IL-6聯合中性粒細胞與淋巴細胞比值對三陰性乳腺癌的預后評估價值

楊棋智，阮曉曉，徐丹丹

（徐州醫科大學附屬醫院，江蘇 徐州 221006）

乳腺癌是女性發病率最高的惡性腫瘤，嚴重降低了女性的健康水平[1]。三陰性乳腺癌是乳腺癌中的一種特殊類型，其具有惡性程度高、侵襲力強、易復發和易轉移等特點[2]。目前對三陰性乳腺癌患者預后的評估主要通過TNM分期、淋巴結轉移等指標，然而上述指標并不具有特異性。近年來有研究發現，慢性炎癥對腫瘤發生、發展有促進作用，腫瘤相關的慢性炎癥過程會破壞機體的免疫反應，引起免疫反應失衡，導致腫瘤的發生。中性粒細胞與淋巴細胞比值是評估系統炎癥反應簡單且較為可靠的因子，目前有研究證實其與多種惡性腫瘤的預后相關，包括胃癌、肝癌、直腸癌、胰腺癌等[3-4]。IL-6是另一種可以預測腫瘤預后的炎癥因子，SHIMURA等[5]研究發現術前血清IL-6可能是三陰性乳腺癌預后的獨立影響因素。為了進一步提高三陰性乳腺癌預后評估的準確性，本研究擬聯合檢測三陰性乳腺癌患者術前血清中性粒細胞與淋巴細胞的比值和IL-6水平，評估其與三陰性乳腺癌患者預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年1月—2016年5月徐州醫科大學附屬醫院甲乳外科收治的經術后病理確診為三陰性乳腺癌的患者127例。患者均為女性，年齡27～53歲，平均（45.65±6.58）歲。納入標準：①術前未行放化療及其他輔助治療；②無遠處轉移；③術前3個月內無急慢性感染病史；④術前6個月內無激素藥物服用史；⑤病史記錄及隨訪資料完整。排除標準：①嚴重心血管、內分泌等內科合并癥；②凝血功能異常；③其他惡性腫瘤病史。患者及家屬均簽署知情同意書，本研究獲醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 一般資料詳細記錄患者入院時的基本資料，為所有三陰性乳腺癌患者建立檔案，記錄年齡、性別、體重指數（BMI）、病史、合并癥、病程、腫瘤大小、病理學類型、TNM分期等情況。

1.2.2 血清中性粒細胞與淋巴細胞比值和IL-6的 測定患者均于手術當日清晨空腹抽取靜脈血2 ml，采用LH7501850全自動五類血液分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）檢測血常規，試劑及質控品均為原裝配套，嚴格按照標準操作規程執行。

采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測外周血IL-6，ELISA試劑盒購自泉州藍圖生物科技有限公司，按照試劑盒說明書將樣品血清加入ELISA反應板中測定IL-6水平，每個樣品重復3次。

1.2.3 手術方式患者入院后予以二級護理，低脂飲食并積極術前準備，控制血壓；擇期在全身麻醉下行乳腺癌改良根治術。術后密切觀察患者的生命體征變化和傷口滲血情況，予以一級護理，禁食，吸氧，心電監護，靜脈輸注抗炎、保肝、抑酸、抑酶及止咳化痰藥物，維持水電解質平衡。

1.2.4 隨訪對所有患者進行為期3年的隨訪，首次隨訪為術后3個月，之后每隔3個月門診或電話隨訪1次。終點事件定義為患者隨訪期間發生不良預后事件，包括三陰性乳腺癌復發、TNM分期上升、腫瘤出現轉移及三陰性乳腺癌并發癥導致的死亡。患者拒絕隨訪、中途退出、死于其他與研究無關的原因定義為失訪。根據隨訪結果，將出現終點事件的患者定義為預后不良組，其余患者定義為預后良好組。分析兩組的一般資料、中性粒細胞與淋巴細胞比值。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS 19.0統計軟件。單因素Cox回歸分析篩選三陰性乳腺癌預后差異有統計學意義的因素，影響因素的分析用多因素Cox回歸模型，Kaplan-Meier法繪制生存曲線，采用受試者工作特征（receiver operating characteristic ROC）曲線評估潛在指標對三陰性乳腺癌預后的預測能力，利用Logistic回歸模型建立聯合診斷，P＜0.05為差異有統計學 意義。

2 結果

2.1 患者一般資料分析

患者平均腫瘤直徑（3.62±0.72）cm；TNM分期Ⅰ期32例，Ⅱ期64例，Ⅲ、Ⅳ31例；無淋巴結轉移76例，伴淋巴結轉移51例；浸潤性導管癌85例，浸潤性小葉癌24例，其他浸潤性癌18例。

2.2 隨訪結果

7例患者失訪，101例患者到隨訪結束未發生終點事件，19例患者出現了終點事件，其中三陰性乳腺癌復發11例、分期上升4例、轉移3例及死亡1例。Kaplan-Meier生存曲線顯示，隨著時間延長，患者中不良預后例數增多，在隨訪第29個月產生不良預后的例數增長較為明顯，患者的不良預后率為14.96%。見圖1。

2.3 三陰性乳腺癌預后的單因素Cox回歸分析

將可能影響三陰性乳腺癌患者預后的因素（年齡、BMI、家族史、腫瘤大小、淋巴結轉移、TNM分期、絕經、癌胚抗原、糖類抗原125、糖類抗原153、中性粒細胞與淋巴細胞比值及IL-6）逐個納入Cox比例風險模型中進行單因素Cox回歸分析，因變量為不良預后事件，結果顯示：TNM分期、癌胚抗原、糖類抗原125、中性粒細胞與淋巴細胞比值及IL-6是三陰性乳腺癌預后的影響因素（P＜0.05）。見表1、2。

2.4 三陰性乳腺癌預后的多因素Cox回歸分析

篩選單因素Cox回歸分析中差異有統計學意義的因素進行多因素Cox回歸分析，因變量為不良預后事件，結果顯示：癌胚抗原、中性粒細胞與淋巴細胞比值及IL-6是影響預后的獨立危險因素（P＜0.05）。見表3、4。

圖1 患者不良預后生存曲線

表1 單因素Cox回歸分析影響因素賦值

表2 三陰性乳腺癌預后的單因素Cox回歸分析參數

2.5 各因素單獨或聯合預測三陰性乳腺癌預后的評估

中性粒細胞與淋巴細胞比值與IL-6聯合預測三陰性乳腺癌預后的AUC最高，高于兩者單獨診斷，IL-6的AUC高于中性粒細胞與淋巴細胞的比值。見表5和圖2。

表3 多因素Cox回歸分析影響因素賦值

表4 三陰性乳腺癌預后的多因素Cox回歸分析參數

表5 各因素單獨或聯合預測三陰性乳腺癌預后的能力評估

圖2 各因素單獨或聯合預測三陰性乳腺癌預后的ROC曲線

3 討論

三陰性乳腺癌與其他類型乳腺癌患者相比預后差、易轉移且死亡率高[6]。因為其雌激素受體、孕激素受體和原癌基因Her-2均為陰性，具有特殊的生物學行為，內分泌治療效果欠佳[7]。目前有研究發現，炎癥反應伴隨腫瘤進展的整個過程，炎癥反應會誘發DNA突變，進而加強腫瘤細胞增殖，促進腫瘤細胞的侵襲和轉移；另一方面，腫瘤也會促進機體的炎癥反應，兩者相互作用，互為因果，形成一種惡性反應過程[8]。因此，如果能夠準確評估炎癥的嚴重程度，在一定程度上也可以預測腫瘤的嚴重程度及預后。中性粒細胞與淋巴細胞是主要的炎癥反應細胞，并且易于檢測，近年來已成為腫瘤預測指標的研究熱點。IL-6是另一種炎癥因子細胞，在炎癥反應過程中發揮著重大作用。SANGUINETTI等[9]研究發現IL-6與乳腺癌的微環境相關，這一理論提示IL-6有望為診斷和治療提供一定的依據。單一指標評估疾病的預后容易受其他因素的干擾。本研究探討中性粒細胞與淋巴細胞比值聯合IL-6對三陰性乳腺癌預后的預測能力，旨在提高預測三陰性乳腺癌預后的準確性，為臨床評估病情提供依據。

為了準確收集三陰性乳腺癌患者的預后情況，本研究對參與研究的127例三陰性乳腺癌患者進行了為期3年的隨訪，隨訪結果顯示7例患者失訪，101例患者到隨訪結束未發生終點事件，19例患者出現了終點事件，其中三陰性乳腺癌復發11例、分期上升4例、轉移3例、死亡1例，在隨訪第29個月產生不良預后的例數增長較為明顯，患者的不良預后率為14.96%。這一結果與QIU等[10]在三陰性乳腺癌和非三陰性乳腺癌預后比較中的研究結果基本相符合，說明本研究中三陰性乳腺癌患者基本符合三陰性乳腺癌的流行病學特征。

當人體出現腫瘤時，機體的多個因素都會發生變化。因此本研究將可能影響三陰性乳腺癌預后的因素均納入Cox單因素分析。結果顯示TNM分期、癌胚抗原、糖類抗原125、中性粒細胞與淋巴細胞比值及IL-6對三陰性乳腺癌預后影響顯著。CHEN等[11]的研究也證實了血清中癌胚抗原水平越高，三陰性乳腺癌預后越差；LIU等[12]在中性粒細胞與淋巴細胞比值和乳腺癌預后關系的Meta分析中發現，當中性粒細胞與淋巴細胞比值升高時預示乳腺癌預后較差，這兩項研究結果與本研究基本相符合。為進一步篩選影響三陰性乳腺癌預后的獨立危險因素，本研究將單因素分析有意義的因素進一步納入多因素Cox回歸分析中，結果顯示癌胚抗原、中性粒細胞與淋巴細胞比值和IL-6是影響預后的獨立危險因素；根據值，對患者預后的影響從大到小依次是癌胚抗原、中性粒細胞與淋巴細胞的比值、IL-6。CLAUDIO等[13]也證實中性粒細胞和淋巴細胞比值對三陰性乳腺癌化療預后也有一定的價值。

為進一步評估中性粒細胞與淋巴細胞比值和IL-6對三陰性乳腺癌預后的評估效能，本研究繪制中性粒細胞與淋巴細胞比值、IL-6和兩者聯合診斷預測三陰性乳腺癌預后的ROC曲線，結果發現中性粒細胞與淋巴細胞比值與IL-6聯合預測三陰性乳腺癌預后的AUC最高。JIN等[14]的研究發現，阻斷IL-6信號通路可以抑制三陰性乳腺癌的進展和轉移，該結果從側面反映了IL-6對三陰性乳腺癌的預后有一定的診斷價值，與本研究結果基本一致。

然而，本研究也存在一定的不足之處，研究結果僅能代表當地的情況，為了使研究結果更具有推廣性及代表性，未來仍需要多中心大樣本的臨床研究，從而為三陰性乳腺癌預后的評估提供更加可靠的 依據。

綜上所述，本研究證實中性粒細胞與淋巴細胞比值和IL-6對三陰性乳腺癌的預后具有一定的評估價值，兩者聯合診斷可作為三陰性乳腺癌預后的診斷 指標。