不同地區(qū)奶牛源抗生素耐藥及耐藥基因攜帶情況研究進展

張雪婧，蒲萬霞

(中國農業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所 中國農業(yè)科學院新獸藥工程重點開放實驗室甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅 蘭州 730050)

2018年，全球原料奶產量約為8.27億t，較2017年增長2%，主要增產貢獻為亞洲[1]。養(yǎng)殖過程中，由于抗生素的大量使用，動物體內產生大量耐藥菌。隨著農業(yè)的發(fā)展，環(huán)境中的抗生素作為一類新型的污染物已成為國內外關注的焦點。大部分的抗生素不能在動物體內完全代謝，可通過動物的糞便或尿液排出體外，進入到環(huán)境中，從而影響環(huán)境中微生物群落結構[2-5]。已有研究發(fā)現(xiàn)，在土壤、水源、動物養(yǎng)殖環(huán)境介質中均檢測到耐藥基因[6-7]。本研究對全國大部分地區(qū)奶牛源抗生素耐藥情況及耐藥基因檢出情況進行綜述，旨在為了解奶牛源抗生素耐藥情況及臨床指導用藥提供參考。

1 奶牛場中常見病原菌耐藥情況

1.1 大腸埃希菌

奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖過程中發(fā)病率高的疾病之一。目前，抗生素治療奶牛乳房炎仍然是最常用及最有效的方法，由于抗生素不合理及大量濫用，導致奶牛乳房炎病原菌產生耐藥性，且耐藥菌株呈不斷增多趨勢，甚至出現(xiàn)超級耐藥菌株，給奶牛乳房炎的臨床治療帶來了很大的挑戰(zhàn)[8]。張咚咚等[9]對北京地區(qū)奶牛乳房炎細菌耐藥情況調查發(fā)現(xiàn)，患病奶牛乳樣中所分離的菌株對萬古霉素、氧氟沙星等高度敏感，對青霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟等高度耐藥。Sakwinska等[10]發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎患病奶牛乳樣中分離菌株對青霉素高度耐藥。章慧等[11]研究發(fā)現(xiàn)，上海地區(qū)奶牛乳房炎患病乳樣中分離菌株對青霉素、氨芐西林耐藥率達到100%，且存在多重耐藥情況。吳明光[12]研究發(fā)現(xiàn)，山東地區(qū)分離的奶牛乳房炎源大腸埃希菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感;對新霉素等7種藥物耐藥。高健鵬等[13]對新疆地區(qū)研究發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎對青霉素、鏈霉素、四環(huán)素等抗生素耐受。大部分地區(qū)奶牛場均存在奶牛乳房炎的病例，由于抗生素的不規(guī)范使用導致細菌耐受及多重耐藥菌株的出現(xiàn)，對青霉素、頭孢類抗生素耐藥情況最為嚴重。

1.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是一種革蘭氏陽性菌，是引起奶牛乳房炎的重要致病菌之一，感染率達50%以上[14]。趙艷坤等[15]通過對金黃色葡萄球菌耐藥性及變遷情況研究發(fā)現(xiàn)，奶牛乳房炎對青霉素、氨芐西林抗生素耐藥情況嚴重。高攀[16]對新疆地區(qū)奶牛乳房炎病例研究發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林耐藥嚴重。馮小慧等[17]發(fā)現(xiàn)，內蒙古地區(qū)金黃色葡萄球菌對青霉素、復方新諾明等高度耐藥。王洪海等[18]發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌對環(huán)丙沙星、慶大霉素和頭孢他啶的敏感性高，無乳鏈球菌對頭孢他啶、克林霉素的敏感性較高，停乳鏈球菌對慶大霉素、克林霉素的敏感性較高，對青霉素耐藥。陜西某牛場中奶牛隱性乳房炎對鏈霉素、青霉素、阿莫西林、氨芐西林耐藥率高[19]。天津地區(qū)奶牛場中奶牛對大環(huán)內酯類、林可酰胺類藥物耐藥率普遍較高[20]。金黃色葡萄球菌作為奶牛養(yǎng)殖中常見的致病菌，抗生素的廣泛使用使其耐藥情況比較嚴重，尤其以青霉素、氨芐西林等耐藥嚴重，并且多重耐藥現(xiàn)象普遍存在于各地區(qū)。

1.3 鏈球菌

田曉英等[21]調查發(fā)現(xiàn)，華北地區(qū)四省奶牛場中鏈球菌分離株對苯唑西林和青霉素完全耐藥，對四環(huán)素類藥物耐藥性較高，對喹諾酮類和氨基糖苷類藥物耐藥性較低，華北地區(qū)鏈球菌總檢出率較低，但多重耐藥情況嚴重。向敏等[22]對湖北省奶牛場進行調查發(fā)現(xiàn)，鏈球菌對青霉素鈉、頭孢噻呋鈉抗性強，但對穿心蓮、魚腥草等中藥材比較敏感。杜琳等[23]對我國部分地區(qū)奶牛乳房炎致病菌進行研究發(fā)現(xiàn)，鏈球菌分離株數(shù)較少，分離出的革蘭氏陽性菌對氨曲南的耐藥率最高，革蘭氏陰性菌對氨芐西林的耐藥率最高。郭玉茹等[24]發(fā)現(xiàn)，遼寧某牛場中奶牛對頭孢氨芐、磺胺類藥物耐藥率達到100%，對苯唑西林、林可霉素耐藥率達到80%以上，并且多重耐藥現(xiàn)象嚴重。昆明地區(qū)奶牛場對青霉素嚴重耐藥，且出現(xiàn)7種藥物同時耐藥的情況[25]。鏈球菌存在于奶牛養(yǎng)殖環(huán)境中，但檢出株數(shù)較少，鏈球菌的耐藥率和多重耐藥現(xiàn)象也很嚴重，在臨床治療中，可嘗試選用中西結合或選用抗生素替代物，以降低抗生素的耐藥情況。

2 奶牛場中耐藥基因檢測

耐藥基因作為一種新型環(huán)境污染物，廣泛存在于環(huán)境中，借助質粒、整合子、轉座子等可移動遺傳元件在細菌之間進行水平基因轉移[26-27]。由于抗生素大部分會以原藥形式排出體外，養(yǎng)殖場中的動物糞便中存有大量的耐藥菌和耐藥基因，危害到畜禽及人類健康。北京地區(qū)畜禽養(yǎng)殖場周邊農田中蔬菜樣品檢測發(fā)現(xiàn)，磺胺類、四環(huán)素類抗生素耐藥基因檢出率達到100%，并檢測出禁用多年的氯霉素耐藥基因(cmlA)[28]。對廣西地區(qū)畜禽產品檢測發(fā)現(xiàn)，耐藥基因qnrA檢出率達到91.18%，blaTEM檢出率達100%，并且多重耐藥情況嚴重[29]。于長泳[30]對遼寧省奶羊場中磺胺類耐藥基因進行檢測發(fā)現(xiàn)，sul1基因檢出率最高，與藥敏試驗結果中病原菌對磺胺類藥物高度耐藥結果相符。河北省7個地區(qū)的420份乳房炎奶牛乳樣中，喹諾酮類(gyrA、qnrB)和大環(huán)內酯類(ermB)耐藥基因檢出率高[31]。寧夏地區(qū)畜產品中，磺胺類(sul1、sul2)和四環(huán)素類(tetE)耐藥基因的檢出率較高[32]。

3 小結

作為農業(yè)大國，畜產品的食品安全與人類健康息息相關。我國是世界上最大的抗生素生產國和使用國[33]，抗生素的不規(guī)范使用使得耐藥菌、耐藥基因大量產生。黃廷鵬[34]對甘肅省金昌地區(qū)奶牛抗生素的用藥進行調研發(fā)現(xiàn)，由于長期單一地使用抗生素治療牛病，導致奶牛個體出現(xiàn)不同程度的耐藥。動物在養(yǎng)殖過程中抗生素的用量大，抗生素通過糞便、尿液等排出進入環(huán)境中，對土壤、水源等均造成不同程度的污染。從銀川市規(guī)模奶牛養(yǎng)殖場糞便、污水和土壤中分離鑒定出429株細菌，條件致病菌占88.55%，主要以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和托爾豪特鏈球菌為主[35]。奶牛養(yǎng)殖場中廢物的排放對人和動物的健康存在潛在風險，若不經處理直接排放或還田施用，將對養(yǎng)殖環(huán)境和自然環(huán)境造成威脅。對各地區(qū)奶牛源抗生素使用情況調查發(fā)現(xiàn)，雖然各地區(qū)養(yǎng)殖環(huán)境、飼養(yǎng)方法等存在地域差異，但實際生產中抗生素種類大體一致，青霉素類、頭孢類、四環(huán)素類等抗生素的耐藥情況嚴重。耐藥基因檢出率與抗生素的耐藥情況有關，但磺胺類、四環(huán)素類、β-內酰胺類耐藥基因檢出率高。在實際生產中，可選用中西藥結合或以中藥為主的治療方案，降低藥物的耐藥和多重耐藥現(xiàn)象。