大型儀器操作類培訓的實踐與探索
——以流式細胞儀為例

劉艷青 沈鏈鏈* 管強東 鐘義紅 程 潔

（南京醫科大學公共衛生學院 江蘇·南京 211166）

大型儀器在高等院校的人才培養、專業建設和學科發展中發揮了重要作用，技術與管理培訓對大型儀器使用效益的發揮具有絕對的促進作用。各高等院校和科研院所普遍意識到，在獲得國家投資的數量和連續性已經基本得到保障的基礎上，如何加強大型儀器功能的應用、拓展和開發,已是目前大型儀器管理工作中的當務之急。南京醫科大學公共衛生學院科研共享平臺是一個院內共享的儀器平臺，大型儀器專人專管，小型儀器自行刷卡使用。平臺現有包括流式細胞儀在內的多臺大型儀器，學生制備好樣本后由儀器負責人上機檢測分析。雖然學生不用親自操作儀器，但學生對流式細胞術相關知識的掌握直接關系到樣本質量，最終決定實驗結果的好壞。流式細胞術因其靈敏度高、數據客觀，在生物醫學領域被廣泛應用，但根據我平臺以往的流式細胞術相關實驗來看，很多學生在實驗設計、制備樣本的過程中存在問題，到上機檢測時才發現沒有優化實驗條件或犯了錯誤，導致實驗結果不滿意甚至實驗失敗。以往，我平臺定期請技術支持舉辦講座，主要以理論授課為主，但效果并不理想，主要表現為參與人數不多，培訓結束后的調查問卷顯示滿意度不高等。因此，本次在充分了解學生需求的基礎上，舉辦了操作培訓，由技術支持全程演示樣本制備、上機檢測、數據分析的過程，取得了較滿意的效果。

根據以往理論培訓現場的情況以及結束后的調查問卷反饋，前期的理論培訓存在以下問題：

（1）理論培訓相對枯燥。理論類的培訓相對比較枯燥、乏味，如介紹儀器原理等不結合儀器本身講解，學生很難有興趣聽講并完全理解。學生在聽講過程中容易走神，現場提問、討論等參與度不高，氣氛不佳。

（2）培訓的主題內容太寬泛。由于培訓的主題內容太寬泛，如“流式細胞儀的原理及應用”這樣的主題并不能吸引足夠多的學生來到現場。另外，在培訓的過程中，有的學生只聽了部分內容，就認定所講內容與自己的科研不相關，提前離場。

（3）某些知識點不能用理論知識很好地講解。某些知識點需要用樣本上機，結合操作能更加直觀地理解，而理論類的培訓對初學者來說很難完全接受，如流式細胞術的“調補償”等概念，即使經過理論培訓后對相關知識有所了解，也并非完全懂得“調補償”的概念以及正確準備樣本管用于調補償。

（4）重點內容不能引起足夠的重視。

如，多色實驗的配色方案在流式細胞術中尤其重要，若配色不合理，可能造成結果不滿意甚至實驗失敗。而單純的理論講解并不能引起學生足夠的重視，在后續的實驗中依然隨意配色，影響實驗結果。

因此，本次提前運用調查問卷，了解到大多數學生對流式細胞術很感興趣并且未來可能用到流式細胞術，但對于多色實驗如何配色，如何處理血樣（或組織樣本），如何進行胞內染色、為何以及如何調補償，如何分析實驗數據等問題有疑問且有強烈的學習欲望。

為了滿足學生的上述需求，擬定了本次操作培訓的基本方案：演示一個完整的實驗（調節性T細胞流式檢測），采用小鼠血液為樣本，經過裂解紅細胞、表面染色，固定破膜，胞內染色，上機檢測，數據分析等完整的實驗步驟，讓學生對流式細胞術的應用有完整、清晰的了解。并且為了直觀地演示流式多色實驗的配色方案的重要性，本次培訓設計了兩種配色方案（相對較好、相對較差的配色方案）。設計培訓滿意度調查問卷，培訓結束后讓學生填寫問卷。

培訓當天來到現場的學生比以往的理論培訓人數多。技術支持詳細演示、講解了全部步驟，并且由于有些步驟等待時間比較長，在等待的時間解釋了原理及注意事項，并回答了同學的提問，現場氣氛異常熱烈。不同配色方案的樣本用流式細胞儀上機檢測后發現，較好的方案比較差的方案獲得了更漂亮的結果。對于剛接觸流式細胞術的同學來說，對于流式細胞術的難點，有了明確的認識，而不會像純理論培訓那樣聽得一知半解。培訓結束后的調查問卷顯示：幾乎所有學生對本次培訓都非常滿意，能完全聽懂培訓的內容，對流式細胞術的基本原理、應用及為何、如何調補償等知識點有了清晰的認識。

流式細胞儀屬于科研儀器中較貴的儀器，大多數高校或研究單位都實行專人專管的制度。但為了保證樣本質量，對學生進行相關的培訓也很重要。現總結本次培訓的經驗如下：

（1）培訓前充分了解學生的需求。以往的理論培訓結束后的調查問卷顯示：學生對相關知識有學習的需求，包括流式細胞儀的原理是什么，有哪些應用，樣本該如何制備等等，但是純理論的培訓并不能形象、直觀地讓學生聽明白所有知識點。因此綜合學生的意見和建議，本次培訓設計了一次操作培訓，完整地演示所有步驟，在樣本制備階段的等待間隙講解關鍵步驟的原理、注意事項，在上機前講解儀器的工作原理以及注意事項等，在上機檢測時講解調補償，數據分析等，讓學生學習相關知識更加形象、具體。

（2）采用經典實驗進行演示。演示所用的經典實驗涉及了流式多色實驗的關鍵步驟（如裂解紅細胞，標記抗體，固定破膜，調補償等），這些關鍵步驟有許多注意事項，若處理不好，直接影響實驗結果。這些知識的掌握對開展多色實驗至關重要，因此深受學生好評。

（3）兩種配色方案演示不同配色方案對實驗結果的影響。以往的理論培訓曾多次強調，多色實驗的配色方案至關重要，搭配不合理直接影響實驗結果，但依然不能引起學生足夠的重視。因此本次為同一實驗設計了兩種配色方案，上機檢測后看到了兩種配色方案的結果的差異，讓學生自覺地、直觀地得出“配色很重要”這樣的觀念，比理論培訓反復強調的效果好得多。

（4）由學生親自上機操作。由技術支持演示樣本上機檢測、數據分析后，在儀器負責人及技術支持的指導下，現場邀請了幾名有興趣的學生親自上機，讓他們了解儀器如何進樣，如何“設門”，如何“調補償”，如何分析數據等，取得了很好的效果。

（5）現場氣氛輕松、活躍。以往的理論培訓，均在會議室或教室舉行，講解者站在講臺，參與者坐在座位，反倒形成了嚴肅的氣氛，不利于大家提問、討論。本次操作培訓由于現場制作樣本，需要用到儀器、設備等，所以在實驗室完成。雖然在實驗室進行培訓有各種缺陷，但從培訓效果來看，大家積極提問、交流，甚至主動上前近距離觀看操作，反而營造了很好的氛圍。

總的來說，本次培訓取得了令人滿意的結果，學生反饋很好，在以后的工作中，可以借鑒本次的經驗繼續開展此類的培訓工作。當然，本次培訓也有有待提高的地方，在日后的工作中有待改進。例如，有一名學生在調查問卷反映：如能將所有學生分組（以三、四個人為一組），各組之間的實驗內容不完全一樣（例如A組完成配色方案一，B組完成配色方案二，或者A組完成血液樣本的制備，B組完成組織樣本的制備，等），在技術支持的指導下完成樣本制備并上機檢測，最后各組派一名代表對本組的實驗進行總結、討論心得體會等，效果會更好。

高校的儀器平臺是比較特殊的部門，一般都不直接參與教學，但作為大型儀器的負責人，不僅要提高自身的實驗技能，也要想盡辦法提高學生對相關知識的了解程度，盡量讓學生做實驗時避免走彎路，造成時間、財力的浪費。因此，在平時工作中，應當想方設法提高研究生的綜合素質，利用現代大型精密儀器來提高科研水平，切實提高儀器平臺的科研產出率，為我國科研事業做出最大的貢獻。