兩種酶制劑與三種益生菌協同對種鴨生產性能的影響

劉恩，高鑫，宋蕙男，徐福利，王杲強，單春喬,2，劉艷,2*

(1. 江蘇三儀科研質量控制中心，江蘇 邳州 221300；2. 大連三儀生物工程研究所，遼寧 大連 116036)

目前，歐盟及中美等國已經出臺政策在畜禽飼料中禁止或慎重添加抗生素[1]。由于抗生素在抵抗畜禽細菌感染和促進生長方面的功效，在其被限制使用乃至禁用前曾被獸醫和畜牧從業者廣泛使用。根據Jones等[2]的統計，當作添加劑或藥物用在家禽生產上的抗生素多達30余種，而在畜禽用抗生素中，有超過13.7%的抗生素被用來當作促進生長的添加劑使用。

在尋找家禽抗生素替代品的探索中，益生菌[3]和酶制劑被逐漸重視。微生物對家禽的益生作用主要表現在促進生長、改善腸道黏膜結構，促進腸道和機體健康、促進對營養物質的消化吸收、降解細胞毒性物質、合成維生素、抑制病原菌、刺激腸道蠕動、刺激免疫系統、產生揮發性脂肪酸及抗菌物質等[4]。

單胃動物如家禽、豬等不能合成降解吸收營養物質的全部酶類，因此在飼料中添加外源酶有助于單胃動物更好的吸收利用飼料中的養分。在過去的多年中，像纖維素酶、木聚糖酶、植酸酶、脂肪酶、蛋白酶、半乳糖苷酶等都得到了應用。家禽飼料中添加的酶類被廣泛應用于降低食糜黏稠度和降解未經熟化的飼料原料中的果膠、纖維素、交聯β-葡聚糖等非淀粉多糖。

目前大量的研究集中在益生菌或酶制劑各自對畜禽發揮作用的研究上，關于酶和益生菌在畜禽飼喂過程中聯合使用的研究較少，尤其對種鴨相關生產性能的研究寥寥無幾。本研究重點關注了復合酶(纖維素酶和蛋白酶)與益生菌(枯草芽孢桿菌、丁酸梭菌、糞腸球菌)制劑對不同周齡肉種鴨種蛋性能的影響，探討了復合酶與益生菌制劑相互作用的可能，為后續基礎研究以及生產應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗用種鴨

選取健康狀況良好且生產性能接近的8棚父母代肉種鴨(櫻桃谷SM3)，其中33周齡產蛋高峰期種鴨4棚，70周齡產蛋末期種鴨4棚，各棚種鴨數量均為2 760羽(公鴨460羽，母鴨2 300羽)。每個周齡段4棚種鴨隨機分為菌酶復合組、酶制劑組、菌制劑組、空白對照組。每組種鴨隨機平均分3個重復。

1.2 飼喂和管理

7天預飼期，預飼期內各棚種鴨飼喂基礎飼糧。待各周齡4棚種鴨生產性能無顯著差異后正式試驗。正式試驗開始后，空白對照組飼喂基礎飼糧，在此基礎上酶制劑組按照500 g/t的添加量投喂混合酶制劑；菌制劑組按照500 g/t的添加量投喂混合益生菌制劑；菌酶復合組每天除飼喂基礎飼糧外按照500 g/t的添加量拌料投喂酶加益生菌制劑。試驗周期為46 d。

試驗周期內各周齡種鴨自由采食飲水，保持每天光照時間17 h。

試驗用酶制劑、菌制劑和酶加益生菌混合制劑均由江蘇三儀生物工程有限公司提供，酶制劑由蛋白酶和纖維素酶組成，總酶活為300萬U/t；菌制劑由丁酸梭菌、糞腸球菌和枯草芽孢桿菌組成，總活菌數為1.2×1012CFU/g；酶加益生菌制劑由前述2種酶和3種益生菌共同組成，總酶活為300萬U/t，總活菌數為1.2×1012CFU/g。種鴨基礎飼糧，營養水平參照NRC(1994)家禽營養需要量設計。基礎飼糧組成及營養水平見表1。

1.3 試驗檢測指標

每隔3天收取并統計各組種蛋的平均蛋重、可孵率、正品率、破蛋率、無精蛋率、孵化率。

平均蛋重=總蛋重/產蛋總數

可孵率=(入孵蛋數/產蛋總數)×100%

正品率=(正品蛋數/產蛋總數)×100%

破蛋率=(破損蛋數/產蛋總數)×100%

無精蛋率=(未受精蛋數/產蛋總數)×100%

孵化率=(出殼的全部雛雞數/入孵蛋數)×100%

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1)多維和微量元素為每千克飼糧提供：VA 1500 mg，VD3200 IU，VE 12.5 mg，VK 1.5 mg，VB12.2 mg，VB25.0 mg，煙酸 nicotinicacid 65 mg，VB62 mg，生物素biotin 0.2 mg，泛酸 pantothenate 15 mg，膽堿 choline 1000 mg，Fe 90 mg，Cu 12 mg，Mn 85 mg，Zn 85 mg，I 0.42 mg，Se 0.3 mg，Co 2.5 mg

2)代謝能為計算值，其余為實測值

1.4 統計分析

各項統計數據均經過SPSS 20.0單因素方差分析(one-way ANOVA, LSD)處理，并用Duncan法進行多重比較，結果以平均值和均值標準誤(SEM)表示，P<0.05表示數據差異顯著。

2 結果與分析

2.1 酶加益生菌制劑對70周齡種鴨生產性能的影響

蛋重：表2結果表明，試驗開始10 d以后，菌酶復合組較其他三組開始出現顯著差異(P<0.05)并保持到試驗結束，菌酶復合組蛋重較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了1.30%、1.74%、3.08%。

可孵率：菌酶復合組與酶劑組和菌劑組無顯著差異(P>0.05)，與對照組有差異顯著(P<0.05)；菌酶復合組可孵率較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了1.08%、1.32%、4.06%。

正品率：菌酶復合組與酶劑組無顯著差異(P>0.05)，與菌劑組和對照組均有顯著差異(P<0.05)；菌酶復合組正品率較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了1.46%、2.45%、5.29%。

破蛋率：從統計結果來看，菌酶復合組破蛋率比酶劑組、菌劑組、對照組分別降低了10.6%、4.55%、19.2%。

無精蛋率：菌酶復合組與酶劑組、菌劑組均無顯著差異(P>0.05)，與對照組差異顯著(P<0.05)；菌酶復合組無精蛋率比酶劑組、菌劑組、對照組分別降低了5.08%、5.08%、17.6%。

孵化率：菌酶復合組與酶劑組、菌劑組均無顯著差異(P>0.05)，與對照組差異顯著(P<0.05)；菌酶復合組無精蛋率比酶劑組、菌劑組、對照組分別升高了0.22%、0.33%、1.23%。

表2 “酶加益生菌”制劑對70周齡種鴨生產性能的影響

項目組別對照組酶劑組菌劑組 菌酶復合組均值標準誤P值 蛋重/g90.84a92.39bc92.02b93.56c0.24<0.01可孵率/%81.26a83.73b83.49b84.63b0.28<0.01正品率/%79.43a82.40bc81.60b83.59c0.31<0.01破蛋率/%5.16a4.71b4.42bc4.19c0.07<0.01無精蛋率/%13.58a11.85b11.80b11.18b0.27<0.01孵化率/%89.16a90.07b90.04b90.30b0.14<0.05

同行數據肩標無字母或相同字母表示差異不顯著(P<0.05)，不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下同

2.2 酶加益生菌制劑對33周齡種鴨生產性能的影響

蛋重：從表3結果可知，試驗開始的10 d以內菌酶復合組與菌劑組和對照組已經出現顯著差異(P<0.05)，試驗開始10 d以后菌酶復合組與酶劑組也出現顯著差異(P<0.05)，并保持到實驗結束。菌酶復合組蛋重較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了0.78%、1.12%、2.50%。

可孵率：菌酶復合組與酶劑組、菌劑組均無顯著差異(P>0.05)，但與對照組差異顯著(P<0.05)。菌酶復合組可孵率較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了0.54%、0.76%、1.87%。

正品率：菌酶復合組與酶劑組、菌劑組和對照組均無顯著差異(P>0.05)。菌酶復合組正品率較酶劑組、菌劑組、對照組分別增加了0.58%、1.52%、3.58%。

破蛋率：菌酶復合組破蛋率比酶劑組、菌劑組、對照組分別降低了18.1%、6.15%、37. 4%。

無精蛋率：菌酶復合組與酶劑組、菌劑組無顯著差異(P>0.05)，與對照組差異顯著(P<0.05)。菌酶復合組無精蛋率比酶劑組、菌劑組、對照組分別降低了5.26%、5.85%、12.6%。

孵化率：菌酶復合組與酶劑組無顯著差異(P>0.05)，與菌劑組和對照組差異顯著(P<0.05)。菌酶復合組孵化率比酶劑組、菌劑組、對照組分別升高了0.53%、0.85%、1.29%。

表3 “酶加益生菌”制劑對33周齡種鴨生產性能的影響

項目組別對照組酶劑組 菌劑組 菌酶復合組均值標準誤P值蛋重/g87.92a89.35bc89.06b90.13c0.17<0.01可孵率/%91.05a92.24b92.01b92.65b0.15<0.01正品率/%83.9386.3585.6086.900.72>0.05破蛋率/%1.95a1.49b1.30c1.22c0.05<0.01無精蛋率/%7.00a6.46ab6.50ab6.13b0.13>0.05孵化率/%93.17a93.94bc93.57ab94.44c0.13<0.01

3 討論

正常情況下，家禽出生后的幾天之內胃腸道中便會形成大約由400～500種微生物構成的微生物區系，含量約1014CFU/g腸內容物[5]。消化道內穩定的微生物區系是機體保持健康的重要保證。另外，動物機體需要借助自身或者微生物合成的酶類對食物進行消化吸收。酶對飼糧中不同組成成分的消化效果有很大差異。Haddadin等[6]報道，在20～68周齡的蛋雞飼料中添加乳桿菌培養物能明顯提高蛋重，改善蛋品質。Sohail等[7]發現添加益生菌和酶制劑都能夠提高產蛋率、蛋重和蛋品質。本研究結果顯示，無論是70周齡還是33周齡，單獨添加益生菌或酶制劑都能夠顯著增加種蛋的重量，這與Loh等[8]、Daneshyar等[9]、Kalavathy等[10]的研究結果一致。聯合添加酶制劑和益生菌制劑與單獨添加酶制劑、菌制劑組相比差異顯著。此外，本研究還發現，77周齡組種蛋重量普遍較33周齡組大，飼喂酶加益生菌制劑對產蛋末期種鴨蛋重的影響更明顯。Chen等[11]認為腸道內益生菌的生長抑制了病原菌，同時益生菌刺激小腸并增強酶類的活性，這增強了腸道的吸收能力，最終改善了種禽的生產性能。益生菌與酶制劑聯合使用，在發揮益生菌正常功能的同時及時補充了機體消化所需的外源酶，從而增加了營養和能量的吸收，增加了種蛋重量。

可孵率是一個較為寬泛的指標，通常又可細分為正品率和次品率。可孵率主要受蛋品質的影響，而鴨品種、日齡、環境、飼料以及飼養管理水平等都會對蛋品質產生影響。破蛋率是衡量蛋品質的一個重要指標，因此，通常情況下可孵率與破蛋率呈負相關。80%～90%的蛋品質不良是由于蛋殼裂紋或破碎導致的[12]，在蛋品生產過程中會出現6%～10%的破損，從而造成經濟損失。蛋殼質量通常會隨著家禽年齡的增加而降低，本實驗顯示，不同周齡種蛋的可孵率、正品率和破蛋率存在顯著差異。這主要是由于蛋重增加，而蛋殼中鈣含量降低、碳酸鹽沉積以及維生素D3代謝紊亂導致的。在產蛋末期，裂紋蛋的比例甚至會增加20%。Kurtoglu等[13]報道補充益生菌地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌增加了Brown-Nick雜種蛋雞的產蛋量并降低了破損蛋的百分比。Panda等[14]向處于產蛋后期的白來航種蛋雞飼糧中添加益生菌可提高產蛋率，飼料轉化率和蛋殼重。在48～64周齡白來航蛋雞飼料中添加益生菌蛋殼厚度和重量也顯著增加[15]。此外，也有研究表明，飼喂酶制劑對蛋殼厚度沒有影響[16]。本研究的結果與上述文獻較為一致，且本研究表明單獨使用酶制劑對改善破蛋率也有顯著影響。Karimi等[17]研究表明，飼料中添加植酸酶、α-淀粉酶、纖維素酶、蛋白酶等多種酶制劑混合物能夠顯著改善生長性能和小腸形態。益生菌改善了腸道環境，從而有助于同化更多的鈣、磷等礦物質[18]，使殼體鈣化殼重增大從而降低了種蛋的破損率。酶與益生菌的聯合使用顯著改善了蛋品指標。

無精蛋率的高低直接影響種蛋的孵化率。除此之外，種鴨品種、周齡、產蛋水平、種蛋品質、健康狀況及管理水平等諸多因素都會對孵化率產生影響。從本研究結果來看，33周齡組種蛋孵化率顯著高于77周齡組，而無精蛋率則顯著低于77周齡。Nickolova等[19]在俄羅斯27周齡鴨飼料中添加益生菌并未發現其對種蛋受精率有顯著影響，這與本研究中33周齡種蛋無精蛋率的統計結果相符。但77周齡種蛋無論是酶制劑組、菌制劑組還是混合制劑組，無精蛋率都較對照組有顯著升高。飼糧中維生素A、維生素D、維生素B以及礦物元素鈣、磷、鋅、錳等都會對種蛋孵化率產生影響。益生菌能夠促進機體對維生素尤其是B族維生素的吸收并且能夠通過提高腸道酶活力改善腸道健康[20]。長期飼喂益生菌制劑能夠使家禽十二指腸、空腸、回腸的腸絨毛高度、寬度以及隱窩深度明顯改善。外源酶制劑能夠破壞飼料中的抗營養因子釋放營養成分、增加淀粉、蛋白以及礦物質的生物利用率從而改善種蛋孵化率。

4 結論

酶與益生菌聯合應用的效果要好于單獨使用酶制劑或益生菌制劑。酶與益生菌聯合應用能夠有效的抑制高周齡種蛋可孵率、正品率的下降以及破蛋率、無精蛋率的上升，提高種蛋的蛋重和孵化率；能夠提升低周齡種蛋的可孵率和孵化率，促進低周齡種蛋破蛋率的降低。