不同溶血性大腸桿菌的分離與鑒定

杜榮起，任君，喬啟，張晴，劉燕霏，楊建德

（天津農(nóng)學(xué)院 動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，天津 300384）

大腸桿菌（E.coli）在自然界中廣泛存在，在1885年被德國細菌學(xué)家Escherich分離出來[1]。大腸桿菌不僅是寄生在人體、動物體胃腸道的優(yōu)勢菌群，同時能引起動物和人類的感染，其腸外感染與毒力因子有關(guān)。溶血素是腸外感染較重要的致病因子，按照抗原的成分不同可分α溶血、β溶血、γ溶血3種，這3種溶血素可作為疾病嚴重程度評價的準(zhǔn)則[2]，溶血素可作用于紅細胞、血小板，破壞溶酶體，導(dǎo)致組織缺血性壞死[3]。在獸醫(yī)臨床中，溶血性大腸桿菌可引起豬、犬、牛、鹿、水貂、雞、鴨的敗血癥、膿血癥和腹瀉[4]。在醫(yī)學(xué)臨床中，溶血性大腸桿菌可引起敗血癥、腹膜炎、沙眼和尿道感染[5]。隨著人們生活水平的提高，飼養(yǎng)寵物成為人們享受生活的一種方式。而伴侶動物可攜帶多種人獸共患病，對人類的健康構(gòu)成潛在的威脅。本文對兩株不同溶血性大腸桿菌進行分離與鑒定，以期為治療此類相關(guān)感染提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 病料來源

某動物醫(yī)院，病例1為2018年10月18日收治的4歲齡母犬，病例2為2018年11月6日收治的9歲齡母犬，均患有子宮蓄膿。

1.2 試劑

1.2.1 培養(yǎng)基：麥康凱培養(yǎng)基、血液平板培養(yǎng)基、普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。

1.2.2 腸桿菌科生化鑒定管：葡萄糖、麥芽糖、尿素等，購自杭州生物研究所。

1.2.3 藥敏試劑片：氨曲南、頭孢噻肟、哌拉西林等，購自杭州微生物試劑公司。

1.2.4 分離菌株16S rRNA 基因序列PCR擴增，上游引物 5＇-CAGAGTTTGATCCTGGCT-3＇、下游引物5＇-AGGAGGTGATCCAGCCGCA-3＇由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，dNTP和Taq酶均購自生工生物工程（上海）股份有限公司。……