劉春麗 羅孝坤 李建英 尚陸娥 張微思 楊珍福 岳萬松 劉紹雄*
(1.中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所,昆明650221;2.云南省供銷合作社科學研究所,昆明650221)
桉樹為桃金娘科(Myrtaceae)桉樹屬(Eucalyptus)的總稱,是世界性的短周期工業原料林樹種,作為造紙的主要原料,我國南方地區1973年來大面積引種澳大利亞尾葉桉等品種,我國桉樹人工林面積約為260萬公頃,其中云南23.6萬公頃[1]。桉樹人工林剩余物量較大,多被丟棄或焚燒,造成嚴重的資源浪費和環境污染。
木耳(Auricularia ssp.)作為一種日常菜肴,含有蛋白質、粗多糖、礦物質、膳食纖維等多種營養成分,具有抗氧化、抗凝血、抑菌、降血糖和預防動脈粥樣硬化等生理活性[2~4]。各地栽培面積和產量快速持續增長。但其作為木腐型食用菌,面臨新、老產區木屑短缺、菌林矛盾日益突出的問題[5]。本研究篩選不同木耳菌株及不同桉樹木屑比例配方,以期解決桉樹人工林剩余物資源出路和木耳栽培原料的匱乏問題。
(1)供試菌株。選取6 個木耳菌株作為供試菌株(表1),均來源于中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所菌種中心。

表1 供試菌株
(2)培養基。母種(一級種)培養基:PDA培養基(馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g,水1 000 mL)。
菌株篩選試驗的原種配方設2 個:①細木屑82%,麥麩15%,石灰1%,石膏1%,普鈣(普通過磷酸鈣)1%;②桉樹木屑82%,麥麩15%,石灰1%,石膏1%、普鈣1%。
配方篩選試驗的原種培養料配方設5 個(表2)。

表2 原種配方配料表(%)
(1)菌株篩選。按兩個配方配制原種培養料,含水量約65%。裝瓶后于121 ℃高壓滅菌2 h,冷卻后每配方每菌株各接母種20 瓶,置于24 ℃培養箱避光培養。培養期間觀察記錄菌絲長勢、滿瓶時間及污染率等情況。
(2)配方篩選。選取菌株篩選試驗中表現優良的菌株,按表2配方分別配制培養料,每菌株每配方各設20 個重復,置于24 ℃培養箱培養,記錄菌絲顏色、生長速度和滿瓶時間。
(3)原種培養過程中木質素、纖維素、半纖維素檢測。當原種菌絲長滿瓶后分別取瓶體中部培養料檢測木質素、纖維素和半纖維素,每個樣品設3 個重復,纖維素含量測定采用蒽酮法[6];半纖維素含量測定采用鹽酸水解法[7];木質素含量測定采用硫酸酸解-滴定法[7]。
菌株篩選結果(表3)顯示,黑40、黑38 和黑39 菌株在桉樹木屑培養料上生長較好,滿瓶較快;黑37、黑41、玉1 菌株菌絲生長緩慢,顏色淡而稀??;在對照細木屑培養基上6 個菌株菌絲長勢均良好,潔白濃密,滿瓶時間在30~35 天之間。

表3 桉樹木屑對6 個木耳菌株原種菌絲生長的影響
試驗結果表明,黑39、黑38、黑40 三個菌株在5 個原種培養料配方上都能較好生長,菌絲均潔白濃密,以配方5 的菌絲滿瓶時間最短。其中,滿瓶最快的是黑39,僅需25.8 天;其次是黑38,為26.4 天;黑40 最慢,需28.5 天(表4,圖1)。
由表5可知,黑39 菌株在5 個配方中半纖維素含量均為最低。表明其分解半纖維素的能力強于其他菌株,這也解釋了黑39 菌株菌絲顏色及長勢較好的原因。
由表6可以看出,3 個菌株不同配方培養料的木質素含量與桉樹木屑的添加量沒有相關性;半纖個菌株受桉樹木屑的影響較小,適合在以桉樹木屑 維素的含量與桉樹木屑的添加量有極顯著相關性;纖維素的含量,黑38 菌株與桉樹木屑的添加量沒有相關性,而黑39、黑40 與桉樹木屑的添加量有顯著相關性。

表4 5 個原種配方的黑38、黑39、黑40 菌絲生長情況

圖1 5 個原種配方黑40(寧洱)的菌絲生長情況

表6 不同配方的纖維素、半纖維素、木質素含量與桉樹木屑添加量的相關性分析
從圖2可以看出,黑39 菌株培養基中纖維素和半纖維素含量與桉樹木屑添加量總體呈正相關性,且相關性分別達到顯著和極顯著水準;木質素含量與桉樹木屑添加量沒有相關性。
6 個木耳菌株在桉樹木屑和普通細木屑上的菌絲長速及形態對比結果,黑39、黑38、黑40 三 為主的培養料中生長。

表5 菌絲長滿后不同配方培養料的纖維素、半纖維素和木質素含量

圖2 桉樹木屑添加比例與培養黑39 菌株后培養料中纖維素、半纖維素和木質素含量的關系
配方篩選結果,桉樹木屑添加量為60%時,黑39、黑38、黑40 菌絲滿瓶時間短,菌絲長速快,平均滿瓶時間比細木屑少5.56 天。
檢測結果顯示,桉樹木屑的添加量對3 個菌株的原種培養料中木質素、纖維素、半纖維素的利用有一定的影響,其中半纖維素含量與桉樹木屑的添加量有極顯著的相關性。表明桉樹木屑對某些木耳菌株的生長具有一定的促進作用,可選擇性地用于黑木耳菌株原種的生產。