張朝杰,尚會娜,2,孫廣信
(1.鄭州市第一人民醫院 呼吸內科,河南 鄭州 450000;2.遵義醫科大學,貴州 遵義 563000)
近年來有研究[1-2]表明,抗血管內皮細胞抗體(anti-endothelial cells antbodies,AECA)及血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)參與慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的發生及惡化,其作用機制尚不清楚,能否被常規免疫抑制劑(甲潑尼龍琥珀酸鈉,簡稱甲強龍)逆轉鮮少報道。本研究通過建立自身免疫性肺氣腫大鼠模型,觀察甲強龍對血清、支氣管肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中AECA、VEGF水平及肺泡隔細胞凋亡指數等的影響及各指標相關性,為肺氣腫的防治提供一定科學的依據。
1.1 實驗動物及材料大鼠AECA、VEGF試劑盒(武漢博士德生物工程公司);注射用甲強龍(美國輝瑞公司有限公司);550酶標儀(美國Bio-Rad公司);DL-低速大容量離心機(上海安亭科學儀器廠);BX41TF型光學顯微鏡(日本OLYBUS公司);完全弗氏佐劑(美國sigma公司);原位細胞凋亡末端轉移酶標記技術(TUNEL)檢測試劑盒(瑞士Roche公司)。健康清潔SD雄性大鼠30只[許可證號:SCXK(豫)2017-016,NO:0201754,鄭州大學醫學院實驗動物中心提供],鼠齡為10周左右,體質量為(180.0±30.0)g。本實驗上報鄭州市第一人民醫院醫學倫理委員會備案。
1.2 實驗方法
1.2.1自身免疫性肺氣腫大鼠模型組、干預組及對照組的建立 采用隨機數表法將30只SD大鼠分為對照組、模型組、干預組。參照文獻[3]的方法建立自身免疫性肺氣腫模型:取4~6代人臍靜脈內皮細胞1×107加入1 mL完全弗氏佐劑,制備成“油包水”乳狀液,注入模型組大鼠腹腔內。給予干預組大鼠上述等量的人臍靜脈內皮細胞和完全弗式佐劑懸浮液,同時給予甲強龍10 mg·kg-1·d-1[4]。……