高效液相色譜法測定緩釋氮肥草酰胺的含量

楊孝智，賀婷婷，梁 鵬

(江蘇金聚合金材料有限公司 江蘇丹陽 212300)

草酰胺分子式為(CONH2)2，是以煤制合成氣為原料，通過氣體分離凈化、酯化、偶聯、氨化工序制取[1]。草酰胺是含氮質量分數31.8%的白色粉末，其氮素利用率高達65%～80%，是尿素的2倍，且微溶于水，用草酰胺代替尿素作為氮肥施用，在潮濕的土壤中受微生物作用和自身水解作用逐步釋放出易于被植物吸收的氨[2]，可大幅減少氮肥的浪費和損失，以達到節約資源、保護環境的目的。作為一種新型緩釋氮肥，目前關于草酰胺含量分析檢測方法研究得較少。筆者通過試驗建立了一種快速穩定分析草酰胺含量的高效液相色譜法，以期為草酰胺緩釋氮肥的推廣和研究提供理論和技術支撐。

1 主要儀器和試劑

主要儀器：島津高效液相色譜儀，LC-20AT；高速中藥粉碎機，XRB-500，吉首市中湘制藥機械廠；電子天平，FA2004，上海上平儀器公司；超聲波清洗器，KQ3200DE，昆山超聲儀器有限公司；GWA-UN-F10型超純水機、TU-1810型分光光度計，北京普析通用儀器有限公司。

主要試劑：草酰胺標準品，質量分數99%，麥考林；甲醇、乙腈，HPLC級，國藥集團化學試劑有限公司；磷酸二氫鈉、磷酸、硫酸，AR，國藥集團化學試劑有限公司；草酰胺樣品，江蘇金聚合金材料有限公司。

標準品制備：稱取(10±2)mg草酰胺于容量瓶中，在常溫下用水溶解，定容至100 mL，搖勻，1 mL此溶液含草酰胺0.1 mg，作為儲備液。按外標法要求，分別配制不同質量濃度的標準溶液。

2 測試條件

高效液相色譜檢測條件：色譜柱為InertSustain C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)；流動相為乙腈+水(含硫酸質量分數0.1%)，乙腈與水體積比為1∶19；流速為0.8 mL/min；檢測波長205 nm；柱溫25 ℃；進樣量20 μL。

3 結果與討論

3.1 檢測波長的選擇

取一定量草酰胺儲備液，用水稀釋至質量濃度20.0 μg/mL，以水為空白，用分光光度計掃描，掃描波長范圍190～800 nm。綜合考慮樣品響應及干擾組分的影響，選擇205 nm作為檢測波長。

3.2 標準曲線的繪制

用流動相配制質量濃度分別為1、2、10、15和20 μg/mL的草酰胺系列標準溶液，按測試條件依次測出峰面積作為因變量，以草酰胺質量濃度作為自變量，繪制得到如圖1所示的標準工作曲線，其回歸方程為y=22 344x-3 255，相關系數R2=0.999 86，說明曲線的線性良好。

圖1 草酰胺標準工作曲線

3.3 回收率和精密度測試

取相同草酰胺樣品，加入不同量的草酰胺標準溶液，其余按分析步驟操作，將得到的峰面積代入線性回歸方程計算相應的回收率，結果(表1)表明回收率在98.5%～101.4%。對樣品進行精密度試驗，進樣標樣的草酰胺質量濃度為10 μg/mL，重復進樣測量3次，3次測定結果分別為9.86、9.88和9.93，RSD為0.36%。

表1 高效液相色譜法測定草酰胺含量的精密度及加標回收率

3.4 樣品含量測試

按照上述測定方法進行草酰胺樣品檢測，草酰胺樣品出峰如圖2所示。將峰面積代入線性回歸方程，結果表明該樣品含草酰胺質量分數大于98%。

圖2 草酰胺樣品色譜圖

4 結語

利用高效液相色譜分析技術，建立了草酰胺標準工作曲線，其相關系數R2為0.999 86，說明線性關系良好。通過加標回收率試驗及精密度試驗，結果加標回收率為98.5%～101.4%，相對標準偏差為0.36%，表明該方法具有較高的回收率及精密度，能準確地對草酰胺產品進行定量分析，方法切實可行。