血清S100鈣結(jié)合蛋白B、TIMP金屬肽酶抑制劑1、纖連蛋白1聯(lián)合對(duì)子癇前期的診斷價(jià)值

袁國(guó)平，蔣永亮，程玉霞

(四川省安岳縣中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川 安岳 642350)

先兆子癇是一種妊娠特異性綜合征，其特征在于妊娠20周后新發(fā)高血壓和蛋白尿，是全世界孕產(chǎn)婦死亡的主要原因，每年死亡人數(shù)為63000[1]。S100鈣結(jié)合蛋白B(S100 Calcium Binding Protein B，S100b)定位于多種細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和/或細(xì)胞核中，并參與許多細(xì)胞過(guò)程的調(diào)節(jié)，例如細(xì)胞周期進(jìn)程和分化[2]。Wikstr?m等[3]發(fā)現(xiàn)先兆子癇的女性在妊娠期間S100B水平升高。纖連蛋白1(Fibronectin 1，F(xiàn)N1)參與細(xì)胞粘附和遷移過(guò)程，包括胚胎發(fā)生，傷口愈合，血液凝固，宿主防御和轉(zhuǎn)移[4]。Zhao等[5]發(fā)現(xiàn)FN1通過(guò)調(diào)節(jié)人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞的分化/凋亡/侵襲以及粘著斑促進(jìn)子癇前期的發(fā)展。TIMP金屬肽酶抑制劑1(TIMP Metallopeptidase Inhibitor 1，TIMP1)為調(diào)節(jié)細(xì)胞分化，遷移和細(xì)胞死亡的生長(zhǎng)因子[6]。Luizon等[7]發(fā)現(xiàn)TIMP-1不僅可以促進(jìn)先兆子癇發(fā)生發(fā)展，還可以降低對(duì)抗高血壓治療的反應(yīng)。本研究探討血清S100b、TIMP1、FN1聯(lián)合對(duì)子癇前期的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2017年10月至2018年10月我院收治的妊娠期子癇前期患者70例(研究組)，年齡(27.10±7.48)歲。均根據(jù)歐洲心臟病學(xué)會(huì)(ESC)的最新臨床指南進(jìn)行診斷[8]：收縮壓≥140 mmHg；舒張壓≥190 mmHg；尿蛋白≥0.3 g/24 h。排除標(biāo)準(zhǔn)：①長(zhǎng)期使用皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑者；②患有精神疾病者；③患有癌癥者。納入同期我院體檢的70例健康孕中期妊娠婦女(對(duì)照組)，年齡(28.31±5.03)歲。兩組基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。本研究獲我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且受試者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法所有研究對(duì)象抽取肘前靜脈血6 ml，進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。S100b ELISA試劑盒購(gòu)自上海振譽(yù)生物科技有限公司(貨號(hào)：SEA567Mu-1)。TIMP1 ELISA試劑盒購(gòu)自北京綠源伯德生物科技有限公司(貨號(hào)：KIT10934)。FN1ELISA試劑盒購(gòu)自亞諾法生技股份有限公司(Abnova)(貨號(hào)：KA4976)。根據(jù)相應(yīng)說(shuō)明書(shū)檢測(cè)血清S100b、TIMP1、FN1表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)；應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線下面積(AUC)分析S100b、TIMP1、FN1診斷子癇前期的臨床價(jià)值。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清S100b、TIMP1、FN1表達(dá)量比較研究組血清S100b、TIMP1、FN1表達(dá)量均高于對(duì)照組(P< 0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清S100b、TIMP1、FN1表達(dá)量比較 (ng/L)

2.2 S100b、TIMP1、FN1診斷子癇前期的臨床價(jià)值如圖1和表2所見(jiàn)，S100b的AUC為0.85±0.04，以S100b的陽(yáng)性臨界值92.78 ng/L，其診斷靈敏度為87%，特異度為87%；TIMP1的AUC為0.87±0.03，以TIMP1的陽(yáng)性臨界值81.28 ng/L，其診斷靈敏度為88%，特異度為85%；FN1的AUC為0.84±0.03，以FN1的陽(yáng)性臨界值35.02 ng/L，其診斷靈敏度為97%，特異度為60%。

圖1 S100b、TIMP1、FN1診斷子癇前期的ROC曲線

表2 S100b、TIMP1、FN1診斷子癇前期的臨床價(jià)值

2.3 血清S100b、TIMP1、FN1對(duì)子癇前期的聯(lián)合診斷以S100b的陽(yáng)性臨界值92.78 ng/L，TIMP1的陽(yáng)性臨界值81.28 ng/L，F(xiàn)N1的陽(yáng)性臨界值35.02 ng/L為診斷界限，三者全滿足者為聯(lián)合診斷陽(yáng)性。血清S100b、TIMP1、FN1聯(lián)合對(duì)子癇前期的診斷的的靈敏度為94.29%(66/70)，特異度為85.71%(60/70)，準(zhǔn)確度為90.00%(126/140)。見(jiàn)表3。

表3 血清S100b、TIMP1、FN1對(duì)子癇前期的聯(lián)合診斷

3 討論

先兆子癇是一種妊娠期高血壓疾病，全世界有2%～8%的妊娠婦女發(fā)生先兆子癇[9]。先兆子癇是一種多因素和多系統(tǒng)疾病。妊娠20周后，先兆子癇的特征是高血壓和蛋白尿，或高血壓和終末器官損害(有或沒(méi)有蛋白尿)[10]。先兆子癇是孕產(chǎn)婦和胎兒死亡的主要原因，它導(dǎo)致15%的早產(chǎn)[11]。因此，早期發(fā)現(xiàn)有先兆子癇并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)的孕婦，對(duì)于改善監(jiān)測(cè)和預(yù)防性治療以優(yōu)化健康結(jié)果至關(guān)重要。本研究中，血清S100b、TIMP1、FN1聯(lián)合對(duì)子癇前期的診斷的的靈敏度為94.29%，特異度為85.71%，準(zhǔn)確度為90.00%。

S100b在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中最為豐富，主要在星形膠質(zhì)細(xì)胞中，并且該蛋白質(zhì)具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用[12]。先前已證明S100B在中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)會(huì)增加，而先兆子癇與腦水腫有關(guān)[13，14]。在本研究中，子癇前期患者血清S100b表達(dá)量高于健康妊娠婦女。先兆子癇患者血清S100b含量增加的來(lái)源目前仍然未知，但是，患有先兆子癇的女性有腦血流動(dòng)力學(xué)變化，甚至早于先兆子癇綜合征[15]。先兆子癇與血腦屏障破壞有關(guān)[16]，這使得高腦S100b含量可能泄漏到血清中。提示發(fā)生先兆子癇的女性血清中S100b的增加是繼發(fā)于腦血管損傷并且反映了該疾病的大腦受累程度。在本研究中，發(fā)現(xiàn)血清中S100b診斷子癇前期的靈敏度和特異度均為87%，顯示了其良好的診斷效能，并且如果S100b證實(shí)是先兆子癇腦損傷程度的準(zhǔn)確生物標(biāo)志物，那么它可能對(duì)指導(dǎo)干預(yù)最有幫助，從而有望避免一些急性腦并發(fā)癥。

FN1編碼纖連蛋白1，其參與粘著斑和細(xì)胞外基質(zhì)-受體相互作用[17]。FN1的轉(zhuǎn)錄水平在先兆子癇中發(fā)生改變[18]。在本研究中，發(fā)現(xiàn)子癇前期患者血清中FN1的表達(dá)量均高于健康妊娠婦女。子癇前期患者中，F(xiàn)N1的DMR(cg03228449，cg26950867和cg11309217)和DMI(chr2：216300267-216300997)顯示低甲基化[5]。提示低甲基化是子癇前期患者血清中FN1高水平的原因之一。ITGA5與FN1相互作用并相互關(guān)聯(lián)[5]。ITGA5在細(xì)胞中介導(dǎo)三種途徑，包括Focal粘附，淋巴管內(nèi)皮中的VEGFR3信號(hào)傳導(dǎo)和β1整合素細(xì)胞表面相互作用[19]。提示FN1可能通過(guò)調(diào)節(jié)粘著斑、VEGFR3信號(hào)傳導(dǎo)、β1整合素來(lái)誘導(dǎo)先兆子癇。在本研究中，發(fā)現(xiàn)血清中FN1診斷子癇前期的靈敏度和特異度分別為97%和60%。盡管其特異度僅有60%，但是其高達(dá)97%的靈敏度提示其可成為聯(lián)合診斷中的一員。

TIMP1為調(diào)節(jié)細(xì)胞分化，遷移和細(xì)胞死亡的生長(zhǎng)因子[6，20]。TIMP1是主要的MMP-9抑制劑。在本研究中，發(fā)現(xiàn)子癇前期患者血清中TIMP1的表達(dá)量均高于健康妊娠婦女。在子癇患者血清中，TNF-α水平會(huì)增加，TNF-α可能會(huì)改變胎盤(pán)血管中粘附分子的表達(dá)，并可能導(dǎo)致先兆子癇中MMP家族蛋白的異常產(chǎn)生[21]。MMP可以反過(guò)來(lái)增加細(xì)胞因子或促進(jìn)它們對(duì)ROS的作用，從而引起先兆子癇的前饋循環(huán)。因此，TIMP1可能是機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生分泌來(lái)抵抗先兆子癇的一種蛋白分子。在本研究中，發(fā)現(xiàn)血清中TIMP1診斷子癇前期的靈敏度和特異度分別為88%和85%。因此，血清TIMP1水平在區(qū)分子癇前期患者和健康孕中期妊娠婦女中顯示出較好的診斷能力。