近十年中藥免疫雙向調節研究進展?

周劉華，姚 濤，郭愛靈,2，林駿杰，潘斯慶，常躍興,2△

(1. 安徽理工大學醫學院藥學系，安徽 淮南 232001； 2. 安徽理工大學醫學前沿實驗中心，安徽 淮南 232001)

免疫調節是通過體內多系統、多細胞和多分子間相互協同，共同調節免疫應答發生發展和轉歸，使免疫應答維持在適度水平，從而維持機體內環境穩定的過程。機體免疫調節機制一旦發生障礙，可導致機體免疫功能亂，并可引起相關免疫性疾病的發生[1-2]。現代研究表明，一些含多糖類、苷類、生物堿類、黃酮類等成分的中藥對機體免疫系統具有雙向調節作用[3-5]。這些中藥不僅能在組織和器官水平上對機體進行免疫雙向調節，而且也能在細胞和分子等微觀水平上進行免疫雙向調節，具體表現在通過促進吞噬細胞、淋巴細胞及單核巨噬細胞功能增強機體免疫功能，同時還可以通過抑制淋巴細胞增殖和減少細胞因子釋放等方式來抑制機體免疫功能等方面[6]。本文對近10年來含多糖類、苷類、生物堿類、黃酮類中藥免疫雙向調節作用及其機制進行概述，為免疫性疾病中藥防治提供借鑒。

1 多糖類中藥免疫雙向調節

1.1 上調免疫

多糖類中藥可對免疫抑制模型動物胸腺和脾等免疫器官進行保護而起到上調機體免疫功能的作用。吳清和等[7]通過實驗研究證實，麥冬多糖可明顯增加小鼠胸腺、脾質量，激活小鼠網狀內皮系統的吞噬功能。孫守坤等[8]通過研究發現，刺五加酸性多糖可保護免疫低下小鼠的脾臟和胸腺等免疫器官。Zhang RP等[9]研究發現，黃芪多糖可能是通過抑制梗阻性黃疸小鼠脾臟及胸腺中細胞凋亡對免疫器官產生保護作用的。

多糖類中藥可通過調節T淋巴細胞及B淋巴細胞增殖而上調機體免疫功能。胡庭俊等[10]通過研究發現，山豆根多糖能顯著促進B細胞和T細胞的增殖作用。趙明智等[11]研究發現，古尼蟲草純化多糖通過古尼蟲草純化多糖1(CG1)作用可增強小鼠淋巴細胞的增殖，從而促進T淋巴細胞免疫和B淋巴細胞免疫。Ji XY等[12]通過研究桂枝茯苓膠囊對子宮內膜異位癥小鼠的作用，發現桂枝茯苓可通過激活Toll樣受體和甘露糖受體信號通路來增強巨噬細胞吞噬能力及T細胞增殖力，說明桂枝茯苓可以通過增強機體非特異性免疫功能和特異性免疫功能來減輕小鼠子宮內膜異位癥的癥狀。

多糖類中藥可通過增加細胞因子釋放而對免疫抑制模型動物起到上調機體免疫功能的作用。細胞因子是一類在免疫系統中主要起到調節機體免疫功能及參與一些炎癥反應等作用的小分子蛋白質[13]。LI WL等[14]用雙抗體夾心酶聯免疫吸附劑測定(ABC-ELISA)法，研究發現黑靈芝多糖能顯著促進免疫抑制小鼠體內白介素-2(IL-2)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達，增強小鼠的免疫功能。李磊強等[15]用ELISA試劑盒測量顯示，免疫抑制小鼠體內IL-2和干擾素-γ(INF-γ)含量顯著增加，研究發現紅芪多糖(HPS)能夠促進IL-2和INF-γ分泌,通過能誘導Th1細胞分化來增強機體細胞免疫應答。

1.2 下調免疫

多糖類中藥能通過影響主要免疫器官胸腺和脾臟的臟器指數，從而保護機體免受細胞因子過量表達而受到損害[16]。徐海軍等[17]研究發現，不同濃度的霍山石斛多糖均能降低免疫亢進小鼠的胸腺和脾臟指數，并降低程度與藥物濃度成正比。張湘東等[16]通過研究丹參多糖對二硝基氟苯誘發小鼠遲發超敏反應的影響，結果發現給藥組小鼠的臟器指數較模型組有顯著降低，且當藥物濃度為500 mg /L時對其降低作用最顯著。

研究發現，多糖類中藥還能通過抑制體內免疫細胞的增殖，避免免疫細胞過量表達而使機體受到損傷，從而使機體免疫維持在正常水平[17]。Zheng YS等[18]通過流式細胞術檢測技術研究發現，黨參多糖不僅能使敗血癥小鼠的T調節細胞中Toll-樣受體4(TLR4)水平顯著下降，而且還能有效抑制敗血癥小鼠體內叉頭框蛋白P1(Foxp1)的表達，從而抑制小鼠體內T調節細胞的過量表達。張俊等[19]研究發現，板藍根多糖能抑制由環磷酰胺引起免疫亢進的小鼠體內B淋巴細胞和T淋巴細胞的增殖，通過調節機體特異性免疫來降低免疫亢進大鼠的亢進趨勢。

近期研究指出，多糖類中藥還可通過抑制細胞因子的過量表達，從而使機體免疫達到穩定。 轉化生長因子-β(TGF-β)是很強的免疫活性抑制因子，江澤波等[20]通過研究發現，豬苓多糖可以促進M1亞型巨噬細胞內抗炎因子TGF-β分泌，并且TGF-β因子分泌量隨藥物濃度的增加而增加。據劉亮等[21]研究報道發現，紫菜多糖中主要成分紫菜多糖3(PP3)和紫菜多糖4(PP4)的濃度高于或低于0.2 mg/mL時,能夠明顯抑制免疫亢進大鼠體內IL -2和TNF-α的表達，使機體免疫活性明顯降低，從而起到抑制作用。

2 生物堿類中藥免疫雙向調節

2.1 上調免疫

生物堿類中藥主要通過對脾的上調作用而調節機體免疫功能。李軍等[22]研究發現，苦參堿與氧化苦參堿是通過促進荷H22肝癌細胞小鼠的脾增大來促進T淋巴細胞免疫，從而對荷H22肝癌細胞小鼠有明顯抑瘤作用。王曉燕等[23]通過研究發現，苦參堿能拮抗5-氟尿嘧啶(5-Fu)對脾臟的免疫抑制，使脾臟指數增加。

機體外周血清中T淋巴細胞亞群有CD3、CD4和CD8等，這些亞群在調節機體免疫中發揮著重要作用[24]。而B淋巴細胞主要通過分泌抗體來發揮機體特異免疫應答，其免疫應答強弱主要體現為濃度的高低[25]。根據王興玲等[26]研究發現，苦參堿是通過提高B淋巴細胞和調節性T細胞 CD4+、CD25+的濃度對化療后大鼠的免疫力有明顯的提高。王愛萍等[27]研究發現，吞噬細胞功能隨著長春新堿的濃度增加而增強，長春新堿是通過提高吞噬細胞吞噬功能來改善機體免疫功能，增強機體免疫力。

當小鼠感染棘球蚴病后IL-2和IL-10相對降低，而IL-6水平相對增高。程時磊等[28]通過研究發現，藏藥砂生槐總生物堿可促進肝泡型包蟲病小鼠體內IL-2、IL-6和IL-10的表達，使它們趨于正常值。靈芝多糖、靈芝三萜、靈芝生物堿等是靈芝的主要活性成分[29]，程麗佳等[30]通過研究靈芝提取物靈芝生物堿對小鼠機體免疫力作用發現，給藥組小鼠血液中IFN-γ水平較空白組有顯著提高，且IFN-γ升高的水平與靈芝提取物靈芝生物堿濃度在一定范圍內成正比。

2.2 下調免疫

孟憲軍等[31]通過研究發現，苦參堿可以通過減少抑制荷瘤小鼠的脾臟指數來抑制荷瘤小鼠的淋巴細胞體外增殖，使小鼠特異免疫功能受損。蔣湖靈等[32]研究發現，高劑量氧化苦參堿可通過減少脾和胸腺的指數對正常小鼠二硝基氯苯所致的遲發性超敏反應呈拮抗作用，表明氧化苦參堿是通過抑制細胞免疫來調節正常小鼠的免疫功能。

生物堿類中藥主要通過下調T淋巴細胞及B淋巴細胞的增殖來調節機體免疫功能。Xu YK等[33]從鉤吻中提取出鉤吻堿，研究發現鉤吻堿能明顯抑制刀豆蛋白-A(Con-A)誘導的T淋巴細胞及脂多糖(LPS)誘導的B淋巴細胞的增殖。汪飛等[34]通過建立成功的大鼠角膜移植模型，發現一定濃度的苦參堿能顯著增加同種異體角膜移植手術大鼠的CD4+、CD25+調節性T細胞含量，抑制移植后機體的免疫排斥反應。Sa DR等[35-36]從甘草醇提物中分離出一種新的生物堿，研究發現其可以調節環氧合酶2的活性以抑制淋巴細胞增殖，通過降低機體免疫力來減輕延遲型超敏反應的危害。

生物堿類中藥主要通過調節白介素和腫瘤壞死因子表達來調節機體免疫功能。王欣玲等[37]通過研究青藤堿對肝細胞癌模型大鼠肝移植術后免疫應答的影響，先建立大鼠肝細胞癌模型，再按隨機數字表法分為模型組、青藤堿組，發現青藤堿組中免疫促進因子IL-2和IL-6較模型組顯著降低，結果顯示青藤堿可抑制肝癌大鼠肝移植術后細胞免疫。劉佳等[38]研究發現，左旋箭毒堿、異粒枝堿和輪環藤堿3種雙芐基異喹啉類生物堿(BBI)，可以通過抑制活化的巨噬細胞釋放炎癥因子IL-1、TNF-α和IL-6來拮抗巨噬細胞過度活化，并且在3種生物堿中左旋箭毒堿拮抗作用最強。

3 苷類中藥免疫雙向調節

3.1 上調免疫

張永寧等[39]通過研究發現，人參皂苷可以減輕腫瘤小鼠化療后腸道組織黏膜的損傷，提高小鼠腸道黏膜免疫力。唐燕等[40]研究發現，白芍總苷脂質體可以通過提高荷瘤小鼠的胸腺指數和脾臟指數來增強機體特異性免疫力，并且在一定濃度范圍內，促進作用與白芍總苷濃度成正比。

苷類中藥可通過調節巨噬細胞的吞噬功能來調節機體免疫功能。林琳等[41]研究發現，黃芪甲苷能明顯提高抗肝癌小鼠的巨噬細胞吞噬中性紅的能力，隨著藥物濃度和作用時間的增加，巨噬細胞吞噬中性紅的能力逐漸升高，當黃芪甲苷濃度為0.1 mg/ml且作用24 h后，吞噬細胞吞噬能力最佳。古秋莉等[42]研究高、中、低3種濃度的鐮形棘豆黃酮苷元對免疫抑制小鼠的影響，通過采用巨噬細胞碳粒廓清實驗和巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗測定方法，發現給藥組的吞噬百分率、廓清指數和吞噬系數較對照組有顯著提高。

苷類中藥可通過調節干擾素和腫瘤壞死因子水平來調節機體免疫功能。Sun J等[43]通過研究不同濃度的人參皂苷對小鼠免疫功能影響，采用ELISA法檢測小鼠血清中細胞因子的含量，發現人參皂苷可以通過促進IL-5和IFN-γ的表達來調節機體免疫，其促進作用隨著藥物濃度增加而增強。楊逸等[44]通過研究發現，人參皂苷能促進免疫性肝損傷小鼠體內TNF-α和IFN-γ的表達來對免疫性肝損傷小鼠起到保護作用。

3.2 下調免疫

遲發型超敏反應試驗是檢測細胞免疫功能的一種常用方法[45]。薛芳喜等[46]通過研究發現，一定濃度的牛蒡子苷元能顯著降低二硝基氯苯誘導遲發型超敏反應小鼠的胸腺與脾指數。小腸相關淋巴組織是機體最大的免疫器官[47]，王亭等[48]通過研究羥基積雪草苷對膠原關節炎大鼠腸道黏膜免疫的影響，發現羥基積雪草能顯著降低小腸抗原呈遞細胞(APC)的成熟程度，使大鼠黏膜免疫耐受狀態遭到破壞。

赤芍總苷是從川芍藥或毛茛科植物芍藥中提取的一種糖苷類物質[49]。楊霞等[50]用免疫組化法分析CD4+、CD8+的表達情況，研究發現一定濃度的赤芍總苷可以通過抑制扁平苔蘚患者體內的CD4+和CD8+的表達來保護扁平苔蘚患者。袁秀玲等[51]探討淫羊藿苷對腫瘤小鼠巨噬細胞和淋巴細胞的免疫功能，用不同濃度的淫羊藿苷刺激腫瘤小鼠，采取噻唑藍(MTT)法檢測淫羊藿苷對巨噬細胞吞噬功能和淋巴細胞增殖的影響，結果發現淫羊藿苷能夠降低巨噬細胞的吞噬功能，抑制脾臟淋巴細胞增殖，從而調節機體免疫功能。

苷類中藥可通過調節多種細胞因子的分泌來調節機體免疫功能。丁賀田等[52]通過研究發現，黃芪甲苷溶液可以抑制小鼠脾臟細胞的IL-2和IFN-γ表達，且在一定范圍內細胞因子降低程度隨藥物濃度的增加而增加。雷公藤多苷片是一種免疫調節劑，主要起作用的是雷公藤內酯二醇和雷醇內酯[53-54]。張瑜鴻等[55]用不同劑量的雷公藤總苷作用于由葡聚糖硫酸鈉誘導的小鼠結腸炎，研究發現雷公藤總苷可以通過減少小鼠體內IL-2、TNF-α和IFN-γ的釋放來發揮免疫抑制作用，且當雷公藤總苷濃度越高，改善作用更為顯著。

4 黃酮類中藥免疫雙向調節

4.1 上調免疫

卷柏屬于植物中的黃酮類尤其雙黃酮類為其特征性的化學成分，也是主要的活性成分[56-59]。GAYATHRI V等[60]通過研究發現，兗州卷柏可以刺激小鼠的胸腺生長來增大胸指數，進而有效恢復免疫抑制小鼠的免疫功能。鄭曉珂等[61]研究發現，卷柏水可以降低小鼠脾臟G0/G1期細胞百分率以抑制小鼠細胞凋亡，通過調節細胞周期進程來保護小鼠胸腺功能。據SHIM KS等[62]報道發現，穗花杉雙黃酮能誘導破骨細胞分化，通過增強骨髓間充質干細胞增殖來提高機體免疫力。

黃酮類中藥主要通過調節T淋巴細胞的增殖來調節機體免疫功能。趙趕等[63]通過研究發現，碎補總黃酮可以促進免疫低下小鼠Con-A誘導的脾臟T淋巴細胞和LPS誘導的B淋巴細胞增殖作用，且在一定范圍內碎補總黃酮濃度越高促進作用越顯著。據馬雙剛等[64]研究發現，當山香圓總黃酮濃度在240 mg/kg以上時，其可以通過提高CD4+和CD8+細胞數來調節T細胞亞群的比例，從而提高機體免疫力。

杜仲葉中富含豐富的黃酮類活性化合物[65]，王志宏等[66]通過用杜仲葉為原料來提取不同純度的杜仲黃酮，研究發現不同純度的杜仲黃酮可以促進小鼠細胞因子IL-2和IFN-γ的表達，并且這種促進作用在一定范圍內隨著杜仲黃酮濃度的增加而增強。

4.2 下調免疫

半枝蓮全草含有多種活性化學成分，其中黃酮類化合物含量最高，是主要的活性成分[67]。廖月霞等[68]通過研究發現，半枝蓮全草可以顯著提高腫瘤小鼠細胞內活性氧水平，通過誘導腫瘤小鼠細胞凋亡來抑制B淋巴細胞和T淋巴細胞的增殖。葉清等[69]發現，不同濃度的植物槲皮素對小鼠免疫功能的影響存在差異，只有植物槲皮素濃度達到一定值時，才可以使小鼠脾臟和胸腺的指數降低。

野菊花在經過提取分離和工藝優化后可得到黃酮類化合物(FCI-C)活性部位[70]。陳園園等[71]通過研究野菊花中黃酮類化合物對免疫調節和肝保護的協同作用發現，野菊FCI-C在60 mg/10 g劑量下，能夠使雞紅細胞吞噬率和碳粒吞噬指數降低，并且抑制小鼠體內淋巴細胞的增殖。另外，有Ao G等[72]通過研究發現，甘草黃酮類成分可通過作用細胞內核因子kb(NF-kb)級聯通路來抑制免疫亢進小鼠的體內肥大細胞分泌功能來調節機體的免疫。

黃酮類中藥主要通過調節白介素和腫瘤壞死因子的分泌來調節機體免疫功能。鄭曉珂等[73]通過研究發現，從卷柏中提取的黃酮可以通過作用細胞內絲裂原活化蛋白激酶顯著抑制去卵巢大鼠體內TNF-α的表達來調節其免疫功能。補腎活血方中有槲皮素、兒茶素、淫羊藿次苷II、金絲桃苷和淫羊藿苷等5種黃酮類成分，根據孫東東等[74]研究發現，補腎活血方中槲皮素與淫羊藿苷的濃度達到100 mg/L時，可明顯抑制由脂多糖刺激的小鼠巨噬細胞內TNF-α和IL-6的表達，通過降低小鼠體內細胞因子的水平調節免疫功能，且槲皮素與淫羊藿苷的抑制能力隨著藥物濃度增加而提高。

5 總結與展望

具有免疫雙向調節作用的中藥可作用于免疫組織和器官、免疫細胞和免疫分子，通過雙向調節機體不同水平的免疫功能使機體相互作用、相互協調、相互調控，系統精確地完成對機體的免疫保護作用。多糖、苷、生物堿和黃酮成為中藥藥效物質基礎研究中一個新的切入點，不僅可用于自身免疫性疾病、超敏反應和移植排斥反應等免疫性疾病的治療，還可用于腫瘤疾病的治療。但關于中藥雙向免疫調節的研究報道不多，而且對其認識不夠全面，尚需利用多學科交叉優勢進行系統研究[75-77]。目前，中藥對免疫功能雙向調節的實驗研究廣受關注，但大量的研究還多限于動物實驗，有必要進一步進行大樣本的病例觀察結果來驗證中藥免疫調節的療效，為充分發揮中藥對免疫雙向調節相關研究提供更多的理論和臨床依據。因此在今后的工作中，應加強研究力度，開展相關機制實驗研究和臨床研究，以研制開發出更多以多糖類、苷類、生物堿類或黃酮類為主要成分的中成藥制劑服務更多患者。