復合芽孢桿菌制劑對蘇姜豬保育仔豬生長性能影響

張君勝，解慧梅，倪黎剛，朱淑彬，趙旭庭

(江蘇農牧科技職業學院，江蘇 泰州 225300)

【研究意義】保育仔豬受到斷奶綜合應激的影響容易發生多種疾病，生產中經常采用添加抗生素來控制保育仔豬疾病的發生，抗生素的使用會導致仔豬微生態區系被破壞，耐藥菌產生等一系列問題[1]。益生菌添加劑可以調節微生物菌群結構以及增強免疫耐受,改善動物健康及降低發生食源性污染的風險所以研制益生菌制劑來防治仔豬大腸桿菌性腹灣具有廣泛的發展前景[2]?！厩叭搜芯窟M展】芽孢桿菌，進入腸道內能迅速消耗游離氧，使腸腔內低氧，促進厭氧性有益菌生長，且能產生乳酸、芽孢桿菌菌素和短桿菌肽等活性物質，有效抑制致病菌增殖；芽孢桿菌還可合成淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶以及B族維生素等，促進宿主動物對飼料養分的消化[3]?！颈狙芯壳腥朦c】蘇姜豬是以姜曲海豬、杜洛克豬為親本培育而成的優質瘦肉型新品種豬，于2013年8月通過國家畜牧種質資源委員會審定，獲得了畜禽新品種證書[4]。隨著蘇姜豬產業化開發進程的加快，迫切需要開展蘇姜豬健康養殖配套技術的研究。泰州綠圣元生物科技有限公司生產的凝結芽孢桿菌(Bacilluscoagulans)制劑菌體活性好，芽孢形成率高[5]，但該菌劑在仔豬養殖中的效果需要進一步研究?！緮M解決的關鍵問題】本研究通過考察復合芽孢桿菌菌劑對保育仔豬的生長性能、腹瀉率、糞便中主要菌群以及主要血液免疫指標影響，對芽孢桿菌制劑在蘇姜豬仔豬健康養殖中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

復合芽孢桿菌菌劑是由泰州綠圣元有限公司的提供的統福菌復合飼用微生物制劑, 內含凝結芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌等，總活芽孢數為1.0×1010cpf/g。

1.2 試驗動物及分組處理

試驗動物：選擇同批斷奶(28日齡)的蘇姜豬斷奶仔豬90頭。隨機分成3組，每組3個重復，每個重復10頭，分別為空白對照組(正常飼喂不添加芽孢桿菌制劑)、0.1 %菌劑添加組和0.5 %菌劑添加組。預實驗7 d，正式試驗35 d，全期均采用嘉吉公司仔豬料在同一間豬舍飼喂。試驗期間由專人統一進行同一模式的飼養管理，并記錄每天的發病情況，及時針對治療。

1.3 日增重測定

正試驗開始和結束時，以頭為單位對試驗豬進行全群稱重。在試驗的第1和35天早晨空腹稱重，7:00-9:00依次分批稱重，稱重前先將豬哄起活動15 min，待其排出糞尿后稱重，第一批稱重各處理組的第一重復組，第二批稱重各處理組的第二重復組，依此類推，直至稱完。平均日增重( ADG)=(結束體重-開始體重)/飼養天數。

1.4 飼料轉化率測定

飼料消耗的測定，采用“清箱底法”每7 d以重復組為單位結料1次。若有死亡和淘汰，及時稱重和結算飼料，以便試驗結束時將死亡和淘汰豬只飼料消耗剔除。飼料轉化率即通常所說的料肉比( F /G)。它是指某一階段內，育肥豬每增重1 kg所消耗的飼料數量。

飼料轉化率=測定期間飼料消耗總量/(結束體重-開始體重)

1.5 腹瀉率測定

每天記錄各組腹瀉豬頭數，統計試驗期間各組腹瀉率。腹瀉率( %)=試驗期腹瀉總頭日數/試驗期飼養總頭日數×100 %。

1.6 糞便樣品采集與主要菌群測定

采樣前要將鑷子和5 mL試管洗凈后用高壓滅菌箱進行滅菌，同時準備好封口袋、酒精棉球、磁盤等，并帶好冰袋對樣品進行生物活性保存。在飼養試驗的第34天對每個重復隨機選擇2頭豬進行新鮮糞樣采樣，采樣后將樣品放入4 ℃冰箱中保存，并在1 d內完成試驗。分別采用EC肉湯瓊脂培養基、TPY瓊脂培養基、MRS瓊脂培養基測定大腸桿菌群、雙歧桿菌群、乳酸菌群數。

1.7 血液樣品采集與主要生化參數測定

試驗結束的當天每個重復隨機選擇2頭豬，前腔靜脈采血10 mL，使用邁瑞全自動生化分析檢測儀BS-220檢測血清中主要生化參數。使用廣州濟恒生物科技有限公司SH-1000 lab 酶標儀檢測血清中的免疫球蛋白G(IgG)的含量。

1.8 統計分析

使用spass軟件處理與分析試驗數據，末重、平均日增重、糞便菌群、血清學指標采用F檢驗鄧肯式法分析，腹瀉率采用卡方檢驗法分析。

2 結果與分析

2.1 復合芽孢桿菌制劑對生長性能和腹瀉率的影響

由表1可知，初始重3個組之間差異不顯著(P>0.05)，末重和平均日增重復合芽孢桿菌制劑添加組均極顯著增加(P<0.01)，但是在0.1 %和0.5 %的添加量中，兩組間差異不顯著(P>0.05)，腹瀉率復合芽孢桿菌制劑添加組極顯著低于對照組，表明復合芽孢桿菌制劑的添加有降低腹瀉發生的趨勢。

表1 復合芽孢桿菌制劑對仔豬生長性能和腹瀉率的影響

由表2可見復合芽孢桿菌制劑添加組仔豬的日采食量分別為579和605 g，均高于對照組525 g；復合芽孢桿菌制體添加組料重比分別為1.41和1.42，均低于對照組1.63。這說明復合芽孢桿菌制劑的添加可以增加仔豬的采食量，提高消化率，降低料重比。

表2 復合芽孢桿菌制劑對飼料轉化率影響

2.2 復合芽孢桿菌制劑對糞便影響

由表3可見，芽孢桿菌制劑的添加顯著的降低了糞便的pH值。對照組糞便中大腸菌群數含量極顯著高于兩試驗組(P<0.01)，對照組雙歧桿菌和大腸桿菌數均顯著低于試驗組(P<0.01)。結果表明芽孢桿菌制劑添加有效改善了仔豬腸道微生態體系。

表3 復合芽孢桿菌制劑對豬糞樣微生物的影響

2.3 復合芽孢桿菌制劑對血液生化指標影響

由表4可見，復合芽孢桿菌添加組的總蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G含量均較對照組顯著提高；谷丙轉氨酶活性、谷草轉氨酶活性顯著提高，尿素氮含量顯著降低；復合菌劑添加0.1 %組和0.5 %組差異不顯著；復合芽孢桿菌添加對總膽固醇和甘油三酯濃度影響差異不顯著。

表4 復合芽孢桿菌制劑對血液生化指標的影響

3 討 論

3.1 對斷奶仔豬促生長的影響

芽孢桿菌進入仔豬腸道后可以迅速繁殖產生大量的消化酶和營養物質供仔豬吸收利用，提高生產性能[6]。王曉丹等在斷奶仔豬飼料中添加枯草芽孢桿菌顯示有良好的促生長效果，可以顯著降低斷奶仔豬豬的腹瀉率，日增重[7]。本研究中添加的統福菌復合芽胞桿菌制劑中的芽胞桿菌以芽孢的方式進入豬體內，具有耐酸耐膽堿能力強，可以在仔豬腸道內能夠迅速萌發快速繁殖形成優勢菌群，其本身含有大量的營養物質，合成多種維生素等營養物質。研究結果表明統福菌可以有效地幫助仔豬消化飼料，提高飼料的消化率，增加仔豬日增重，具有促進生長作用。

3.2 對有害微生物的頡抗作用

仔豬斷奶階段受到應激，容易造成消化吸收功能紊亂、腹瀉，在養豬生產中普遍采用添加低劑量的抗生素來控制仔豬斷奶腹瀉，但從生態效益和長遠發展來看這種方法是不可取的。2017年6月22日，農業部印發了《全國遏制動物源細菌耐藥行動計劃(2017-2020年)》提出，推進獸用抗生素物減量化使用，實施“退出行動”，在2020年底以前，飼料端“禁抗”，養殖端減抗、降抗為必然。目前很多研究都在尋找預防仔豬腹瀉的方法，其中添加益生菌制劑是一條重要的解決思路。益生菌可以通過調整腸道菌群的平衡抑制有害微生物的生長，達到改善豬體健康的目的[8]。華洵璐等研究表明芽孢桿菌進入豬體內以后可以抑制腸道內大腸桿菌、沙門氏菌等病原菌生長，促進乳酸菌和雙歧桿菌等有益微生物生長，改善消化道菌群平衡, 有效預防仔豬腹瀉[9]。本研究結果也可以看到添加芽孢桿菌制劑后，大腸桿菌極顯著的降低，雙歧桿菌和乳酸菌等益生菌極顯著提高，說明統福菌具有很好的對有害微生物拮抗作用。

3.3 對血清免疫指標的影響

血清免疫指標反映了仔豬生長代謝的能力同時也反映了仔豬抗病能力。在飼料中添加益生菌，在豬腸道內迅速增殖，可以促進雙歧桿菌和乳酸菌的繁殖，從而達到維持腸道菌群平衡，有增強仔豬免疫功能的效果[10]。喬宏興等將黃芪和枯草芽孢桿菌結合飼喂保育仔豬顯著提高了保育仔豬體內總蛋白和免疫球蛋白的含量[11]。劉輝等研究發現添加益生菌可以顯著提高豬血液中免疫球蛋白總量和免疫球蛋白G的含量[12]。本研究結果中仔豬體內總蛋白、免疫球蛋白和免疫球蛋白G含量顯著提高說明本研究所采用的復合芽孢桿菌制劑具有良好的提高仔豬免疫力的效果。血液中谷丙轉氨酶活性和谷草轉氨酶活性和氨氮含量是反映豬體內氮代謝的主要指標[13]。本研究結果中符合芽孢桿菌添加組內谷丙轉氨酶活性和谷草轉氨酶活性均有顯著提高說明仔豬體內蛋白質合成代謝有所增加，仔豬生長代謝旺盛，復合菌劑在增強仔豬蛋白質合成代謝上有一定的促進作用。

3.4 復合菌劑添加量的影響

足夠數量的活菌數是益生菌發揮作用的關鍵，研究表明，如果一種細菌在盲腸內容物中的濃度低于107個/g，則該菌產生的酶及代謝產物不足以影響宿主,難以滿足治療需要[14]。本次試驗所采用的泰州綠圣元有限公司的提供的統福菌復合芽孢桿菌制劑活菌數達到1.0×1010cpf/g，活菌數充足。在本次試驗中添加0.5 %的菌劑效果與添加0.1 %菌劑對保育仔豬生長性能和腹瀉率的影響效果差異不顯著，可能是由于芽孢桿菌制劑中細菌以芽孢的方式存活，芽孢抗逆性強，耐儲存、耐酸、耐膽堿，能夠很好的穿過胃和十二指腸，芽孢活化后菌體具有極快的繁殖速度，足夠數量的芽孢桿菌進入腸道后迅速繁殖形成優勢菌群，達到了調整微生態平衡的效果。

4 結 論

在蘇姜豬斷奶仔豬飼料中添加0.1 %的復合芽孢桿菌制劑添加能夠極顯著的提高斷奶仔豬的日增重(P<0.01)、極顯著的降低腹瀉率(P<0.01)，提高仔豬采食量，改善仔豬腸道微生態平衡，提高機體免疫力(P<0.05)，促進了機體蛋白質合成代謝(P<0.05)。芽孢桿菌制劑作為微生態制劑具有宜運輸、耐儲藏的優點，是一種優質的益生菌添加劑。