動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測方法

王邦國

（靖遠縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測管理站 730699）

1 分析方法

1.1 處理樣品的方法 液相萃取法是樣品處理方法中最經(jīng)典的。 由于磺胺類藥物在非極性有機溶劑中不易溶解，而在極性有機溶劑中易溶解，通常工作人員采用CH2Cl2、C3H6O、甲基氰以及醋酸乙酯等作為萃取液。 由于某些有機溶劑能夠讓樣品蛋白喪失活性，因此，大力發(fā)展固相萃取法勢在必行，有利于更快速、順利地萃取與蛋白結(jié)合的磺胺類藥物殘留。 固相萃取法優(yōu)勢很多，比如可操作性強、裝置簡單、適用范圍較為廣泛等。 其中陽離子交換樹脂以及C18 等是最常見固相萃取裝置。

基質(zhì)固體分散技術(shù)和超過濾方法是近年來比較流行的萃取方法。 超過濾法能夠有效解決共萃取干擾、乳膠產(chǎn)生等很多液相萃取技術(shù)問題，同時簡化檢測步驟，提升檢測結(jié)果的準確性，減少分析費用。MSPD 的制備工藝為：將樣品與C18 柱填料混合，裝柱，之后利用正己烷清洗柱子，及時去掉脂質(zhì)化合物，最后利用二氯甲烷清理掉被吸附的組分，保留高極性雜質(zhì)。 相對于傳統(tǒng)樣品處理方法，MSPD 具有如下優(yōu)勢：樣品處理方法效率較高，而且操作簡單；有效抑制和消除了乳化作用；溶劑消耗較少。 此外，超臨界流體萃取（SFE）也可用于從樣品中提取磺胺類藥物。

1.2 樣品凈化方法 在進行色譜分析之前，需要凈化和濃縮樣品， 以防止樣品基質(zhì)中的復(fù)雜成分嚴重破壞色譜儀器和干擾目標分析物。 其中薄層色譜、柱色譜以及固相萃取等都是常見方法。 絕大多數(shù)凈化方法和樣品基質(zhì)以及萃取過程都與萃取劑使用關(guān)聯(lián)不大。 其最終目的是去除干擾， 選擇性地提取磺胺類藥物。 磺胺類藥物一般以離子化合物的形式存在。 因此，將水相的pH 值調(diào)節(jié)到最佳范圍以獲得較高的回收率是磺胺類藥物凈化工藝的關(guān)鍵所在。

1.3 檢測技術(shù) 現(xiàn)階段，熒光檢測、質(zhì)譜以及紫外-可見檢測是磺胺類藥物的常用的檢測技術(shù)， 能夠適用于各種磺胺類藥物的檢測，尤其是對含有各種磺胺類藥物的樣品的分析，但其選擇性不高。 紫外-可見檢測和GC/MS 需要在柱前或柱后進行衍生反應(yīng)。 而質(zhì)譜是不需要衍生的，因此得到了廣泛的應(yīng)用。

2 常見的磺胺類藥物殘留檢測方法

2.1 微生物法 現(xiàn)階段，理化分析、免疫分析以及微生物學(xué)法是磺胺類藥物殘留檢測的常見方法。 微生物法是一種適用范圍非常廣泛的方法。 主要利用SAS 有效抑制特異微生物生理功能和代謝， 從而定性或定量測定樣品中SAS 的殘留量。 由此可見，此方法可操作性非常強、成本費用較低，但也存在一定不足，比如靈敏度低、敏感性差以及容易受其他抗生素干擾。 因此，很難定性定量地測定，從而無法達到測定標準要求。

2.2 免疫分析法 早在20 世紀80 年代，SAS 殘留免疫分析就已經(jīng)誕生，是一種基于靶點和抗體結(jié)合的檢測方法。 其中放射免疫分析、熒光免疫分析以及酶聯(lián)免疫分析都屬于免疫分析法。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）是當(dāng)前應(yīng)用最廣泛的藥物殘留檢測方法，不僅分析樣本量大，而且靈敏度高，可操作性強等諸多優(yōu)勢。 王喜良等人利用金免疫層析法檢測雞肉內(nèi)磺胺嘧啶的殘留。半定量檢測需要在15min 內(nèi)完成， 檢測限為5ng/mL， 并且還發(fā)現(xiàn)，此檢測藥劑并沒有與其他磺胺類藥物發(fā)生交叉反應(yīng)，且回收率高達71%～95%，但是也存在一定短板，對于多種藥物殘留檢測能力不足，抗體制備較難等，適用范圍相對狹窄。

2.3 快速檢測法 隨著國內(nèi)市場和進出口貿(mào)易對食品安全的日益重視，動物性食品中藥物殘留超標的現(xiàn)象也時有發(fā)生。 由于傳統(tǒng)實驗室使用藥物殘留檢測技術(shù)時，往往對技術(shù)人員、實驗室環(huán)境以及硬件設(shè)置要求較高，而且測試時間相對交纏，導(dǎo)致傳統(tǒng)的實驗室儀器分析測試技術(shù)已經(jīng)無法適用大規(guī)模現(xiàn)場測試需求，無法在一般企業(yè)和基層食品安全檢測部門得到應(yīng)用。 而現(xiàn)場快速檢測技術(shù)以其檢測靈敏度高、效率高、技術(shù)要求低等諸多優(yōu)勢，備受基層工作人員喜愛。 由此可見，磺胺類藥物檢測已成為時下最為的研究課題，因其操作簡單、成本造價低廉、準確度高而聞名。 膠體金免疫層析法是一種可廣泛應(yīng)用于即時檢測領(lǐng)域的分析方法。

膠體金免疫層析法（GICC）是一種結(jié)合金標記技術(shù)、檢測技術(shù)和免疫層析法的新型固相標記技術(shù)。 膠體金顆粒擁有兩個非常突出的特性：一是吸附性極強，特別是對免疫球蛋白、酶、血清蛋白等蛋白質(zhì)分子吸附性極強。 膠體金顆粒能夠吸附膠體金標記過的蛋白質(zhì)；二是金標蛋白結(jié)合位點的顯色反應(yīng)，適用于定性和快速檢測。

膠體金免疫層析法以膠體金顆粒為抗體標記， 與特定的反應(yīng)膜位置反應(yīng)，出現(xiàn)生紫紅色。 并能直接觀察到相應(yīng)結(jié)果。 基層檢測部門和食品企業(yè)檢測時，可以使用膠體金免疫層析法。 根據(jù)膠體金技術(shù)，研制了多種磺胺類快速試紙。 與傳統(tǒng)的實驗室檢測方法相比，可以快速檢測肉、奶、蜂蜜、動物體液等不同食品基質(zhì)中磺胺類藥物殘留，膠體金免疫層析法具有成本造價低、靈敏度高、工藝簡單、成本低等諸多優(yōu)勢，而且將其制作成試紙后，不僅方便保存和攜帶，而且操作簡單易行，在磺胺類藥物殘留的快速檢測方面前景一片光明，具有明顯優(yōu)勢。

公共衛(wèi)生和衛(wèi)生機構(gòu)最主要的任務(wù)是檢測動物性食品中磺胺類藥物殘留情況，要求使用的分析方法必須做到造價成本低、準確度高，使用方便、省時，同時檢測限要低于MRLs。 在人類不斷努力探索下，相信不久，必然就專研出分析效率高，適用多種磺胺類藥物殘留檢測的分析方法，從而更好地保護人類健康。