海南野生鷓鴣茶資源調查與鑒定評價

顧文亮 莊輝發 王輝 張建禹 覃永蘭 張翠玲 秦曉威 譚樂和

摘 ?要 ?鷓鴣茶是具有海南地方和民族特色的代茶飲料植物和藥用植物，已開發成為廣受歡迎的特色旅游產品，但大規模的人為無序開發對野生資源造成了極大的破壞。通過對海南野生鷓鴣茶進行資源調查、收集保存和保護利用等研究，結果表明：在海南全省10個市縣共13個調查地點中，僅2個地點的野生鷓鴣茶基本未受到人工影響，其余地點的野生植株長勢較弱，人為破壞較嚴重，部分生境已受到人工開墾的影響;先后收集保存285份鷓鴣茶種質資源，并在異地建設種質資源圃安全保存;對收集保存的285份資源進行5個描述性狀和6個數值性狀的植物學鑒定評價，其中描述性狀的多樣性指數的變化范圍為0.69～1.74，數值性狀的多樣性指數的變化范圍為1.93～2.11，說明收集保存的鷓鴣茶種質具有豐富的遺傳多樣性。本研究可為人工培育優良鷓鴣茶無性品系提供了資源基礎和評價數據。

關鍵詞 ?鷓鴣茶;資源調查;收集保存;遺傳多樣性

中圖分類號 ?S326 ? ? ?文獻標識碼 ?A

Abstract ?Mallotus oblongifolius is a substitute tea beverage plant and medicinal plant with local and national characteristics in Hainan. It has been developed as a popular tourism product now. But large-scale development and utilization of wild Mallotus oblongifolius without plan has caused great damage to its germplasm resources. Wild resources investigation， collection and conservation as well as evaluation of M. oblongifolius were carried out in this research. The results showed that among the 13 survey locations in 10 cities of Hainan， wild M. oblongifolius grown in only 2 locations were not artificially affected. The growth of M. oblongifolius in the other sites were destructed artificially. Total 285 germplasm resources of M. oblongifolius were collected and safely preserved in different places. Botanical identification and evaluation of 5 descriptive traits and 6 numerical traits were carried out on these 285 germplasm resources. The variation range of diversity index of descriptive traits was 0.69～1.74 and the variation range of diversity index of numerical traits was 1.93～2.11， which indicating that the collected and preserved germplasms had rich genetic diversity. This research would provide resource basis and evaluation data for artificial breeding of excellent M. oblongifolius cultivars.

Keywords ?Mallotus oblongifolius （Miq.） Müll. Arg; resources investigation; collection and conservation; genetic diversity

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.11.023

鷓鴣茶[Mallotus oblongifolius （Miq.） Müll. Arg]是大戟科（Euphorbiaceae）野桐屬的多年生常綠灌木或小喬木[1]。鷓鴣茶又名山苦茶和五月茶，是深受海南當地百姓喜愛的特色地方茶，在海口、文昌、瓊海、萬寧、陵水、三亞、瓊中、保亭、五指山、樂東和東方等地均有野生植株分布[2]。據文獻記載，鷓鴣茶在我國廣東、廣西等省（自治區），以及中印半島和蘇門答臘島等國也有分布，但未見有作為特色茶飲用的記錄[3]。鷓鴣茶葉片曬干或風干后具有零陵香氣，沖泡飲用時有淡淡的藥香味[4]，海南當地人常將其用做解油膩、助消化、清熱消暑和止渴生津的老爸茶。鷓鴣茶富含茶多糖、茶多酚、沒食子酸和多酚類等多種有效成分[5]，具有清除氧自由基[6]、抗動脈粥樣硬化[7]、促進膽汁分泌[8]、抑制病菌活性[9]、抗疲勞衰老[10]與鎮靜止痛[11]等功效。當前，海南地方企業將鷓鴣茶精深加工成復配茶[12]、涼茶飲料[13]或速溶茶粉[14]等產品，已成為廣受歡迎的海南特色旅游產品。

鷓鴣茶在海南已有悠久的飲用歷史，傳統上用來制茶的原料均是取自野生植株，鮮有人工種植，海南地方企業加工鷓鴣茶產品的原料亦是完全依賴野生資源。近年來，隨著海南自由貿易區（港）的持續建設和鷓鴣茶加工產業的發展壯大，長期的人工無序采摘對野生鷓鴣茶資源造成了嚴重的破壞，大規模的山林地開發也對其生境產生了較大的影響，對鷓鴣茶種質資源進行收集保存和創新利用是解決當前問題的唯一途徑。本研究旨在通過對海南野生鷓鴣茶開展資源調查、收集保存和保護利用等方面的工作，摸清野生鷓鴣茶的生長狀況，同時在異地建設種質資源圃保存野生鷓鴣茶資源，并對收集保存的野生鷓鴣茶資源進行植物學性狀的鑒定評價，為人工培育優良鷓鴣茶無性品系提供了資源基礎和評價數據。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

供試鷓鴣茶來源于海南全島各市縣資源調查中發現的野生植株，收集的枝條通過扦插繁育成苗[15]，經統一編號后定植于種質資源圃中，用于植物學鑒定評價的試驗材料均采自種質資源圃內收集保存的種質。

1.2 ?方法

1.2.1 ?資源調查方法 ?對海南多個市縣進行野生鷓鴣茶的資源調查，拍照記錄野生植株，并詳細記錄其生長情況、生物學特征和生態習性。同時，詳細記錄調查地點的優勢植物種類、生長情況和分布類別，并拍照記錄植株主要特征。優勢植物種類鑒定為利用照片對比等方法，參考相關資料對植物種類進行鑒定和歸屬[16]。

1.2.2 ?種質保存方法 ?將采集鷓鴣茶植株的健康枝條經扦插繁育后成苗，成苗的植株經統一編號后定植于中國熱帶農業科學院香料飲料研究所高龍試驗示范基地內的鷓鴣茶種質資源圃中。野生鷓鴣茶資源在種質資源圃中存活后，分別對每份資源編號并繪制田間分布圖，同時對每份資源的成熟葉片進行圖像采集。

1.2.3 ?資源評價方法 ?對鷓鴣茶資源的葉片形狀、葉片顏色、葉柄顏色、葉片鋸齒和植株性別等描述性狀和葉柄長、葉片長、葉片寬、葉片長寬比、葉片周長和葉片面積等數值性狀進行植物學的多樣性評價。每份鷓鴣茶資源隨機取3個植株，每個植株按照統一標準至少取10片成熟葉片，利用LA-S植物圖像分析儀對葉片進行數值性狀的測量;并對葉片顏色、葉片形狀和植株性別等描述性狀進行觀察記錄。

1.2.4 ?數據統計方法 ?根據香農多樣性指數（Shannon's diversity index）的分析方法，人為將描述性狀按照1～6級賦值進行記錄，描述性狀根據平均值（X）和標準差（δ）分為10級，1級

2 ?結果與分析

2.1 ?資源調查

2.1.1 ?野生資源調查 ?從2015年1月至2018年1月，前往海南省海口、瓊中、萬寧、保亭、定安、瓊海、東方、白沙、樂東和陵水等10個市縣進行野生鷓鴣茶的資源調查，每個調查地點至少考察2個以上野生居群，共計在10個市縣的不同

地域采集285份鷓鴣茶資源（表1）。在13個調查地點中，僅2個地點的野生鷓鴣茶植株健壯，生長良好，基本未受到人工影響，占比15.38%;8個地點的野生鷓鴣茶植株瘦弱矮小，有枯枝葉，長勢較弱，受到較嚴重的人為采摘影響，占比61.54%;3個地點的野生鷓鴣茶植株營養狀態較差，少有綠葉，人為破壞嚴重，占比23.08%。

2.1.2 ?野生生境調查 ?資源調查的野生鷓鴣茶分布在海拔50～500 m之間的生境中，野生生境中以巖石居多，土壤以砂壤土和黃壤土為主。低海拔的野生生境中，鷓鴣茶多生長在山林緩坡地帶或溝谷巖石灘邊緣，植被較少，人為開墾較嚴重，在調查中可見檳榔（Areca catechu）、椰子（Cocos nucifera）、巴西橡膠（Hevea brasiliensis）和柊葉（Phrynium capitatum）等人工種植作物。高海拔的野生生境中，鷓鴣茶多生長在山林溝谷或叢林小溪的兩岸，生境的腐殖質積累較多，環境潮濕，植被較茂盛，生境植被多為熱帶低地雨林。根據調查，鷓鴣茶野生生境中的優勢植物共有16個科，涉及29種植物，植物名錄詳見表2。

2.2 ?異地建圃保存資源

將在10個市縣采集的285份鷓鴣茶資源的健康枝條，扦插繁育成苗后分別編號進行野生資源的異地保存，分批定植在中國熱帶農業科學院香料飲料研究所六甲基地。基地位于海南省萬寧市南橋鎮高龍村，內部建設有鷓鴣茶種質資源圃，種質圃主要用于開展鷓鴣茶種質資源的收集保存、鑒定評價、創新利用和種苗繁育等方面研究，見圖1。鷓鴣茶種質資源圃占地約0.35 hm2，每份資源定植5株，截至2018年12月，鷓鴣茶種質資源圃已保存資源285份。

2.3 ?資源的植物學性狀評價

根據對鷓鴣茶種質資源成熟葉片的圖像采集（圖2），可見在葉片的形狀、大小和顏色等方面有著較為豐富的多樣性，為便于對鷓鴣茶種質資源進行植物學性狀的鑒定評價，在描述性狀中選擇葉片顏色、葉柄顏色、植株性別、葉片鋸齒和葉片形狀等5個性狀進行評價，在數值性狀中選擇葉柄長、葉片長、葉片寬、葉片長寬比、葉片周長和葉片面積等6個性狀進行評價。

2.3.1 ?描述性狀多樣性分析 ?對285份鷓鴣茶資源的5個描述性狀進行分級和賦值，統計各個性狀的頻率并分別計算多樣性指數（表3）。根據表4可知，鷓鴣茶資源的描述性狀的多樣性指數的變化范圍為0.69～1.74，其中植株性別的多樣性指數最低（0.69），葉片顏色的多樣性指數最高（1.74）。收集保存的鷓鴣茶資源中葉片顏色、葉柄顏色和葉片鋸齒等3個性狀的多樣性指數大于1，而植株性別和葉片形狀等2個性狀的多樣性指數小于1。

根據表4可知，在收集保存的鷓鴣茶資源中，葉片顏色多為淺綠色（26.11%）、深綠色（19.87%）和綠色（18.37%）;葉柄顏色多為深綠色（29.39%）和綠色（26.63%）;葉片鋸齒多為稀（58.43%）和中（20.15%）;葉片形狀多為長圓形（67.46%）和橢圓倒卵形（19.47%）;植株性別則是雄性（56.24%）多于雌性（43.76%）。

2.3.2 ?數值性狀多樣性分析 ?對285份鷓鴣茶資源的6個數值性狀進行多樣性指數分析，根據表5可知，鷓鴣茶資源在數值性狀上存在不同的遺傳變異，變異系數介于13.04%～45.00%，其中變異系數最大的為葉片周長（45.00%），變異系數最小的為葉片長/寬（13.04%）。鷓鴣茶資源的數值性狀的多樣性指數的變化范圍為1.93～2.11，其中葉片周長的多樣性指數最低（1.93），葉片長的多樣性指數最高（2.11）。收集保存的鷓鴣茶資源中，葉片長、葉片寬、葉片長寬比和葉片面積等4個性狀的多樣性指數大于2，而葉柄長和葉片周長等2個性狀的多樣性指數小于2。

3 ?討論

鷓鴣茶是助推海南島區域經濟發展的特色飲料植物，已經被加工企業開發成為多種特色旅游產品，鷓鴣茶產業也發展成為帶動海南農民脫貧致富的特色產業之一。但長期以來，對鷓鴣茶野生資源的過度利用導致其種質資源受到嚴重破壞，林海等[18]在1992年指出海南沿海山丘野生鷓鴣茶資源破壞十分嚴重，數量急劇減少;劉國民等[19]在2007年發現野生鷓鴣茶資源日趨減少的局面非但沒有得到緩解，反而有所加劇;楊虎彪等[20]在2017年對鷓鴣茶的生態學特性研究中亦指出海南東部沿海的野生鷓鴣茶居群退化十分嚴重，過度采摘導致自然居群快速衰退。這說明對鷓鴣茶資源的全面保護已經到了刻不容緩的程度，如不采取有效措施對野生資源進行保護，部分性狀優良的資源一旦消失將使得珍稀的遺傳資源無法復原。

針對鷓鴣茶種質資源急劇減少、許多優異種質瀕臨消失的問題，國內有關科研人員開展了鷓鴣茶種質資源保存和人工馴化等方面的研究。李娟玲等[21]在2010年以保存在海南大學苦丁茶研究所內的10個鷓鴣茶居群的種質材料進行ISSR標記的引物篩選，供試的種質材料主要來自于萬寧、三亞、文昌和保亭等4個市縣;楊虎彪等[22]在2017年對幼齡期鷓鴣茶的需光生理特性進行研究，以期為人工馴化栽培奠定基礎。本研究始于2015年，先后在3年多的時間內對海口、瓊中、萬寧、保亭、定安、瓊海、東方、白沙、樂東和陵水等全省10個市縣共13個地點進行系統的鷓鴣茶野外資源調查，同時將收集285份種質資源安全保存在鷓鴣茶種質資源圃中。同時，本研究還對285份鷓鴣茶種質資源開展了5個描述性狀和6個數值性狀的植物學鑒定評價，其中描述性狀的多樣性指數的變化范圍為0.69～1.74，數值性狀的多樣性指數的變化范圍為1.93～2.11，這說明本研究收集保存的鷓鴣茶種質具有豐富的遺傳多樣性。筆者認為下一步應當實施鷓鴣茶資源的異地保存和原生境保護相結合的策略，并進一步加快種質資源的收集保存、鑒定評價與開發利用研究，選育出優良鷓鴣茶無性品系并進行規模化的商業種植，從而使得海南鷓鴣茶產業真正實現可持續發展。

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