冠心病患者脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2水平變化及臨床意義

袁麗萍，林衛(wèi)，盧新兆，黃曉華

福建醫(yī)科大學(xué)附屬龍巖第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建龍巖 364000

隨著經(jīng)濟(jì)水平的迅速發(fā)展，人們生活水平不斷提高，受不合理生活方式的影響，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（冠心病）的發(fā)病率及病死率均在逐年上升，據(jù)推算我國冠心病現(xiàn)患病人數(shù)為1 100萬[1]。冠心病通常是由多種危險(xiǎn)因素共同或相互作用下發(fā)病。傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素包括家族史、年齡、性別（尤其是男性及絕經(jīng)女性）、高血壓、高血糖、肥胖、高血脂等。非傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素包括血尿酸、同型半胱氨酸、膽紅素、脂蛋白a、高密度脂蛋白膽固醇酯、血小板平均體積、血漿纖維蛋白、尿微量白蛋白、幽門螺旋桿菌、非對稱性二甲基精氨酸、脂聯(lián)素、脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2） 等[2]。動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病的發(fā)病基礎(chǔ)，AS 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其中炎癥機(jī)制是相對新的一種學(xué)說，炎癥反應(yīng)貫穿AS發(fā)病的各個(gè)階段，可能是多種致AS因素致病機(jī)制的共同環(huán)節(jié)或通路。Lp-PLA2是新型血清炎性標(biāo)志物，其處于脂質(zhì)代謝和炎癥反應(yīng)的交叉點(diǎn)，被認(rèn)為在AS的發(fā)生和發(fā)展中扮演重要角色[3]。該研究方便收集2019年9—11月因擬診冠心病在該院住院并行冠狀動(dòng)脈造影（CAG）的173例患者資料進(jìn)行分析，旨在觀察冠心病患者血Lp-PLA2水平的變化，探討Lp-PLA2對冠心病的診斷價(jià)值，同時(shí)檢測血尿酸（UA）水平，比較不同冠脈病變患者之間Lp-PLA2、UA的差異。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取的173例患者根據(jù)CAG檢查結(jié)果，參考美國心臟協(xié)會冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，分為冠心病組和對照組。冠心病組患者主要冠狀動(dòng)脈至少有1支狹窄≥50%，對照組患者CAG檢查結(jié)果未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)。冠心病組121例，其中男80例、女41例；年齡 34～87歲，平均年齡（65.67±10.88）歲；其中單支病變51例。對照組52例，其中男34例、女18例；年齡44～82歲，平均年齡（62.54±11.59）歲。所有患者均在 CAG前測定 Lp-PLA2、UA等相關(guān)指標(biāo)。以上入選人員均知情該次研究且簽署知情同意書，并經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎功能不全者；明顯腦血管或周圍血管病變者；癌癥患者；血糖不易控制的糖尿病者；合并痛風(fēng)者；確診為風(fēng)濕性疾病患者；口服可導(dǎo)致高尿酸的藥物者。

1.2 標(biāo)本處理

分離血清后標(biāo)本保存于2～8℃冰箱中待測Lp-PLA2。采用脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2檢測試劑盒(免疫層析法)測定Lp-PLA2水平，試劑盒檢測靈敏度為5 ng/mL。按照試劑盒內(nèi)說明書操作步驟進(jìn)行操作。操作步驟：取出樣本恢復(fù)至室溫，混合均勻后使用；取出試劑卡，吸取血清5 μL，加入到稀釋液中，混勻后加稀釋液70 μL，樣本垂直滴加至加樣孔中；將卡殼加入卡槽中，置于免疫定盤分析儀內(nèi)，進(jìn)行孵育檢測；儀器自動(dòng)在5 min時(shí)讀取定量結(jié)果。檢測儀器為免疫定量分析儀ZYBio-Q7。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以（）表示，組間差異比較以t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)及百分比表示，組間差異比較以χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Lp-PLA2和UA水平

冠心病組Lp-PLA2水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），冠心病組UA水平高于對照組，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表 1。

表1 兩組患者的Lp-PLA2、UA水平比較()

表1 兩組患者的Lp-PLA2、UA水平比較()

組別Lp-PLA2（ng/mL） UA（μmol/L）冠心病組(n=121)對照組(n=52)t值 P值271.09±60.27 190.55±37.03 10.726＜0.001 393.26±98.37 376.02±66.90 1.338 0.183

2.2 Lp-PLA2、UA與不同冠脈病變的關(guān)系

不同冠脈病變的Lp-PLA2水平，雙支冠脈病變高于單支冠脈病變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），三支冠脈病變高于單支冠脈病變，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.001），三支冠脈病變與雙支冠脈病變之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。3組間UA水平兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表 2。

表2 冠心病組冠脈病變支數(shù)與Lp-PLA2、UA水平比較()

表2 冠心病組冠脈病變支數(shù)與Lp-PLA2、UA水平比較()

注：*表示與單支冠脈病變相比，P＜0.001

項(xiàng)目Lp-PLA2（ng/mL） UA（μmol/L）單支冠脈病變(n=51)雙支冠脈病變(n=38)三支冠脈病變(n=32)236.37±52.64（287.94±46.26）*（306.43±58.47）*388.59±112.71 394.95±79.19 398.69±97.01

2.3 冠心病患者Lp-PLA2水平和UA水平的ROC曲線分析

Lp-PLA2診斷冠心病的ROC曲線下面積為0.868（95%置信區(qū)間為 0.814~0.922，P＜0.001），以 252.27 ng/mL為最佳截?cái)嘀担舾行浴⑻禺愋苑謩e為0.702、0.942。UA水平的曲線下面積0.570，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見圖1。

圖1 冠心病患者Lp-PLA2、UA水平ROC曲線

3 討論

目前關(guān)于炎癥相關(guān)的生物標(biāo)志物，如C-反應(yīng)蛋白、纖維蛋白原、D-二聚體、CD40、髓過氧化物酶、生長分化因子-15、Lp-PLA2等，反映了冠心病的不同病理生理通路。Lp-PLA2是磷脂酶A2超家族成員之一，約70%的Lp-PLA2通過載脂蛋白B與LDL結(jié)合，隨LDL運(yùn)轉(zhuǎn)到血管壁上易損區(qū)域，LDL被氧化為氧化型LDL，Lp-PLA2將氧化型LDL水解為溶血卵磷脂和氧化型游離脂肪酸，后二者通過上調(diào)粘附分子的表達(dá)，激活白細(xì)胞并將巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞募集到AS斑塊中，而AS斑塊中的上述炎癥細(xì)胞隨后產(chǎn)生更多的Lp-PLA2，加快AS進(jìn)程。

通過檢測Lp-PLA2可反映粥樣斑塊的不穩(wěn)定性，進(jìn)而反映冠心病的嚴(yán)重程度[4]。Li等[5]對Lp-PLA2與冠心病相關(guān)性的Meta分析表明，Lp-PLA2的活性與冠心病風(fēng)險(xiǎn)有顯著關(guān)聯(lián)。該研究顯示，冠心病患者Lp-PLA2水平明顯超出對照組，雙支、三支冠脈病變Lp-PLA2水平高于單支病變。郭武輝等[6]根據(jù)多層螺旋CT血管造影檢查的主要冠狀動(dòng)脈狹窄程度分組，結(jié)果顯示中度狹窄組 （狹窄程度≤75%）、重度狹窄組 （狹窄程度＞75%）血清Lp-PLA2水平均高于輕度狹窄組 （狹窄程度＜50%）。但也有研究認(rèn)為Lp-PLA2與冠心病患者的病死率和心血管事件無顯著相關(guān)性[7]。LP-PLA2與動(dòng)脈斑塊穩(wěn)定性、冠狀動(dòng)脈狹窄程度和冠心病預(yù)后的相關(guān)性尚需大樣本、多中心和隨機(jī)試驗(yàn)來證實(shí)。該研究VA水平在冠心病3組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示UA水平不能用于反映冠以病的嚴(yán)重程度。

反映Lp-PLA2水平可通過測定血清或血漿Lp-PLA2質(zhì)量和活性兩種方式，常用方法有免疫層析法、膠體金法、酶聯(lián)免疫法、免疫熒光層析法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法、膠乳免疫比濁法等，測定活性可采用連續(xù)監(jiān)測法、速率法。近年多個(gè)研究稱Lp-PLA2活性檢測優(yōu)于質(zhì)量檢測[8]。宋冬林等[9]用ELISA法檢測Lp-PLA2，顯示采用174.12 ng/mL為最佳截?cái)嘀担\斷冠心病的敏感性、特異度分別為0.934、0.928。該組采用免疫層析法，以252.27 ng/mL為最佳截?cái)嘀担舾行浴⑻禺愋苑謩e為0.702、0.942。該組檢測方法需采用專用儀器，若能使用可用于自動(dòng)生化分析儀的試劑，則更有利于臨床推廣。

Lp-PLA2受生理變異很小，基本不受體位改變和日常活動(dòng)的影響，故標(biāo)本采集時(shí)無需固定體位和時(shí)間，無需空腹，但測定前2 h應(yīng)避免劇烈運(yùn)動(dòng)。當(dāng)前Lp-PLA2檢測方法較多，不同試劑Lp-PLA2水平的范圍跨度較大，各個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要確定自己的最佳截?cái)嘀怠p-PLA2水平受種族影響，研究發(fā)現(xiàn)[10]Lp-PLA2水平在維吾爾族中最高，漢族中最低。更需要注意的是Lp-PLA2水平受性別、年齡的影響。研究發(fā)現(xiàn)[11-12]男性健康成年人的血清Lp-PLA2活性高于女性，男性各年齡段間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而女性＞40歲組則高于＜40歲組[11]。但性別差異是由于性別本身（如性激素水平）所致，還是由于受到其他因素在男女兩性中分布特征不同的影響尚無定論。有研究顯示[13]在無激素替代治療的絕經(jīng)后女性高血壓患者，性激素結(jié)合球蛋白與Lp-PLA2呈負(fù)相關(guān)。

綜上所述，高水平的Lp-PLA2患者應(yīng)當(dāng)警惕冠心病的可能，Lp-PLA2水平可用于評價(jià)冠脈病變的嚴(yán)重程度。