MG患者外周血單個核細胞TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF的變化與其病情程度的關系

劉新華 鄧建中 范仲鵬

重癥肌無力（Myasthenia gravis，MG）屬于獲得性自身免疫性疾病，病變常累及神經、肌肉接頭突觸后膜，使其信號傳遞發生障礙，進而出現骨骼肌收縮無力。隨著病情的進展，可出現肢體無力、眼瞼下垂、吞咽困難、構音障礙等，嚴重影響患者的身心健康[1]。目前臨床對于MG的發病機制尚未完全闡明，尚缺乏徹底根治MG的方法，已有的研究認為與攜帶易感基因、環境因素等有關[2]。

目前臨床上缺乏MG早期診斷的敏感實驗室指標，已有的研究認為MG的發生受到多種神經細胞因子的調控[3]。外周血單個核細胞中腫瘤壞死因子α誘導蛋白3交互作用蛋白1（TNIP1）蛋白可抑制NF-kB細胞，可保護神經細胞，并抑制其凋亡[4]。血清白球蛋白比值（Albumin globulin ratio，AGR）反應機體抗氧化、抗炎能力[5]。血漿血小板源性生長因子（platelet-derived growth factor，PDGF）可調節細胞增殖、分化和遷移過程，促進髓鞘再生，與多種神經系統免疫性疾病有關[6]。本研究探討了MG患者外周血單個核細胞中TNIP1蛋白、AGR、PDGF的變化及與患者病情的關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2014年1月至2017年1月在本院收集的90例MG患者（MG組）、選取健康體檢對象90例（對照組）。MG組，年齡26～75歲，平均（51.3±11.3）歲；男42例、女48例，病程3個月至6年，平均（2.8±1.4）年；MG分型：眼肌型51例、全身型39例。對照組，年齡25～79歲，平均（50.4±13.0）歲；男45例、女45例。兩組對象的年齡、性別比較，差異不具有統計學意義，具有可比性。

納入標準：①MG患者的診斷標準參考《中國重癥肌無力診斷和治療指南2015年版》[7]中的標準；②納入對象年齡19～79歲；③患者入院后經肌電圖檢測確診；④本研究取得研究對象的知情同意及醫學倫理委員會的批準。

排除標準：①妊娠及哺乳期婦女；②近3個月服用激素、免疫抑制劑藥物；③腦卒中病史；④頭顱外傷病史；⑤神經系統病史；⑥惡性腫瘤。

1.2 指標檢測方法

抽取研究對象空腹靜脈血，3000r/min離心分離血清。采用溴甲酚氯染料結合法檢測血清總蛋白、白蛋白水平。AGR=白蛋白/（總蛋白-白蛋白）。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測血清TNIP1蛋白、PDGF。檢測儀器為美國伯騰全自動酶標儀，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3 QMGS評分標準

重癥肌無力定量評分（QMGS）[3]包括復視、瞼下垂、面肌、吞咽、發音、左右上肢、肺活量、左右手握力、抬頭、左右腿測試，總分0～39分，評分越高表示患者的病情越嚴重。

1.4 統計學方法

統計軟件采用SPSS 16.0版本，計量資料用（±s）的表示，兩組間比較采用t檢驗、組間比較采用χ2檢驗；數據之間的相關性采用Pearson線性相關分析法，多因素分析采用多元線性回歸分析法；P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 2組對象的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較

MG組患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平均顯著的低于對照組，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 2組對象的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較[n=90，（±s）]Table1 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in 2 groups of subjects[n=90，（±s）]

表1 2組對象的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較[n=90，（±s）]Table1 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in 2 groups of subjects[n=90，（±s）]

組別MG組對照組t值P值TNIP1蛋白（相對表達）0.52±0.160.81±0.1014.581＜0.001AGR 1.39±0.171.83±0.2015.902＜0.001PDGF（pg/mL）6.32±1.8010.57±1.16 18.828＜0.001

2.2 不同類型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較

眼肌型MG組患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平均顯著的高于全身型MG患者，差異具有統計學意義（P＜0.05），眼肌型MG患者QMGS評分顯著的低于全身型MG患者（P＜0.05）；（表2）。

表2 不同類型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較[n，（±s）]Table2 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in different types of MG patients[n，（±s）]

表2 不同類型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF比較[n，（±s）]Table2 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in different types of MG patients[n，（±s）]

分型眼肌型全身型t值P值n 5139 TNIP1蛋白相對表達0.64±0.120.43±0.1510.371＜0.001AGR 1.48±0.111.28±0.1410.657＜0.001PDGF（pg/mL）7.15±1.655.60±1.736.151＜0.001QMGS評分（分）18.4±1.4 22.8±2.76.151＜0.001

2.3 MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF與患者病情的關系

MG組患者的TNIP1蛋白（r=-0.682，P＜0.001）、血清AGR（r=-0.558，P＜0.001）、血漿PDGF（r=-0.629，P＜0.001）水平與患者的QMGS評分均呈顯著的負相關關系（P＜0.05）。采用多元線性回歸分析，QMGS評分=38.062-5.571（TNIP1蛋白）-2.664（AGR）-0.883（PDGF）。

3 討論

MG是臨床常見的獲得性自身免疫性疾病，發病原因不明，可能與自身免疫異常、感染、藥物、環境等諸多因素有關[8]。目前多數學者認同MG是攜帶易感基因的個體在環境影響下出現免疫異常，產生抗體攻擊神經肌肉接頭突觸后膜，進而引起骨骼肌無力。MG不僅可影響運動神經系統而致殘，隨著病程進展還可影響心臟功能而導致患者死亡[9]。

有研究認為，MG的發病與自身反應性B細胞活化為漿細胞后分泌自身抗體有關，因此80%以上的MG患者合并胸腺瘤、胸腺增生等胸腺異常情況[10]。因此臨床上常采用胸腺切除術治療MG，大多數患者病情可以得到良好的控制[11]。目前臨床對于MG的臨床診斷以新斯的明試驗、胸腺CT、MRI、肌電圖、乙酰膽堿受體抗體滴度檢查等為主，常采取多個檢查結果相結合進行診斷，尚缺乏特異性好、靈敏度高的實驗室診斷指標[12]。

TNIP1蛋白在NF-kB信號通路中起到負反饋調節作用。有研究發現，NF-kB細胞激活后進入細胞核，促進增殖細胞因子合成。而TNIP1蛋白可抑制NF-kB的上述作用，對炎癥性疾病產生一定的保護作用[13]。本研究中MG患者的TNIP1蛋白水平顯著的低于健康人群。這一結果提示，MG患者外周血TNIP1蛋白水平顯著降低，可將其作為MG診斷的輔助指標之一。MG患者TNIP1蛋白水平較低，在NF-kB信號通路中的負反饋調節作用減弱，不能抑制炎癥性疾病的發生。

白蛋白是由肝臟合成的重要蛋白，參與機體抗氧化、抗炎過程，對自身免疫反應進行調節。免疫性疾病患者免疫球蛋白水平升高，白蛋白降低，由此導致血清AGR下降[14]。本研究中MG患者的血清AGR水平顯著的低于健康人群。這一結果提示，MG患者外周血血清AGR水平顯著降低，可將其作為MG診斷的輔助指標之一。MG患者肝臟合成白蛋白減少，對自身免疫反應的調節作用減弱，這可能是MG患者自身免疫功能異常的原因之一。

PDGF是人體重要的生長因子，與受體結合后啟動多種信號通路，參與細胞增殖、分化、遷移。有研究發現，PDGF可調節少突膠質細胞向脫髓鞘部位遷移而促進髓鞘修復[15]。本研究中MG患者的PDGF水平均顯著的低于健康人群。這一結果提示，MG患者外周血PDGF水平顯著降低，可將其作為MG診斷的輔助指標之一。MG患者PDGF水平下降，影響多種信號通路，不能較好的調節少突膠質細胞向脫髓鞘部位遷移，不利于髓鞘修復而致肌無力。

根據病變的嚴重程度可將MG患者分為眼肌型MG和全身型MG。眼肌型MG患者的病情較輕，病變僅局限于眼肌周圍。而全身型MG患者病情較嚴重，已累及全身骨骼肌。本研究發現，眼肌型MG患者QMGS評分顯著的低于全身型MG患者，這一結果也證實，全身型MG患者的病情更加嚴重。本研究還細化分析了不同病變程度的MG患者TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平的變化，發現眼肌型MG組患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平均顯著的高于全身型MG患者，這一結果提示，隨著MG病情的進展，患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平均進一步下降。相關性檢查結果也證實，MG組患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平與患者的QMGS評分均呈顯著的負相關關系。這一結果提示，MG患者外周血TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平的下降與患者病情加重有關，可將其作為評估MG病情和預后的指標。

綜上所述，MG患者外周血TNIP1蛋白、血清AGR、血漿PDGF水平降低顯著，并且與患者病情加重有關。