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你對流感病毒了解多少

2020-03-18 04:31:33丁睿
特別健康·下半月 2020年3期
關鍵詞:檢測方法

丁睿

【中圖分類號】R363.2+1?????? 【文獻標識碼】B

【文章編號】2095-6851(2020)03-030-01

流行性感冒病毒(簡稱流感病毒)有甲、乙、丙三型,可引起人和動物流行性感冒(簡稱流感)。發生在1918-1919年的流感世界大流行,無疑是最著名的,在這次事件中,全球被感染的人數達到50%,死亡人數甚至超過了第一次世界大戰死亡總人數。我國也深受其害,如2009年的H1N1甲型流感,以及2013年的H7N9禽流感,都嚴重威脅人和動物的健康乃至生命,對社會的穩定發展造成惡劣影響。因此,建立精確、高效的流感病毒檢測方法,對于臨床診斷與治療患者以及遏制疾病的進一步擴散,都有重要意義。

一、流感病毒的概述

流感病毒屬正粘病毒科,結構如下:

(一)核心。病毒核酸為分節段的單負鏈RNA。和3個與核算復制轉錄有關RNA的RNA多聚酶蛋白PA、PB1、PB2和結合每個RNA片段的NP(有核蛋白)。NP與RNA合稱RNP(核糖核蛋白),RNP抗原性穩定,有著型特異性。

(二)包膜。流感病毒包膜有兩層結構。內層為病毒基因編碼的基質蛋白M1,能增加包膜的硬度和厚度,M蛋白也有著型特異性。外層則是宿主細胞的脂質雙層膜,甲型與乙型流感病毒包膜上鑲嵌有,由病毒基因編碼的糖白刺突,即NA(神經氨酸酶)與HA(血凝素),它們在流感病毒亞型劃分中起到重要依據。

根據RNP和M蛋白抗原性的不同流感病毒分為甲、乙、丙三型,甲型又根據HA和NA抗原性的不同劃分為若干亞型,乙型、丙型流感病毒尚未發現亞型。HA和NA易發生變異,尤其是HA。一旦導致新亞型的出現,極易引起世界性的流感暴發流行。近一個世紀,甲型流感病毒已經歷過數次重大變異。

流感病毒不耐熱,100℃ 1分鐘或56℃ 30分鐘可滅活。對常用消毒劑敏感,如過氧乙酸、含氯消毒劑、1%甲醛等。對紫外線敏感。耐低溫和干燥。

甲型流感病毒傳播迅速、威力兇猛,容易出現抗原變異,多次世界性大流行都是它所引起;乙型流感病毒抗原變異很慢,呈暴發或小流行;而丙型流感病毒只會讓人類上呼吸道出現輕度感染,造成流行的幾率很小,危害較弱。因此以下提及的檢測方法主要是針對甲型、乙型流感病毒。

二、流感病毒的實驗室檢測

(一)免疫學和血清學試驗。

膠體金法是一種體外免疫層析試驗,用于定性檢測鼻咽拭子樣本中的甲、乙型流感病毒核蛋白抗原,能對甲、乙型流感病毒感染進行快速地輔助鑒別診斷。最大優點是操作簡便,出結果快。而且鼻咽拭子的采集過程簡單無痛苦,病人依從性好。特異性良好,但是靈敏性不佳,假陰性率將近50%,這與膠體金方法本身的敏感性較低和鼻咽拭子樣本病毒含量不穩定有關。觀察結果時須注意,若對照線不變色或根本不出現,無論標本線是否出現,該次試驗都無效,須重新檢測。對甲或乙型流感病毒陽性標本,當對照線正常,只要標本線出現,即使顏色很淺,結果也判為陽性。結果為甲型流感病毒蛋白抗原陽性時,并不能對甲型流感病毒亞型做出特異性鑒別診斷,也不能排除存在其他共感染致病原的可能。

也可以用酶免疫測定法或是免疫熒光法,從病人呼吸道脫落細胞、分泌物中直接檢測抗原。

血清學實驗,包含株特異與亞型的血凝中和試驗與抑制試驗,抗原特異確定的酶免疫試驗和型特異的補體結合試驗。在流感病毒血清學診斷中,最常用到的是血凝抑制試驗。

(二)核酸檢測。

近些年,分子生物學技術應用越來越廣,其顯著優勢是快速、敏感,在呼吸道疾病暴發流行的病因調查、病毒基因進化研究、疫苗株基因序列和新變異株基因序列的差異比較等方面都發揮了良好作用。

1.RT-PCR檢測病毒核酸。

RT-PCR是當前鑒定流感病毒分型的常用方法之一,此方法敏感度高、特異性強、簡便快捷,能夠在幾小時內將標本中微量RNA檢出,打破了傳統流感病毒檢測方法的一些局限性。

2.實時熒光定量PCR檢測病毒核酸。

這一項技術,就是將熒光基團加入到PCR反應體系中,借助熒光信號積累對整個PCR進程做實時監測,再利用標準曲線定量分析未知模板的方法。這一方法,使傳統定量只能終點檢測的局限得以良好解決,每一輪循環都檢測一次熒光信號的強度,并在電腦軟件中記錄,通過計算所有樣本Ct值得,結合標準曲線得到定量結果。

3.NASBA檢測病毒核酸。

NASBA全稱nucleic acid sequence-based amplification,即依賴核酸序列的擴增技術,是一種擴增RNA的新技術。該技術,具有操作簡單、特異性強、靈敏度高、不易被污染等優點,已廣泛應用于病毒、細菌、霉菌、寄生蟲和細胞因子等的檢測,并已成為診斷禽流感病毒的國家診斷標準方法之一。

(三)病毒分離。

病毒分離是確定流感感染的金標準,有雞胚和細胞培養兩種方法。雞胚一般采用9-11齡雞胚,可進行尿囊腔或羊膜腔接種,也可同時接種雙腔。細胞培養一般采用MDCK細胞(狗腎傳代細胞)。局限性在于病毒分離對儀器設備和技術的要求較嚴格,且耗費時間較長。

三、如何預防流感

(一)疫苗接種。

流感疫苗接種是世界公認的預防流感的有效方法,不過疫苗必須與當前流行株的型別基本相同。

(二)加強自身的防護意識。

自我保護在預防流感中是不可忽視的環節。首先患者是主要的傳染源,與流感病人或疑似病人盡量不要接觸,無法避免時注意戴口罩,并及時進行皮膚消毒。不接觸病禽和病畜。健康飲食,娛樂不要過度放縱,房間要經常通風換氣,保持清潔。平時不要忽視鍛煉身體,強健的體魄對各種疾病的抵抗力都會更強。流感流行季節要根據天氣變化增減衣物。盡量避免在人群聚集處久留,更不要帶兒童、老年人、身體衰弱者去擁擠不衛生的公共場所和有疑似流感患者存在的封閉環境中。通過醫療衛生機構的健康教育宣傳、查閱專業書籍、上網搜索等方式多了解一些流感病毒相關知識,以便在日常生活中更好地應對它。

(三)養成健康衛生的習慣。

在日常生活中應注意如下方面:一,避免室內過分擁擠閉塞,做好通風換氣。經常進行室內清潔,及時處理生活垃圾,盡可能讓生活環境空氣流通、清潔干凈。二,講究個人衛生。勤洗手,盡量使用科學的“七步洗手法”。咳嗽、打噴嚏的時候,及時用手帕或紙巾將口鼻處掩住。毛巾等洗浴用品用完及時清洗,經常晾曬,注意更換。三,在流感流行季節盡量少去或不去擁擠的公共場所,必要時可戴口罩出門,口罩也應勤換。

綜上所述,流感可怕也不太可怕,積極防控比治療更重要,與時俱進不斷發展的檢測技術和醫療水平也為我們應對流感提供堅實后盾。

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