江蘇部分地區水禽主要細菌性疾病監測與分析

張敬峰 董永毅 盧鳳英 吳坤 孫華偉 張小飛

摘要：2019年7月至2020年6月，從江蘇不同地區38個規模水禽（鴨、鵝）養殖場采集各類樣品共1 671份，分別進行了鴨疫里氏桿菌、巴氏桿菌、大腸桿菌等當前危害水禽生產的主要細菌性疾病病原的監測。結果表明，鴨疫里氏桿菌陽性率為36.01%，巴氏桿菌陽性率為24.43%，大腸桿菌陽性率為31.17%，沙門氏菌陽性率為12.82%，葡萄球菌陽性率為19.05%。根據監測結果結合江蘇省內水禽養殖現狀進行分析，為水禽細菌性疾病防控技術推廣實施提供依據。

關鍵詞：江蘇省;水禽;細菌性疾病;監測;鴨疫里氏桿菌;巴氏桿菌;大腸桿菌

中圖分類號：S852.61 ??文獻標志碼： A ?文章編號：1002-1302（2020）23-0172-03

當前，家禽細菌性疾病日趨復雜，嚴重危害養禽業的發展，給養殖戶帶來了巨大的經濟損失。由于近年來抗生素的濫用、不恰當的用藥方案及細菌間耐藥基因的轉導等因素，導致抗生素在臨床使用效果越來越差，通過藥物殘留等方式威脅人類健康，影響公共衛生安全[1]。江蘇省是水禽養殖大省，其中鴨、鵝的生產具有區域性養殖量大、飼養集中等特點，但也存在養殖環境條件差、管理落后、生物安全不到位等諸多因素，從而導致細菌性疾病感染相對普遍。鴨疫里氏桿菌、巴氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌等病原是當前危害水禽生產的主要細菌性疾病，幾種病原既可單一發病，又常混合感染，特別是與病毒性疾病混合感染后會給水禽生產造成極大的損失[2]。鑒于上述情況，本研究結合江蘇各地水禽養殖的現狀，對徐州、淮安、揚州、泰州、鎮江、無錫等地的部分規模鴨、鵝養殖場開展細菌性疾病的監測與分析，為開展水禽細菌性疾病綜合防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料樣品 2019年7月至 2020年6月，從江蘇不同地區38個規模水禽養殖場采集各類發病及表面健康鴨群、鵝群樣品共1 671份。

1.1.2 試劑 普通營養瓊脂平板、巧克力營養瓊脂平板由本實驗室自制;麥康凱培養基、DHL培養基等均購自杭州微生物試劑有限公司;PCR試劑盒、常用工具酶以及凝膠回收試劑盒等均購自 TaKaRa公司;各類檢測用引物為筆者所在實驗室自行設計， 均由南京金斯瑞生物科技公司合成。

1.2 方法

1.2.1 樣品的采集收集 針對江蘇省規模水禽養殖場的分布特點，按蘇南（鎮江、無錫）、蘇中（揚州、泰州）、蘇北（徐州、淮安）不同區域進行采樣，著重開展鴨傳染性漿膜炎、巴氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌等病原的流行病學監測及細菌分離鑒定。采取集中采樣（4—6月份和10—12月份各1次）和隨機采樣以及各地養殖場送檢樣品相結合，在此基礎上制定了詳細、科學的樣品采集方案，包括采樣信息登記表，詳細的記錄采集樣品家禽日齡、免疫程序、發病情況、藥物防控等詳細信息，準確了解所采集樣品的背景資料。

1.2.2 樣品檢測 在38個不同規模的養殖場進行了相關樣品的采集，樣品采集后嚴格按照冷鏈運輸的操作要求及時將樣品送至實驗室，采用常規方法進行PCR檢測以及細菌分離[3]。

2 結果與分析

2.1 各類細菌檢測結果

2019年7月至2020年6月共采集、檢測各類樣品1 671份，分別采用PCR方法檢測鴨疫里氏桿菌樣品1 097份、巴氏桿菌樣品262份、大腸桿菌樣品231份、沙門氏菌樣品39份、葡萄球菌樣品42份。結果檢出鴨疫里氏桿菌陽性樣品395份，陽性率為36.01%;巴氏桿菌陽性樣品64份，陽性率為24.43%;大腸桿菌陽性樣品72份，陽性率為31.17%;沙門氏菌陽性樣品5份，陽性率為12.82%;葡萄球菌陽性樣品8份，陽性率為19.05%。即鴨疫里氏桿菌的陽性率最高，其次是大腸桿菌（圖1）。

2.2 不同季節細菌檢測情況

不同細菌在各季度的陽性檢出率有著不同的變化趨勢（圖2） ，其中鴨疫里氏桿菌2019年7—9月與10—12月的陽性率之間差異顯著（57.14%，22.09%），提示鴨傳染性漿膜炎臨床感染率在夏秋季節較高，冬季感染率相對下降。

2.3 不同地區鴨疫里氏桿菌檢測結果

蘇北地區（徐州市、淮安市）鴨疫里氏桿菌檢測陽性率（38.64%）均高于蘇南（鎮江市、無錫市）地區（35.91%）、蘇中（揚州市、泰州市）地區（30.49%），蘇中地區檢測陽性率相對低于蘇北、蘇南地區（圖3）。

2.4 不同日齡水禽鴨疫里氏桿菌檢測結果

鴨疫里氏桿菌在20～30日齡鴨群中陽性檢出率高達44.5%，在20～30日齡鵝群中陽性檢出率也可達25.3%，該結果與在流行病學調查中多個水禽養殖場的鴨傳染性漿膜炎臨床發病時間等情況基本一致，提示養殖場在鴨、鵝20日齡前做好藥物防控以及疫苗免疫的重要性;不同日齡鴨、鵝的鴨疫里氏桿菌檢測陽性率存在一定差異。其中，鴨場20～30日齡間陽性率最高，1～10日齡間陽性率最低;鵝場50日齡以上陽性率最低，20～30日齡與>30～50日齡間陽性率無明顯差異（圖4）。

2.5 細菌的分離鑒定

對檢測陽性病原樣品經篩選后共分離到相關菌株90株，其中鴨疫里氏桿菌36株、巴氏桿菌26珠、大腸桿菌22株、沙門氏菌6株。分別將上述菌株進行了進一步鑒定和保藏，為后續相關研究提供資源保障。

3 討論與結論

鴨傳染性漿膜炎的病原為鴨疫里氏桿菌，在幾種水禽細菌性病原中，鴨疫里氏桿菌的陽性檢出率最高，說明該病的流行發生較為普遍。同時，在多個表面健康的鴨、鵝體內以及水體環境中檢測出鴨疫里氏桿菌陽性，說明該病原可能是水禽養殖環境中的一種常在菌，與大腸桿菌等細菌一樣是條件性致病菌。在送檢的多個臨床表現為產蛋下降的蛋（種）鴨病料中分離檢測出鴨疫里氏桿菌，說明該細菌可能是引起產蛋下降的原因之一或作為協同感染病原，提示成年產蛋鴨也應及時做好鴨傳染性漿膜炎防控工作。大腸桿菌、鴨疫里氏桿菌、巴氏桿菌感染水禽的臨床表現和病理解剖方面較為相似，均可產生纖維素性心包炎、肝周炎或氣囊炎等病變，肉眼不易區分，確診應通過細菌培養以及PCR檢測等手段[4]。

江蘇省地處長江中下游，省內水資源豐富，給水禽養殖提供了較好的自然環境。但由于近年來環保要求的不斷提高，水禽養殖的空間受到不斷壓縮，傳統的分散飼養方式也逐步向集約化飼養方式轉變，養殖場的布局密度、飼養密度都大幅度增加，不利于水禽疫病的整體防控。加之養殖設施落后，環境差、飼養方式落后的現象多有存在，各類細菌性、病毒性疾病時有發生、流行，亟待健全的疫病防控體系推動水禽健康養殖的發展。

雖然水禽細菌性疾病的病原種類較多，但整體防控思路基本相同。養殖場首先要做好生物安全防控，包括環境消毒與控制、科學生產管理等[5]。在藥物防控方面不僅要考慮各類藥物的作用機制及抑菌方式，合理搭配，以減少副作用和耐藥性，還需考慮到藥物在家禽機體內的代謝周期，避免藥物殘留，保障食品安全。 鴨傳染性漿膜炎、大腸桿菌病等疾病的疫苗免疫應考慮地區流行菌種的血清型、免疫時機、綜合免疫程序等方面因素[6]。

通過對江蘇省內主要水禽生產區的細菌性病原監測，摸清了當前規模鴨、鵝養殖場以鴨傳染漿膜炎病原為主的水禽多發細菌性疾病的感染及帶菌情況。本研究下一步將從主要細菌病原的血清型鑒定、耐藥性分析、細菌的遺傳變異分析、臨床防控實施等方面開展工作，為制定合理的綜合防控措施并在省內開展水禽細菌性疾病防控技術推廣實施提供依據。

參考文獻：

[1]李志中，韓珊珊，高永偉，等. 細菌性疾病區域普查在肉鴨生產過程中的應用[J]. 中國家禽，39（10）：60-62.

[2]孫敏華. 廣東省水禽主要傳染病的流行現狀及防控思考[J]. 廣東畜牧獸醫科技，2019，44（1）：8-12.

[3]楊 苗，程安春，王銘書，等. 基于鴨疫里默氏桿菌16S rRN APCR檢測方法的建立和應用[J]. 四川農業大學學報，2007，25（3）：343-347.

[4]呂紅超，程小果，陳申秒. 鴨傳染性漿膜炎流行特點及防控策略[J]. 動物醫學進展，2018，39（10）：115-117.

[5]朱善元. 水禽疫病綜合防控與健康養殖措施[J]. 中國禽業導刊，2018，35（18）：6-7.

[6]孟 超，李寶臣，葉曼曼，等. 鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗的效果評價研究[J]. 浙江畜牧獸醫，2014（6）：6-8.劉惠芬，王安皆，劉文光，等. 甲磺酸培氟沙星對家蠶細菌病的防治效果[J]. 江蘇農業科學，2020，48（23）：175-177.