HE染色兩次分化法對送檢病理樣本切片完整率及染色滿意度的影響

吳成奎

（安徽省天長市人民醫院病理科，安徽 滁州 239300）

隨著醫療技術水平不斷提升，臨床對疾病診斷要求隨之提高，病理診斷常作為疾病診斷“金標準”，與其他診斷方法比較更具有準確性[1]。HE染色檢查為病理學常見檢查項目，病理組織細胞能否成功染色、得當分化為染色過程中關鍵部分，隨著臨床病理檢查需求增加，傳統HE染色法已無法滿足。本研究選取我院不同科室送檢病理樣本164例，旨在探討HE染色兩次分化法的臨床應用效果。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院不同科室送檢病理樣本164例（2017年3月～2019年3月），依照染色方案不同分為研究組（n=82）、常規組（n=82），患者知情本研究并簽署同意書。常規組男4 8 例，女3 4 例，年齡26～75歲，平均年齡（51.49±10.41）歲。研究組男47例，女35例，年齡25～76歲，平均年齡（50.30±11.03）歲；本研究經我院倫理委員會審核通過。且兩組基線資料（性別、年齡）均衡可比（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 常規組：采用傳統HE染色法，取細胞涂片固定于95%乙醇內浸泡15 min，于顯微鏡下，選定免疫染色區域并標記，染色采用二甲苯去蠟處理方法，切片清洗干凈后，采用各濃度乙醇及蒸餾水樹膠洗脂，采用蘇木素染色液浸染3～5 min；采用0.5%稀鹽酸水溶液進行清潔，清水沖洗并浸泡15 min，采用樹膠或DPX蓋片封片。

1.3.2 研究組：采用HE染色兩次分化法，取厚約3～4 μm石蠟切片進行常規脫蠟、水洗；根據室內溫度采取不同染色處理，室溫＞30℃時采用蘇木素染色液浸染6～8 min；室溫＜30℃時采用裱片儀對蘇木素染色液水浴加熱至40℃，浸染4～6 min，后充分水洗；采用0.5%稀鹽酸水溶液進行分化（提洗）3次，后充分水洗；采用碳酸鋰飽和水溶液（藍化）10 s左右，后充分水洗；采用0.5%稀鹽酸水溶液分化（提洗）2次，后充分水洗；采用碳酸鋰飽和水溶液（藍化）10 s左右，后充分水洗；于水片鏡下鏡檢，觀察病理組織細胞核，出現藍色背景色時，采用0.5%稀鹽酸水溶液分化（提洗）、碳酸鋰飽和水溶液（藍化），直至未見藍色背景色；采用1%醇溶性伊紅浸染2 min左右；采用70%、80%、90%乙醇依次進行分化（提洗）3次，100%乙醇浸泡5 min；采用電吹風吹干，中性樹膠封固。

1.4 觀察指標

比較兩組病理樣本切片完整率、染色滿意度。

1.5 統計學分析

采用S P S S 2 2.0 對數據進行分析，計數資料n（%）表示，x2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

研究組病理樣本切片完整7 6 例、不完整6 例，染色滿意7 8 例、不滿意4 例；常規組病理樣本切片完整5 8 例、不完整2 4 例，染色滿意64例、不滿意18例。研究組病理樣本切片完整率92.68%（76/82）、染色滿意度95.12（78/82）高于常規組70.73%（58/82）、78.05%（64/82），差異有統計學意義

3 討 論

病理診斷為臨床常用診斷方式，診斷準確性受病理切片染色效果、醫師技能水平等多種因素影響，因此提高病理樣本切片質量，對提高臨床診斷準確性具有重要意義。相關研究指出，堿性染料蘇木素染色液中陽離子含量較高，易與細胞核結合，酸性染料醇溶性伊紅染液中陰離子含量較高，易與細胞質結合。本研究通過延長蘇木素染色時間，同時在室溫＜30℃時進行水浴加熱促染，病理組織切片經蘇木素染色后，其分化影響染色成敗，分化過程中采用酸性染料稀鹽酸水溶液，可阻止蘇木素中色素與鋁化合物產生藍色色素沉淀。此外水合氫離子及氫氧離子較其他染料離子彌散分化快，可促進切片組織中需染色部分恰當著色，同時對其他組織成分幾乎不著色。本研究結果顯示研究組病理樣本切片完整率、染色滿意度高于常規組（P＜0.05），提示HE染色兩次分化法可提高送檢病理樣本切片完整率及染色滿意度。

綜上所述，HE染色兩次分化法應用于送檢病理樣本中，可保證樣本切片染色質量，提高樣本切片完整率及染色滿意度，有助于提高病理診斷準確率。