清道夫受體與腦卒中的研究進展

甘艷艷，劉 靜，關富仁，周哲屹，盧昌均*

(1.廣西中醫藥大學，南寧 530200；2.柳州市中醫醫院，廣西 柳州 545001)

腦卒中(cerebral stroke)是泛指各種原因導致腦部血管血液循環異常引起的以腦組織缺血或出血性損傷的腦功能障礙為主要臨床表現的一組疾病。近年來，患腦卒中的病人越來越多，且腦卒中患者中有高效的致殘率和死亡率，是目前全球第一大致殘病因，也是我國的首位致死原因，屬于世界范圍內嚴重的公共衛生健康問題之一，給人們生活、家庭及社會帶來嚴重的影響和沉重的負擔[1]。因此，早預防、早治療對于腦卒中的發生、發展及預后至關重要。腦卒中的主要危險因素包括血壓高、血糖高、血脂高、過度飲酒、長期吸煙等，主要病因有動脈栓塞、動脈粥樣硬化、血栓形成、腦動脈瘤、腦內血管畸形等。清道夫受體(scavenger receptor，SR)是一類存在于細胞表面上結構多樣的可識別多種配體的蛋白質，其配體包括內源性和修飾的宿主源性分子和微生物病原體；清道夫受體具有廣泛的生物學功能，它們不僅具有吞噬細胞受體和天然免疫識別受體的功能，還可作為炎癥信號的調節因子發揮重要作用參與許多生理和病理過程[2]。近年來有不少關于清道夫受體與腦卒中的研究報道，現對清道夫受體與缺血性腦卒中、出血性腦卒中的相關研究報道進行綜述，為腦卒中的臨床診治提供更多可靠的生物學標志物。

1 清道夫受體的概念及生物學作用

1979年Goldstein等[3]在探索粥樣斑塊內含脂質巨噬細胞形成的研究中發現了巨噬細胞表面有可胞吞和降解被修飾的低密度脂蛋白的受體，并首次提出“清道夫受體活性”。隨后研究發現，這種受體不僅可識別脂蛋白配體，亦可識別非脂蛋白配體，其與配體的結合具有廣泛性和高親和力，具有多種生物學活性，因而被定義為清道夫受體(scavenger receptor，SR)[4]。隨著時間的推進和相關研究的進展，越來越多的清道夫受體成員被陸續發現。根據清道夫受體不同的結構和序列特點，目前清道夫家族有A-J 10個亞分類[2]，不僅分布于巨噬細胞上，還可見于血管平滑肌細胞、內皮細胞、肺泡巨噬細胞、纖維母細胞等細胞。

清道夫受體識別的配體范圍廣泛且極其多樣，其配體主要屬于多聚陰離子，其中包括被化學修飾的蛋白質、多聚核糖核苷酸、陰離子磷脂、天然和修飾化多糖、細菌脂多糖及硫酸多糖等。SR分布及配體的廣泛性讓其擁有廣泛、多樣的生物學功能。SR具有宿主防御、吞噬凋亡細胞、激活細胞外信號、調控細胞間信號轉導、細胞黏附、內化和降解多種物質等多種功能。SR最初的研究主要是探討其在動脈粥樣硬化形成中的作用，而且眾多研究證實，SR可通過調節脂代謝、血小板活化、血栓形成、無菌性炎癥等機制介導動脈粥樣硬化的發生。然而，動脈粥樣硬化是腦卒中最常見的病理基礎。同時，SR也是中樞神經系統重要的模式識別受體，在神經系統的退行性病變、自身免疫性疾病和腦血管疾病等多種疾病的發病機制中扮演重要的角色[5]。

2 清道夫受體與缺血性腦卒中的相關研究

缺血性腦卒中(cerebral ischemic stroke)是指腦部血管變窄或被堵塞引起腦組織缺血缺氧而導致的神經功能障礙的一組疾病。缺血性腦卒中的危險因素主要包括年齡、性別、種族和遺傳的不可干預因素以及長期吸煙、過度飲酒、肥胖、高血壓、糖尿病、高同型半胱氨酸血癥、動脈粥樣硬化等的可干預因素。缺血性腦卒中的病理損害過程涉及多種機制，包括炎癥反應、細胞興奮性毒性、氧化應激和免疫等。缺血性腦卒中目前的治療方法主要有營養神經、降解血漿纖維蛋白原、靜脈溶栓、動脈取栓、抗凝、抗血小板聚集及中醫中藥等治療。但是由于最佳治療時間窗有限，大多數缺血性腦卒中患者的預后不理想，嚴重影響患者自理能力及降低其生活質量。

2.1 SR-A與缺血性腦卒中

清道夫受體A類(SR-A)是存在于巨噬細胞和樹突細胞上的模式識別受體[6]，在炎癥反應和固有免疫的機制中具有重要作用[7]，在宿主防御微生物病原體的過程中起著重要的中介作用[8]。SR-A可內吞修飾的脂蛋白，推進動脈粥樣硬化斑塊形成的過程[9]。張靖等[10]研究發現通過SR-A調節啟動子區的DNA甲基化來改變同型半胱氨酸的表達水平，進而增加泡沫細胞中的脂質聚集以推進動脈粥樣硬化的病變過程，表明SR-A表達上調有可能在高同型半胱氨酸血癥致動脈粥樣硬化的過程中起著至關重要的作用。既往有研究發現，在腦缺血后SR-A可激活小膠質細胞/巨噬細胞，從而激活NFκB信號通路和增加促炎性因子的表達，促進腦組織損傷和神經元凋亡[11]。Xu等[12]研究發現SR-A過表達能部分消除VEGF165抑制神經炎癥的作用，降低了VEGF165對缺血性腦損傷的保護作用；反之，VEGF165通過抑制SR-A表達減少神經炎癥和缺血性腦損傷。余偉等[13]研究表明，中國漢族人群中編碼SR-A的MSR1基因rs13306541多態性位點與中國漢族人群的缺血性腦卒中遺傳易感性有關，可能是其發病的一個危險因素。

2.2 CD36與缺血性腦卒中

CD36屬于一種高度糖基化的B類清道夫受體，主要在條紋肌細胞、造血細胞、微膠質細胞、星形細胞、微血管內皮細胞、單核細胞/巨噬細胞、血小板和心肌細胞中表達，在炎癥反應、天然免疫、脂代謝、胰島素抵抗、血栓形成、血管功能障礙中發揮作用。研究發現，氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激CD36介導血小板與單核細胞復合物促進單核細胞攝取oxLDL，從而加快動脈粥樣硬化的進展[14]。曾有研究報道CD36可通過增加氧化應激和炎癥而導致急性缺血性損傷，而CD36的基因缺陷具有神經保護作用[15-16]。CD36是一個參與啟動炎癥的先天免疫受體，是一個中性粒細胞毒性的調節劑，通過CSF3激活中性粒細胞神經毒性從而促進腦缺血-再灌注損傷[17]。Kim等[18]研究顯示CD36缺乏癥可明顯減輕短暫性缺血性腦卒中的炎癥和損傷程度，但對永久性缺血性腦卒中沒有顯示出保護作用。此外，有研究顯示缺血腦細胞內和細胞表面都有CD36的存在，并且揭示了CD36在缺血性腦卒中急性期具有炎癥性作用，在缺血性腦卒中的消退階段可通過吞噬作用起到修復作用；表明CD36在缺血性腦缺血中的作用受腦組織損傷的背景和時間的影響[19]。司慧麗等[20]發現腦梗死伴不穩定性頸動脈斑塊患者的血清CD36水平高于單純不穩定性頸動脈斑塊組及無頸動脈斑塊的腦梗死組，表明血清CD36水平在腦梗死伴不穩定性頸動脈斑塊患者中具有較高的靈敏性和特異性。

2.3 CD163與缺血性腦卒中

CD163是一種細胞膜結合的細胞外血紅蛋白清除受體，被認為只表達于先天免疫系統中，主要見于單核細胞和巨噬細胞，較少見于中性粒細胞；CD163可通過金屬蛋白酶ADAM17從細胞膜上脫落，生成具有淋巴抑制特性的可溶性肽。O’Connell等[21]研究小組在進行全基因組轉錄組篩查時發現，外周血中CD163的表達在缺血性中風患者出現癥狀后數小時內明顯上調；他們的研究小組進一步研究發現缺血性中風引起的CD163升高可直接抑制適應性免疫系統，降低由適應性免疫系統過度激活導致的卒中后自身免疫性并發癥的風險，證明CD163是先天免疫系統保護機制的關鍵中介[22]。蘇柳杭等[23]研究發現CD163可見于動脈粥樣硬化斑塊內，且多見于穩定性斑塊，CD163可能通過下調TWEAK的蛋白水平來抑制NF-κB水平以起到穩定斑塊抗動脈粥樣硬化作用。韓遵華等[24]研究表明依達拉奉治療后的缺氧缺血性腦病新生大鼠的腦組織中CD163、Ho-1 mRNA和蛋白表達水平顯著增加，神經功能障礙明顯減輕，說明依達拉奉可能通過激活CD163/Ho-1信號通路減輕腦損傷程度。Pedragosa等[25]研究顯示腦缺血誘導的CD163巨噬細胞基因表達譜的重新編程，能迅速影響白細胞趨化性和血腦屏障完整性，促進了腦卒中急性期神經功能障礙的過程。

2.4 LOX-1與缺血性腦卒中

血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX-1)是血管內皮細胞中ox-LDL的主要受體，亦可見于平滑肌細胞、成纖維細胞和巨噬細胞。LOX-1在健康血管中的表達不明顯或無法檢測，但在粥樣硬化性病變的動脈中相對過表達[26]；研究證明其在動脈粥樣硬化的發病機制中扮演著至關重要的角色[27]。Huang等[28]的研究小組發現大動脈粥樣硬化(LAA)的缺血性腦梗死患者血清中可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(soluble lectin-like oxidized lowdensity lipoprotein receptoR-1，sLOX-1)水平明顯高于正常對照組，預后恢復不良患者的血清sLOX-1水平明顯高于預后恢復良好患者，說明sLOX-1是LAA缺血性腦卒中患者功能短期預后的獨立預測因子。Li等[29]研究結果表明重度卒中患者的sLOX-1水平比輕度卒中組的顯著升高，腦內動脈狹窄程度越嚴重sLOX-1水平就越高。LOX-1與oxLDL的結合激活細胞內信號通路，增加粘附分子的表達，釋放促炎細胞因子和基質金屬蛋白酶。Markstad等[30]的研究表明oxLDL誘導內皮細胞釋放sLOX-1，高水平的sLOX-1頸動脈斑塊含有較多的oxLDL、促炎細胞因子和基質金屬蛋白酶，與頸動脈粥樣硬化斑塊炎癥和增加缺血性中風的風險有關。

3 清道夫受體與出血性腦卒中的相關研究

出血性腦卒中(cerebral hemorrhagic stroke)是指除外傷性的顱腦內血管破裂出血導致腦功能障礙的一組疾病，包括腦出血和蛛網膜下腔出血。其中，腦出血是預后差且死亡率最高的最具有破壞性的腦卒中類型之一[31]。腦出血發生后，可激活小膠質細胞，釋放促炎細胞因子和趨化因子，從而引起炎癥反應增加腦損傷[32]；表明小膠質細胞介導的炎癥在腦出血所致腦損傷中扮演著關鍵的角色。既往也有研究表明，在腦出血后的繼發性損傷的發病機理中也存在免疫應答反應[33]。腦出血的發病機制復雜，清道夫受體可通過吞噬作用、炎癥、免疫等多種途經參與腦出血后腦組織損傷機制。

3.1 SR-A與出血性腦卒中

Toll樣受體(TLRs)可識別病原體和損傷相關的分子模式，在先天免疫中具有關鍵作用；腦出血后TLRs水平上升，特別是TLR4表達明顯增加，TLR4基因敲除小鼠腦出血后神經功能明顯改善[34]。然而，SR-A是抑制TLR4信號的主要調節受體。研究顯示腦出血小鼠小膠質細胞的SR-A表達顯著升高，并在治療3天后達到最高水平，且SR-A通過抑制TLR4抑制小膠質細胞的炎癥反應和神經元細胞凋亡[35]。另一項研究也證實SR-A表達的增加可顯著減輕腦出血的小膠質細胞活化和炎癥損傷，而基因SR-A消融增加了小膠質細胞的激活和細胞因子的產生，并增加了腦出血小鼠的神經元損傷敏感性[36]。這些研究說明SR-A在炎癥反應中起抑制作用，而SR-A的缺陷會導致病原體感染防護體系受損，加重病情，表明SR-A介導的神經免疫負反饋機制平衡可能為腦出血提供一種新的治療策略。

3.2 CD36與出血性腦卒中

腦出血后血腫激活小膠質細胞、釋放炎性因子和血腫占位效應導致腦組織的進一步損傷；縮小血腫、抑制炎癥是減少繼發性損傷和改善預后的關鍵。在腦出血的早期，小膠質細胞有清除血腫的作用，而這一作用是通過清道夫受體CD36的介導實現其對紅細胞及紅細胞溶解成份的吞噬。方煌[37]的研究證實了這一觀點，他的研究發現CD36缺陷患者的NIHSS評分及mRS評分較CD36正常患者顯著增高，CD36缺陷的小膠質細胞和CD36抗體封閉野生型的小膠質細胞對紅細胞的吞噬作用均減弱；而且還發現腦出血后激活TLR4信號通路可釋放炎癥因子IL-1β、TNF-α，后者可以抑制小膠質細胞的CD36表達，從而削弱小膠質細胞的吞噬功能，延緩血腫的吸收。段淑娜[38]的研究也證實了CD36在腦出血的血腫吸收過程中發揮積極的作用。Chen等[39]的研究發現辛伐他汀通過上調CD36促進腦室出血后血腫吸收和減輕腦積水。然而，Gong等[40]的研究發現CD36基因的rs 1194182多態性與腦出血有關，GG基因型可能是一個獨立的預測因子；但是，該研究局限于小樣本量，腦出血中CD36基因的機制尚不清楚。

3.3 CD163與出血性腦卒中

腦出血后血腫中的紅細胞會自發溶解和釋放血紅蛋白，然而紅細胞裂解及血紅蛋白降解釋放出的大量自由鐵等分解產物是神經毒素，導致腦組織和神經元的進一步損傷。清道夫受體CD163在中樞神經系統中僅表達于血管周圍細胞及腦膜巨噬細胞，眾多研究證實CD163在中樞系統中發揮吞噬作用，是血紅蛋白的清除受體。Dang等[41]研究發現腦出血早期血腫中心發生紅細胞溶解，血腫周圍的CD163水平升高。解文菁[42]的研究結果顯示血清CD163濃度低的患者其血腫吸收速度較濃度高的患者慢，其神經功能缺損恢復亦較慢，預后較差。觸珠蛋白(Hp)-血紅蛋白(Hb)-CD163系統是清除血紅蛋白的主要途徑，也是腦出血后重要的內源性血腫清除系統之一。PPAR-γ激動劑紅曲素通過Hp-Hb-CD163通路上調CD163和Hp的蛋白和mRNA表達，減小腦血腫和腦水腫的體積[43]。然而，Leclerc等[44]的研究發現CD163缺乏在腦出血后3天是起積極作用，在腦出血后10 d卻表現出更嚴重的繼發性神經功能損傷，說明CD163在腦出血的不同階段有著不同的影響。

3.4 LOX-1與出血性腦卒中

血凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白誘導的血管功能障礙中有著關鍵作用，巨噬細胞和平滑肌細胞通過LOX-1攝取ox-LDL參與動脈粥樣化反應，LOX-1的表達水平不僅在缺血性腦血管病中升高，在腦出血中也有明顯的變化。高血壓是非外傷性腦出血的最常見原因，而有研究發現自發性高血壓大鼠大腦皮層的LOX-1水平表達上調可誘導神經元的凋亡[45]。在Yokota等[46]的LOX-1與腦出血相關研究中，超過90%的腦出血患者有高血壓病病史，他們的研究表明，腦出血患者的血清sLOX-1濃度高于年齡和性別無差異的對照組。Inoue等[47]的對腦卒中患者進行前瞻性研究，檢測了16例腦卒中患者發病24 h和2個月時的血清LOX-1水平，其中腦梗死9例，腦出血7例，研究結果顯示，腦出血患者早期LOX-1的中位數明顯高于腦梗死患者早期LOX-1的中位數，可見LOX-1在腦出血中更具有敏感性，血清LOX-1水平有望作為腦出血的生物標志物。

4 總結

清道夫受體具有多種多樣生物學功能，參與多種生理和病理機制過程，在腦卒中疾病中也扮演著至關重要的角色。綜述上訴清道夫的相關研究，無論是缺血性腦卒中還是出血性腦卒中，清道夫受體的表達都明顯增高，但是過表達的清道夫受體有的起著積極的作用，有的卻加重病情，有的在疾病不同的時間階段起著不同的作用，扮演雙重角色，但是具體的作用機制均尚未明了。為了進一步明確清道夫受體在腦血管疾病的作用及其機制，需要運用更大規模的臨床研究和更進一步的動物模型試驗去探討。進一步廣泛深入探討清道夫受體與腦卒中疾病的相關機制和臨床意義，將有利于為腦卒中提供更有效的防治措施。