血清淀粉樣蛋白A 的檢測方法及臨床應用進展

梁知銳，楊開洪，徐耀祥

陽江市中醫醫院 （廣東陽江 529500）

血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）是一種正向急性時相反應蛋白，是載脂蛋白家族中的一種異質類蛋白質，相對分子量約為12 000。作為急性時相反應蛋白，SAA 的作用與C 反應蛋白相似，是感染性疾病的一種靈敏度指標，其臨床意義是輔助診斷感染性疾病的類型，通過檢測其含量可以評估炎癥的發生及發病過程，有助于臨床醫師觀察治療效果。SAA 在炎癥防御、免疫應答和脂質代謝等方面發揮重要作用，可用于許多疾病的輔助診斷、治療效果觀察和預后評價[1]。本研究對SAA 的基因結構、生物學功能、檢測方法及臨床應用作簡要綜述。

1 SAA 基本介紹

1.1 SAA 的結構與合成

人類編碼SAA的基因位于常染色體11p15.1，長度大概為150 kb，包含 4種不同的編碼基因，分別為SAA1、SAA2、SAA3、SAA4；除SAA3由 3個外顯子和 2個內含子組成，其他基因都含有4個外顯子和 3個內含子組成。這些編碼基因編碼的蛋白，構成SAA家族，包括不同表達形式的載脂蛋白、急性期SAA（A-SAA）和結構型SAA（C-SAA）。其中SAA1和SAA2編碼A-SAA；SAA4編碼C-SAA；SAA3是假基因，不參與SAA合成[2]。發生炎癥反應時，在糖皮質激素調控下，肝臟中巨噬細胞和纖維母細胞釋放的白細胞介素-1（interleukin-1，IL-1）和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）使IL-6分泌增加，刺激肝細胞產生A-SAA[3]。

1.2 SAA 的生物學功能

SAA 具有以下生物學功能。（1）SAA 可作為中性粒細胞、淋巴細胞、肥大細胞和單核細胞等免疫細胞的趨化因子[4]。（2）SAA 能調節多種細胞因子的表達，包括單核細胞趨化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1，MCP-1）、TNF-α、IL-6及IL-8等。（3）SAA 屬于載脂蛋白家族，擁有載脂蛋白家族的生物特性，即可參與脂類的代謝并增強脂質與巨噬細胞的親和力[5]。（4）在組織發生損傷時，SAA通過誘導細胞外基質降解酶的表達，在損傷的組織修復過程中起到重要作用[6]。（5）當濃度超過10～60 mg/L 時，SAA 可刺激內皮細胞增殖、黏附、侵襲和刺激毛細管樣結構的形成，促進體內新血管的形成。因此，SAA 被認為是血管生成蛋白[7]。

2 SAA 檢測方法

SAA 的常見檢測方法包括膠體金法、酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、膠乳增強免疫比濁法。其中膠乳增強免疫比濁法最先進，靈敏度更高，線性范圍更廣，操作也相對簡便，在臨床中被廣泛采用。研究表明，膠乳增強免疫比濁法的分析靈敏度為3.52 mg/L；批內變異系數＜8%、日間＜10%；抗干擾性較強，血紅蛋白≤4.0 g/L、膽紅素≤400 μmol/L、類風濕因子≤1 621 U/L、甘油三酯≤10 mmol/L 對測定無影響[8]。膠乳增強免疫比濁法利用吸附在直徑幾十到幾百納米的膠乳微粒上的SAA 抗體捕捉測試樣品中的SAA，從而形成微粒之間的交聯，改變了溶液的散射度或者透射吸光度（即濁度）。通過測量溶液的散射度或者透射吸光度的變化，可以根據定標曲線定量地計算出測試樣品中血清淀粉樣蛋白A 的濃度。該測試方法既可以在通用的大型自動生化分析儀上運用，也可以在特定蛋白分析儀等小型的即時檢測（point-of-care testing，POCT）設備上采用，有很強的適用性，可以很好地滿足我國從大型三甲醫院到社區基層醫院的使用需求。

3 SAA 在臨床中的應用

3.1 SAA 在感染性疾病中的應用

在臨床上，鑒別診斷患者是細菌性或病毒性感染主要通過C 反應蛋白、白細胞計數和白細胞的分類聯合檢測[9]。作為炎癥及進展性疾病輔助診斷最為傳統的指標之一，白細胞計數是臨床醫師初步診斷是否為感染性疾病的指標之一，但其特異性不強。相關文獻顯示，發熱患者白細胞計數陽性率僅為34.3%， 65.7%的白細胞計數為陰性，無法診斷是否存在感染[10]。C 反應蛋白作為細菌性感染的靈敏度指標，靈敏性高，半衰期短，在人體發生炎癥后6～8h明顯升高，其升高幅度與感染程度有關。當患者病情好轉時，C 反應蛋白迅速恢復正常。因此，C 反應蛋白可反映炎癥感染情況，但當發生病毒感染時，病毒在細胞內進行復制，細胞膜受體破壞，細胞膜的成分發生改變，暴露磷脂蛋白質，無法觸發組織產生C 反應蛋白[11]。當人體感染細菌、病毒、支原體、衣原體后，肝臟分泌大量的SAA 進入血液，5～6 h 后SAA 水平可升高1 000倍[12]，且SAA 半衰期短（約50 min），因此，SAA 可作為感染性疾病診斷指標。SAA 靈敏度高于C 反應蛋白，在病毒感染早期迅速升高，而在細菌感染中，SAA 相比其他正向急性時相反應蛋白最先升高。因此，SAA 診斷感染疾病活動期的靈敏性優于C 反應蛋白，能夠為臨床提供更好的參考價值[13]。在臨床實際應用中，SAA、C 反應蛋白、白細胞計數及白細胞分類 4項指標聯合檢測可提高對感染患者病因的診斷準確性，減少誤診率，正確指導臨床醫師用藥，同時可觀察病情的動態變化。

3.2 SAA 在冠心病中的應用

冠心病（coronary atherosclerotic heart disease，CHD）是由于冠狀動脈發生硬化導致管腔狹窄，引起心肌壞死，血管內皮細胞接觸損傷細胞，人體的炎癥細胞浸潤，引起局部或者全身的炎癥反應。CHD 屬于一種慢性炎癥性疾病，其炎癥反應程度與粥樣板塊的硬化密切相關[14]。SAA 作為急性時相反應蛋白，與評估CHD 嚴重程度的Gensini 評分系統成正相關，SAA 水平與CHD 患者冠狀動脈病變程度成正比關系，因此，SAA 可作為CHD 發生及預后情況的預測指標[15]。相關研究發現，在動脈粥樣硬化斑塊中均有 SAA 的沉積和SAA mRNA 的表達，可促進血栓形成引起心梗[16]。此外，Zewinger 等[17]在小鼠身上研究發現SAA 與 高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C） 存在關聯，SAA 可以取代載脂蛋白A1與HDL 結合，導致HDL 不能有效地進行膽固醇的逆轉運，影響脂質的代謝，增加了膽固醇的內流和沉積，膽固醇濃度增高導致發生CHD 等心血管疾病的危險性增高。因此，SAA 檢測對于CHD 發生、病情發展及療效觀察具有重要的作用。

3.3 SAA 在腫瘤中的應用

SAA 與腫瘤具有一定的關聯性，但目前尚不明確腫瘤患者血清中SAA 水平升高是由腫瘤相關性炎癥引起，還是副腫瘤綜合征的結果，但是 SAA 水平是多種腫瘤非常敏感的血清標志物[18]。SAA 水平與腫瘤的浸潤程度、轉移及復發等具有一定相關性[19]。在消化系統腫瘤、呼吸道系統腫瘤、泌尿生殖系統腫瘤等多種腫瘤患者中發現，SAA 水平均有升高，但升高幅度各不相同， 如胃腺癌患者的SAA 水平是健康人群的3.7倍[20]。SAA 水平與腫瘤大小、是否轉移及惡性程度有明顯的相關性，因此，SAA 水平可以反映腫瘤患者的療效監測及預后情況。這說明SAA 可以作為一種監測腫瘤疾病進程以及輔助診斷腫瘤種類的一種腫瘤標志物。

3.4 SAA 在類風濕關節炎中的應用

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是以侵蝕性、對稱性的多關節炎為主要臨床癥狀的慢性自身免疫性疾病。相關研究表明[21]，RA 患者血清中SAA 水平升高，而使用改善患者病情的藥物后，SAA 水平下降，這說明SAA 參與RA 的炎癥反應過程； SAA 水平與RA 的活動性密切相關，可作為估計RA 疾病嚴重程度的一個很好的血清學指標[22]。SAA與C反應蛋白和紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）相比，SAA 對于判斷RA 的活動性和預后情況更敏感。

3.5 其他疾病

SAA 對于移植排斥反應、2型糖尿病、慢性呼吸系統疾病等疾病有一定的輔助診斷作用。

綜上所述，SAA 作為一種急性時相反應蛋白，近年來在臨床中得到廣泛的應用，但SAA 的生物學功能及相關疾病的作用機制尚不完全明確，需要進一步深入研究。