的陽性率。尿液定量培養方法通常使用普通營養瓊脂,其只能檢出腸桿菌屬和厚壁菌科的細菌,需氧菌和特殊營養的細菌不能在此培養基中發育[5,6]。白細胞作為診斷指標時,腫脹、破裂或聚集成團的白細胞易被儀器誤認為其他成分,若尿液中白細胞吸附在黏液絲上,易造成漏檢[7]。
本研究住院患者定量尿細菌培養結果陽性率為55.94%,大腸埃希菌33.81%、腸球菌19.79%(包括屎腸球菌和糞腸球菌)和肺炎克雷伯桿菌15.47%是尿路感染最常見的致病菌[8];真菌以白色假絲酵母為主,感染率增加[9],跟文獻報道相符。UF-1000i尿有形成分分析儀檢測住院患者尿液WBC計數和BACT計數ROC曲線下面積分別為0.860(95%CI:0.810-0.901)和0.917(95%CI:0.875-0.948),說明WBC計數和BACT計數在住院患者尿路感染診斷中具有較高的診斷價值。該診斷試驗通過ROC曲線所建的cut off值分別為WBC計數>64個/μL和BACT計數>880.6個/μL。單獨應用于診斷時細菌計數的診斷效能高于白細胞計數。本研究中WBC計數的cut off值與文獻報道的WBC計數>68.5個/μL相符;但盧麗萍等研究得出門診及住院所有患者的BACT計數的cut off值為532.7個/μL,本研究中BACT計數的cut off值則高于文獻報道[10]。這種差異可能與實驗納入的人群不同相關。本研究針對的是住院疑似尿路感染患者,住院患者的BACT計數高于門診患者;同時患者病情復雜多樣,常伴有基礎病,平均年齡偏高,抵抗力低容易受到病原菌入侵生長、增殖并發生感染,所以BACT計數會高一些。同時盧麗萍等研究又得出門診及住院女性患者的BACT計數的cut off值為863.1個/μL,與本研究以女性患者71.83%(357/497)為主,BACT計數的cut off值相符。
綜上所述,UF-1000i尿有形成分分析儀能夠快速檢測出患者尿液中WBC計數和細菌計數等信息,兩者可用于聯合分析尿路感染,預先給藥治療,減輕患者痛苦和縮短病程,具有一定的臨床應用價值,為臨床初步診斷及排除UTI提供可靠的依據。