中國熱科院生物所發表新型分子克隆系統

日前，中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所言普副研究員等人經過多年研究，開發了一種新型的標準化分子克隆技術——Nimble Cloning。該技術能將目標DNA通過一步反應直接克隆到環狀目標載體。該技術以《NimbleCloning:ASimple,Versatile,andEfficientSystemforStandardizedMolecularCloning》為題發表在國際期刊FrontiersinBioengineeringandBiotechnology。

Nimble Cloning技術集成了目前幾種克隆技術的優點，并較好的解決了它們的不足之處。優點：一是直接將DNA克隆到環狀載體，避免了載體的線性化酶切和回收等步驟，簡化了實驗操作，提高了克隆效率。二是使用靈活，用途廣泛。PCR產物和環狀質粒上的DNA(入門克隆)均可克隆到目標載體，并且可用于單片段、多片段和多位點等多種形式的克隆。三是可靈活用于標準化克隆和無縫克隆?；蚣訋ㄓ媒宇^序列后可克隆到系統任何一個載體，形成一個標準化的克隆系統。如有不使用通用接頭序列的無縫克隆要求，只需將目標基因與載體的重疊序列設計在通用接頭的外圍，通用接頭可在克隆反應中消除，在不改變載體的情況下實現無縫克隆。