貴州青腳麻雞傳染性支氣管炎的診斷

陳永惠，劉 淵，陳秀娟

（1.貴州省六枝特區(qū)動(dòng)物科技服務(wù)中心 553400；2.貴州省水城縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 553600）

青腳麻雞是生活在中國(guó)西南片區(qū)的肉用地方品種雞之一，主要特征為青腳、麻羽，體型特征可概括為“一楔”、“二細(xì)”、“三麻身”。 “一楔”指母雞體型象楔形，前軀緊湊，后軀圓大。 “二細(xì)”指頭細(xì)、腳細(xì)。 “三麻身”指母雞背羽面主要有麻黃、麻棕、麻褐三種顏色。 公雞頸部長(zhǎng)短適中，頭頸、背部的羽金黃色，胸羽、腹羽、尾羽及主翼羽黑色，肩羽、蓑羽棗紅色。 母雞頸長(zhǎng)短適中，頭部和頸前1/3 的羽毛呈深黃色。 背部羽毛分黃、棕、褐三色，有黑色斑點(diǎn)，形成麻黃、麻棕、麻褐三種。 單冠直立。 脛趾短細(xì)、呈黃色。 成年體重公雞為2180g，母雞為1750g。 青腳麻雞肉質(zhì)細(xì)嫩、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，具有山區(qū)“土雞”的特色，它適應(yīng)性強(qiáng)、生長(zhǎng)快、成本低。 在西南片區(qū)，如四川綿陽(yáng)、貴州貴陽(yáng)及六盤(pán)水等地農(nóng)村地區(qū)養(yǎng)殖較多， 在部分地區(qū)進(jìn)行遺傳基因純化后作為地方品種得以保種和擴(kuò)大生產(chǎn)，是當(dāng)?shù)厝藗冏顬橄彩车娜馐臣仪荩瑢?duì)地方經(jīng)濟(jì)的發(fā)展起到不可估量的作用。 但正因?yàn)槠渲鸩揭?guī)模化和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，使很多疾病也接憧而至，對(duì)其地方適應(yīng)性造成了挑戰(zhàn)，特別是易發(fā)傳染性支氣管炎，該病由傳染性支氣管炎病毒引起，本病據(jù)其臨床癥狀分為呼吸道型、腎臟型、生殖型和腺胃型四種，具有極強(qiáng)的傳染性，在養(yǎng)雞生產(chǎn)中極為常見(jiàn)，能夠在短時(shí)間內(nèi)引起快速傳播，并造成雞的生長(zhǎng)發(fā)育不良及大批死亡，危害巨大。

本文就貴州省六枝特區(qū)動(dòng)物科技服務(wù)中心接到的創(chuàng)興養(yǎng)殖場(chǎng)送來(lái)的8 只青腳麻雞病例（其中2 只死亡）進(jìn)行了系列診斷和分析，現(xiàn)將檢查及診斷進(jìn)行報(bào)道，為養(yǎng)雞生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 被檢動(dòng)物與檢測(cè)試劑 被檢動(dòng)物為貴州省六枝縣創(chuàng)興養(yǎng)殖場(chǎng)于2020 年7 月3 日送來(lái)的8 只青腳麻雞病例（其中2 只死亡）。 檢測(cè)試劑：RNA 提取試劑盒購(gòu)自北京世紀(jì)元亨有限公司；cDNA 的合成試劑盒為北京康為世紀(jì)生產(chǎn)的HiFi-Script cDNA第一鏈合成試劑盒。

1.2 流行情況 創(chuàng)興養(yǎng)殖場(chǎng)8000 只33 日齡的青腳麻雞，免疫過(guò)馬立克、法氏囊疫苗以及雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗。2020 年7 月3 日送檢病雞時(shí)已發(fā)病12d 左右，發(fā)病一周后開(kāi)始死亡，第1d 死亡100 多，第2d 死亡300，第3d 死亡400 只，每天死亡幾百只，至送檢日共死亡1000 多只。

1.3 病雞臨床特征 病雞出現(xiàn)呼吸困難、張口呼吸，消瘦，無(wú)食欲，站立不穩(wěn)，搖頭轉(zhuǎn)圈，拉水樣糞便等臨床癥狀。

1.4 病雞剖檢主要病變 對(duì)發(fā)病雞進(jìn)行剖檢， 主要解剖病變有：肺部與法氏囊內(nèi)有黃色干酪樣物質(zhì)，氣管出血，心包積液，法氏囊、腎臟、腺胃腫大。

1.5 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1.5.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定

取送檢雞的肝臟、心臟、脾臟、腎等組織進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)16h。

1.5.2 病原核酸檢測(cè)

1.5.2.1 樣品處理

解剖病雞，無(wú)菌采集病死雞心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、法氏囊及氣管等組織用無(wú)菌手術(shù)剪剪碎，于研磨器中研磨、勻漿，制備待檢樣本。

1.5.2.2 病毒核酸提取

按照北京世紀(jì)元亨有限公司生產(chǎn)的RNA 快速抽提試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行總RNA 的提取。

1.5.2.3 cDNA 的合成

用北京康為世紀(jì)生產(chǎn)的HiFi-Script cDNA 第一鏈合成試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果

細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果顯示無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

2.2 病毒核酸PCR 檢測(cè)

2.2.1 新城疫病毒PCR 檢測(cè)

使用新城疫病毒通用型引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行PCR 檢測(cè)，結(jié)果為陰性。

2.2.2 雞傳染性喉氣管炎病毒PCR 檢測(cè)

使用雞傳染性喉氣管炎病毒特異性引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行PCR 檢測(cè)，結(jié)果為陰性。

2.2.3 傳染性支氣管炎病毒PCR 檢測(cè)

使用傳染性支氣管炎病毒特異性引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行PCR 檢測(cè)，結(jié)果可以擴(kuò)增出特異性條帶，為陽(yáng)性。

2.2.4 傳染性法氏囊病毒PCR 檢測(cè)

使用傳染性法氏囊病毒特異性引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果為陰性。

2.2.5 雞毒支原體PCR 檢測(cè)

使用雞毒支原體特異性引物對(duì)核酸樣本進(jìn)行PCR 檢測(cè)，結(jié)果為陰性。

3 結(jié)論與討論

對(duì)送檢雞進(jìn)行細(xì)菌分離，結(jié)果為陰性；對(duì)送檢雞進(jìn)行雞傳染性喉氣管炎、新城疫、雞毒支原體、傳染性法氏囊病病原核酸檢測(cè)，結(jié)果均為陰性；而進(jìn)行雞傳染性支氣管炎病毒病原核酸為陽(yáng)性。 結(jié)合發(fā)病雞的流行特點(diǎn)、臨床癥狀、剖檢病變、細(xì)菌培養(yǎng)和病毒核酸檢測(cè)結(jié)果綜合分析判斷， 該雞場(chǎng)發(fā)生的傳染病為雞傳染性支氣管炎。

雞傳染性支氣管炎1930 年最早發(fā)現(xiàn)于美國(guó)，1972 年我國(guó)首次報(bào)道，如今廣泛流行于世界各地。 本病由傳染性支氣管炎病毒引起的急性、高度接觸性呼吸道傳染病，其中主要血清型是腎型。 潛伏期36h 或者更長(zhǎng)，臨床表現(xiàn)流鼻涕、因呼吸困難而張口呼吸、咳嗽、噴嚏、甩頭、食欲下降或廢絕、腹瀉、糞便呈黃白色；病雞主要病變?yōu)闅夤堋⒅夤芑蚝眍^有漿液性或干酪樣滲出物。死亡率不高， 主要影響產(chǎn)蛋量和蛋品質(zhì)。 除了雞能夠感染發(fā)病外，其他家禽都不會(huì)感染，且各個(gè)年齡的雞都能夠發(fā)生，其中雛雞較為嚴(yán)重，通常是40 日齡以下的雞更易發(fā)病，發(fā)病率可高達(dá)95%，死亡率一般為5%，但隨毒株變異，毒性增強(qiáng)會(huì)致死亡率增加。 在肉雞飼養(yǎng)過(guò)程中，每年都有發(fā)生該病，由于該病傳播快，死亡率相對(duì)較高，往往會(huì)嚴(yán)重?fù)p害養(yǎng)雞戶的經(jīng)濟(jì)效益。 近幾年，該病的發(fā)病率呈明顯升高的趨勢(shì)，給養(yǎng)雞生產(chǎn)造成嚴(yán)重影響。 一般認(rèn)為，對(duì)該病除采取常規(guī)藥物進(jìn)行預(yù)防外，免疫接種是主要和有效的辦法。