蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉對小鼠免疫功能的作用

趙海燕

摘 要：目的 探討蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉對小鼠免疫功能的作用。方法 KM雄性小鼠176只，隨機平均分為對照組、低劑量組（110mg/kg.bw）、中劑量組（220mg/kg.bw）和高劑量組（440mg/kg.bw），連續灌胃30d后，進行碳粒廓清實驗、二硝基氟苯誘導小鼠遲發性變態反應和血清溶血素測定。結果 與對照組比較，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉中、高劑量組（220mg/kg.bw、440mg/kg.bw）能顯著增加小鼠碳廓清指數K及吞噬指數α;在遲發型變態反應實驗中，中、高劑量組（220mg/kg.bw、440mg/kg.bw）能顯著增加小鼠耳腫脹度，差異均具有統計學意義（P<0.05，P<0.01）;但各劑量組對小鼠抗體積數均無顯著性差異。結論 蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉具有良好的免疫調節作用，可增強小鼠的免疫功能。

關鍵詞：蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉 小鼠 免疫功能

中圖分類號：R-33文獻標識碼：A文章編號：1003-9082（2020）02-0-01

冬蟲夏草屬于傳統的滋補中藥材，價格昂貴，且野生資源枯竭，逐漸被人工蟲草菌粉所替代[1]。在1980年時，研究者在天然冬蟲夏草中分離出多個菌種，包括蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉等，大量臨床實踐表明，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉可有效提高免疫功能。本實驗觀察了蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉對小鼠免疫功能的作用。

一、實驗材料與方法

1.受試樣品

蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉（批號：20180912，江蘇某藥業有限公司提供）。

1.1受試動物

KM種雄性小鼠，體重18～22g（由西安交通大學實驗動物中心提供，質量合格證號：SCXK（陜）2014-0219）

1.2主要試劑與儀器

DNFB（二硝基氟苯）、SRBC（綿陽紅細胞）、Na2CO3、印度墨汁、UB8100B紫外可見分光光度計、電子天平、打孔器、離心機。

2.方法

2.1劑量選擇及動物分組

試驗設對照組（純水）及低劑量組（110mg/kg），中劑量組（220mg/kg），高劑量組（440mg/kg）（分別相當于人體推薦用量的5倍、10倍和20倍）。各劑量組分別取受試物1.1g、2.2g、4.4g加純水至200mL，充分混勻后灌胃。灌胃量均為20mL/kg.bw，每天一次，連續灌胃30天。

實驗動物共分為4個指標測定組，每個指標測定組均分別包括對照組和受試物三個劑量組，每組11只動物。

2.2臟器/體重比值測定

連續灌胃30天后，稱取動物體重，頸椎脫臼處死動物，取出動物的脾臟、

胸腺，分別稱出脾臟、胸腺重量，計算臟器/體重比值（以mg/10g表示）。

2.3小鼠碳粒廓清實驗

從小鼠尾靜脈注入4倍稀釋的墨汁，立即計時，分別于2min、10min從小鼠內眥靜脈叢取血20μL，加到含2mL0.1% Na2CO3溶液的試管中，混勻，用UB8100B紫外可見分光光度計，在600nm波長處測定OD值（用0.1% Na2CO3溶液作空白對照）。將小鼠處死，取肝、脾臟，稱重，計算碳廓清指數K和吞噬指數α。

2.4二硝基氟苯誘導的小鼠遲發型變態反應實驗

小鼠灌胃25d后，每組小鼠腹部皮膚脫毛，用50μL二硝基氟苯溶液涂抹致敏，5d后將10μL二硝基氟苯溶液涂抹小鼠右耳兩面進行攻擊，24h后處死小鼠，用打孔器取下左右耳殼8mm直徑的耳片，稱重，以兩耳片重量之差值表示腫脹度。

2.5血清溶血素的測定（血凝法）[2]

小鼠連續灌胃的第26d，每只小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2mL免疫，連續灌胃4d后，進行小鼠眼眶取血，按標準“血凝法”觀察血球凝集程度進行血清溶血素的測定。

2.6數據統計

數據處理采用 SPSSl7.0 統計軟件分析，P<0.05為差異有統計學意義。

二、結果

1.臟器/體重測定結果

在四個指標測定組中，各劑量組與對照組相比，初始體重、中期體重、末期體重及體重增重均無顯著性差異。各劑量組與對照組小鼠相比，其脾臟/體重比值均無顯著性差異，其胸腺/體重比值均無顯著性差異，見表1。

2.單核-巨噬細胞功能測定結果（小鼠碳廓清實驗）中、高劑量組與對照組小鼠相比，其碳廓清指數K及吞噬指數α均有顯著性差異（P<0.05，P<0.01），見表2。

3.細胞免疫功能測定結果（遲發型變態反應實驗）

各劑量組小鼠的耳廓腫脹度均高于對照組，且隨劑量的增加而增加。與對照組相比，220、440mg/kg劑量組差異有統計學意義（P<0.05，P<0.01），見表3。

4.體液免疫功能測定結果（血清溶血素的測定）

各劑量組與對照組小鼠相比，其抗體積數均無顯著性差異，見表4。

三、討論

本文通過實驗表明，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉在220、440mg/kg劑量下，明顯增強小鼠單核-巨噬細胞功能及DNFB誘導的小鼠遲發性變態反應。結果表明，蝙蝠蛾擬青霉菌絲體粉具有明顯增強小鼠細胞免疫功能的作用。

參考文獻

[1]傅惠英，張利棕，壽旗揚，等.中國被毛孢和蝙蝠蛾擬青霉小鼠免疫功能調節作用的比較[J].中國比較醫學雜志，2012，22（9）：16-20.

[2]衛生部衛生法制與監督司.保健食品檢驗與評價技術規范（2003版）[S].北京：人民衛生出版社，2003：22-34.