多花黃精組培苗瓶內(nèi)生根培養(yǎng)基優(yōu)化及縮短育苗周期的方法①

饒寶蓉

(福建省南平市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 福建建陽354200)

多花黃精（Polygonatum cyrtonema）屬百合科（Liliaceae）黃精屬（Polygonatum）的多年生草本植物。據(jù)《名醫(yī)別錄》記載，黃精具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤肺、益腎的功效，常用于脾虛胃弱、體倦乏力、口干食少、肺虛燥咳、精血不足、內(nèi)熱消渴的治療［1]。《中國藥典》規(guī)定，作為黃精藥用的3 種原生藥是黃精（P.sibircumRed）、多花黃精（P. cyrtonemaHua）和滇黃精（P.kingianumColl．Et Hem s1）［2]。多花黃精是黃精中的優(yōu)質(zhì)品種。隨著市場對多花黃精需求量的增加，多花黃精野生資源日益匱乏，難以滿足需求，于是近年來多花黃精的人工栽培量也逐漸增加。

早在2003年，徐紅梅等［3]就開展了生長調(diào)節(jié)劑對多花黃精芽體外發(fā)生過程性狀的影響研究。2010年后，針對多花黃精的組織培養(yǎng)和快速擴(kuò)繁的研究報(bào)道逐漸增多［4-9]，這些研究主要集中在芽的分化誘導(dǎo)和生根培養(yǎng)等方面，以期篩選出各階段最適培養(yǎng)基配方，多花黃精組培苗瓶內(nèi)擴(kuò)繁的研究也日趨成熟。但組培苗移栽種植過程中的問題也逐漸暴露，如組培苗的抗病性差，成活率不高，塊莖容易腐爛，出苗時(shí)間長等等。目前組培苗能否順利從組培室轉(zhuǎn)移到大田，最終移栽到林下，這是多花黃精組培苗能否實(shí)現(xiàn)工廠化育苗的關(guān)鍵技術(shù)之一。在栽培技術(shù)上的研究主要集中在根莖繁殖、根莖和林地的選擇［10]、根莖生長特性［11]、根莖的擺放［12]以及林下套種［13]等方面。關(guān)于多花黃精的組培苗在移栽成活技術(shù)方面的研究報(bào)道甚少。因此，筆者針對多花黃精組培苗移栽種植過程中出現(xiàn)的問題，如塊莖容易腐爛，出苗時(shí)間長，成活率不高等開展研究，以期為多花黃精的保存和資源開發(fā)提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)于2018年在福建省南平市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所組培室及基地大棚進(jìn)行。試驗(yàn)材料源于福建省南平市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所組培室的多花黃精組培苗，且為在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)的繼代苗。

1.2 方法

1.2.1 生根培養(yǎng)基制備

基本營養(yǎng)液：MS＋0.3 mg/L NAA＋20 g/L蔗糖；

CK：基本營養(yǎng)液＋7.6 g/L 卡拉膠，pH 5.8，120 mL/瓶（常規(guī)生根培養(yǎng)基）；

A1：基本營養(yǎng)液＋濾紙（1～2 層），pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養(yǎng)基）；

A2：基本營養(yǎng)液＋紗布，pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養(yǎng)基）；

A3：基本營養(yǎng)液＋河沙（1 cm 厚），pH 5.8，12 mL/瓶（淺層液體培養(yǎng)基）。

類似A1、A2 這種淺層液體培養(yǎng)在馬鈴薯、草莓、甘薯、香蕉、野生薄荷、藍(lán)莓、生姜等幾種作物試管苗快繁以及食用菌菌種制備上的應(yīng)用已有報(bào)道［14-22]。將4種培養(yǎng)基準(zhǔn)備好后，進(jìn)行121℃、131 kPa、22 min滅菌。放置72 h確認(rèn)無污染。

1.2.2 接種培養(yǎng)

將增殖培養(yǎng)18 d 左右的莖切成帶1～2 個(gè)芽的小塊莖轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中，每瓶接8小塊。

接種后置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30 d 后，開始觀察生根情況，60 d后統(tǒng)計(jì)根數(shù)、根長和根粗。培養(yǎng)條件：光照強(qiáng)度1500～2500 lx，時(shí)間11 h/d，恒溫（25±2）℃。

1.2.3 移栽試驗(yàn)設(shè)計(jì)

將已生根多花黃精塊莖進(jìn)行2～4℃低溫冷藏，分別冷藏30 d（B1）60 d（B2）90 d（B3），以未冷藏為CK，探究塊莖的出土?xí)r間與成活率，至移栽開始跟蹤觀察出土?xí)r間，120 d后開始評價(jià)整齊度，統(tǒng)計(jì)成活率與新根數(shù)。

移栽前剪去塊莖上的葉子，將塊莖不同深度的放置于土壤中，以塊莖的一芽頭離土表的高度為準(zhǔn)，分別放置深度為3、2、0 cm，移栽180 d 后開始統(tǒng)計(jì)成活率，株高，葉片數(shù)。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2000、JMP 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對多花黃精塊莖生根的影響

不同培養(yǎng)基對多花黃精塊莖生根的影響見表1。從表1 可以看出，開始長根的時(shí)間CK＞A3＞A2＞A1，以紗布為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A2）最短，濾紙為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A1）次之，卡拉膠為凝固劑的常規(guī)培養(yǎng)基（CK）最長，但各處理均未達(dá)到顯著性差異。生條根數(shù)為卡拉膠為凝固劑的常規(guī)培養(yǎng)基（CK）＞濾紙為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A1）＞紗布為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A2）＞沙子為固著物的培養(yǎng)基（A3），CK、A1、A2 三者差異不顯著，A3 顯著性小于A1、CK。根長仍然是以卡拉膠為凝固劑的常規(guī)培養(yǎng)基（CK）最長，與以濾紙為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A1）差異不顯著，但兩者顯著性高于以沙子為固著物的培養(yǎng)基（A3）。以沙子為固著物的培養(yǎng)基（A3）的根最粗，為0.58 mm，其次為紗布為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A2），再次為濾紙為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基（A1），卡拉膠為凝固劑的常規(guī)培養(yǎng)基（CK）的最細(xì)，A3 顯著高于CK、A1、A2，CK、A1、A2三者間的差異不顯著。

表1 不同培養(yǎng)基對多花黃精塊莖生根的影響

2.2 不同低溫冷藏時(shí)間對多花黃精塊莖移栽出土?xí)r間與成活率的影響

從表2上可知，不同的低溫冷藏時(shí)間對多花黃精組培苗的出土?xí)r間有較大的影響，其中冷藏60 d（B2），冷藏90 d（B3）的出土?xí)r間大大降低，顯著低于未冷藏（CK）和冷藏30 d（B1）。幾種處理成活率差異不顯著。整齊度也以冷藏時(shí)間長的為好。冷藏的時(shí)間越長，成活率略有下降，但差異不顯著，新根數(shù)有一定的降低。總的來說，冷藏90 d的（B3） 多花黃精組培苗出土?xí)r間短，整齊度高。

表2 不同低溫冷藏時(shí)間對多花黃精塊莖移栽出土?xí)r間與成活率的影響

2.3 種植深淺度對移栽成活的影響

從表3可以看出組，培苗塊莖放置的深度對多花黃精成活率有較大的影響，隨著芽頭離表土面越深，成活率越低，離土表3 cm 的成活率為73%，離土表2 cm 的成活率80%，離土表1 cm 的成活率90%，3 處理達(dá)到顯著性的差異；株高也以深度大的為低，塊莖頂芽離土表3 cm 的，6 個(gè)月后株高能達(dá)到5.8 cm，塊莖頂芽離土表2 cm 的，6 個(gè)月后株高能達(dá)到7.67 cm，塊莖頂芽離土表0 cm 的，6 個(gè)月后株高能達(dá)到9.08 cm，三者達(dá)到顯著性差異。葉片數(shù)與成活率、株高的趨勢相同但未達(dá)到顯著性差異。從結(jié)果可知淺植更有利于多花黃精組培塊莖的生長。

表3 種植深淺度對移栽成活的影響

3 討論與結(jié)論

組培苗移栽種植前的清洗環(huán)節(jié)很關(guān)鍵，一旦粗心馬虎，苗很容易受損，特別是針對多花黃精組培苗的塊莖移栽種植發(fā)現(xiàn)塊莖容易腐爛的現(xiàn)象，進(jìn)行了幾種塊莖生根的培養(yǎng)基試驗(yàn)，比較了多花黃精組培苗幾種生根方法的效果，結(jié)果表明，以卡拉膠為原料使其固化的瓶內(nèi)固體生根培養(yǎng)基成本最高、生根效果一般，生根時(shí)間長，根系較為細(xì)長，而以濾紙、紗布，沙子替代卡拉膠的培養(yǎng)基培養(yǎng)的根系粗度逐漸加粗，長度縮短，以沙子為固著物的根系最粗，是較為理想的生根基質(zhì)。以卡拉膠為凝固劑的培養(yǎng)基存在洗苗難，根系易受損，特別是多花黃精塊莖有很多的折痕縫隙特點(diǎn)，很容易夾藏膠狀培養(yǎng)基，難清洗，一旦未清洗凈塊莖表面很容易滋生細(xì)菌，造成塊莖腐爛。以濾紙和紗布為固著物的瓶內(nèi)淺層液體培養(yǎng)基生根能大大減輕洗苗的困難，清洗簡單，節(jié)約成本且移栽長勢上均優(yōu)于以卡拉膠為凝固劑的培養(yǎng)基，這與胡楠［23]、謝君鋒［24]、朱勤［25]、王星［26]、譚體瓊等［27]分別在魔芋、甘蔗、甘薯、香蕉、馬鈴薯等作物上的研究結(jié)果相似，但是以紗布為固著物的培養(yǎng)基根系會穿過紗布纏繞在紗布上，取紗布時(shí)易造成斷根，濾紙又較為薄，根系沒有向下生長的空間，導(dǎo)致根系較為細(xì)長而盤旋在培養(yǎng)瓶底部，須根少，而用沙子作為固著物能彌補(bǔ)這些不足，不僅無需洗苗，根系還有足夠生長的空間，根系粗壯，須根多，這不僅減少了傷苗、傷根的機(jī)率，同時(shí)降低了組培苗生產(chǎn)成本，增加了經(jīng)濟(jì)效益，是值得推薦的效果較好的生根方法。

多花黃精組培苗移栽存在出苗率低、出苗時(shí)間不統(tǒng)一，甚至不出苗的現(xiàn)象，這嚴(yán)重阻礙了多花黃精的生長，不利于種苗的種植管理與批量銷售以及多花黃精的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。以2～4℃低溫冷藏70～80 d 大大縮短了多花黃精出土的時(shí)間，縮短塊莖的休眠期，較好地解決了以上問題。雖然隨著冷藏時(shí)間的增加，成活率會略有所下降，但差異并不顯著，并且整齊度大大提高，有利于育苗公司種苗的管理與運(yùn)營。試驗(yàn)結(jié)果還可以看出，組培苗塊莖放置的深度對多花黃精成活率有較大的影響，不宜種植太深，越深成活率越低，以根系掩蓋好，塊莖的芽頭以露土為佳，這與塊莖的通氣有關(guān)，通氣好，雜菌滋生其塊莖上的少，不宜腐爛，成活率高。