黃芩聯合莫匹羅星治療慢性創面的應用研究

王麗華，劉之川

重慶醫科大學附屬第二醫院急救部，重慶 400010

細菌生物膜（Biofilm，BF）是導致抗生素無法發揮作用的重要因素，因此清除創面BF是當前慢性創面治療和研究的重點和難點[1]。體外研究表明，黃芩可能通過抑制BF的生成，提高抗菌藥物的敏感性，而金黃色葡萄球菌為慢性難愈創面的優勢菌[2]。因此，該研究于2016年7月—2019年3月取健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，通過建立金黃色葡萄球菌生物膜致病的慢性創面動物模型進行相關實驗，評價黃芩聯合莫匹羅星對慢性創面金葡菌BF的清除作用和促進創面愈合作用，并探討其可能的作用機理，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，體重168～245 g，平均（203.45±22.16）g，購置于重慶醫科大學實驗動物中心。

1.2 方法

①制備金黃色葡萄球菌（ATCC25933）標準菌液[3]。

②建立動物造模。健康雄性清潔級Wistar大鼠112只，制成大鼠金黃色葡萄球菌生物膜慢性創面模型，采用掃描電鏡觀察創面BF形態[4]。

③分組及處理。造模成功后行隨機分為A、B、C、D 4組，每組28只。A組用浸有 l mL黃芩+莫匹羅星混合液換藥；B組用浸有l mL黃芩液換藥；C組用浸有l mL莫匹羅星液換藥；D組用浸有l mL生理鹽水換藥。各組大鼠換藥后，均用三層無菌紗布覆蓋，外套自制鋼絲網罩固定，同樣方法每日換藥1次[5]。

1.3 觀察指標

1.3.1 創面愈合時間即用藥起至創面完全愈合所需時間[6]。

1.3.2 創面愈合率 于用藥后第 1、4、7、10、14、21 及 28 天，測定各組創面愈合率，創面愈合率=（大鼠造模時創面面積-用藥后第n天創面面積）/造模時創面面積×100%[7]。

1.3.3 創面組織細菌性檢測 于用藥后第 1、4、7、10、14、21及28天，同時各組隨機選取 4只大鼠處死，取痂下組織行菌量測定[8]。

1.4 統計方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對實驗數據進行統計分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，用t檢驗，計數資料以[n(%)]表示，用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 創面愈合時間

在平均創面愈合時間上，A組短于B組、C組、D組（t=7.384、6.935、8.556，P＜0.05）；B 組、C 組短于 D 組 （t=7.305、7.552，P＜0.05）。 見表 1。

表 1 4 組大鼠創面愈合時間比較[（±s），d]

表 1 4 組大鼠創面愈合時間比較[（±s），d]

組別創面愈合時間A（n=28）14.27±1.55 B（n=28）19.85±1.86 C（n=28）19.92±1.74 D（n=28）24.17±1.52

2.2 創面愈合率

在用藥后第4、7、10及14天，在平均創面愈合率上，A 組大于 B 組、C 組、D 組 （t=7.375、8.225、7.112，P＜0.05），B 組、C 組大于 D 組（t=7.204、7.114，P＜0.05）。 見表 2。

表2 用藥后不同時間段4組大鼠創面愈合率比較（±s）

表2 用藥后不同時間段4組大鼠創面愈合率比較（±s）

組別 第1天 第4天 第7天 第10天 第14天 第21天 第28天A（n=28）8.43±0.2432.15±3.1647.26±4.2173.21±6.2095.24±8.15100100 B（n=28）8.26±0.2620.18±2.1120.52±2.3550.63±7.3172.18±6.3396.38±2.1998.45±1.12 C（n=28）8.41±0.3321.04±2.0621.56±2.4152.35±8.1471.56±5.9195.67±2.3598.32±1.06 D（n=28）8.19±0.2615.47±1.1814.67±1.6834.26±2.6650.46±3.8190.27±3.5497.23±1.15

2.3 創面組織細菌性檢測

在用藥后第4、7、10、14天，在平均創面痂下組織菌量上，A 組小于 B 組、C 組、D 組 （t=8.284、7.551、8.112，P＜0.05），且 B 組、C 組小于 D 組（t=7.025、7.437，P＜0.05）。 見表3。

表3 用藥后不同時間段4組大鼠創面組織細菌性檢測結果比較（±s）

表3 用藥后不同時間段4組大鼠創面組織細菌性檢測結果比較（±s）

組別 第1天 第4天 第7天 第10天 第14天 第21天 第28天A（n=28）3.41±0.384.15±0.263.66±0.312.90±0.152.43±0.171.83±0.151.75±0.12 B（n=28）3.37±0.355.12±0.284.71±0.273.76±0.183.42±0.192.20±0.151.92±0.14 C（n=28）3.40±0.325.15±0.254.55±0.293.77±0.183.45±0.172.18±0.161.94±0.16 D（n=28）3.36±0.365.20±0.315.72±0.304.41±0.234.14±0.232.20±0.192.03±0.15

3 討論

①該研究結果顯示，在用藥后第4、7、10、14天，A組平均創面痂下組織菌量 （4.15±0.26）、（3.66±0.31）、（2.90±0.15）、（2.43±0.17）小于 B 組、C 組、D 組（P＜0.05）。 黃芩可抑制BF的形成[9]，莫匹羅星為局部外用抗生素，二者聯合可有效提高莫匹羅星的抗菌活性，進而提高抗菌效果[10]。

②該研究結果顯示，在平均創面愈合時間上，A組(14.27±1.55)d 短于 B 組(19.85±1.86)d、C 組(19.92±1.74)d、D組(24.17±1.52)d（P＜0.05）；在用藥后第 4、7、10 及 14 天，A組平均創面愈合率 （32.15±3.16）、（47.26±4.21）、（73.21±6.20）、（95.24±8.15）大于 B 組、C 組、D 組（P＜0.05），即黃芩聯合莫匹羅星治療慢性創面可有效提高創面愈合率，縮短創面愈合時間，進而在整體上提高創面愈合療效[11-12]。沈胡剛等[13]探討了黃芩油膏對增生性瘢痕點陣二氧化碳激光治療后創面修復的療效，治療組采用黃芩油膏涂抹創面，對照組采用金霉素眼膏涂抹創面，結果證實治療組患者的疼痛指數（1.16±0.32）、最后的創面愈合時間（8.23±2.78）、溫哥華瘢痕量表評分（2.23±1.38）明顯優于對照組（P＜0.05），與該研究結果一致。

綜上所述，黃芩聯合莫匹羅星治療慢性創面可有效減少創面痂下組織菌量，進而提高創面愈合率，加快創面愈合進程，提高整體療效。