北疆某規模化羊場綿羊肺炎支原體感染的血清流行病學調查

張莉，魏殿華，齊亞銀

（石河子大學動物科技學院 新疆石河子 832000）

綿羊肺炎支原體（MO）的感染又稱綿羊傳染性胸膜肺炎，MO 是一種介于細菌與病毒之間的無細胞壁結構的原核微生物，國外1963 年首次從患間質性肺炎的綿羊中分離得到該病原，我國于1979 年首次從患肺炎的綿羊肺臟中分離得到該病原。該病主要引起綿羊的一種以咳嗽、喘氣、漸進性消瘦以及肺間質的增生性炎癥為主要特征的慢性呼吸道傳染病。近年來，綿羊肺炎支原體的感染在我國主要綿羊養殖區，例如河北、山西、內蒙古、甘肅、寧夏、新疆等地區頻繁發生，給我國養羊業帶來極大的危害，且嚴重阻礙了我國養羊業的健康持續發展[1,2]。

免疫接種是控制綿羊支原體肺炎的重要手段之一，但目前尚無商品化疫苗，臨床生產中主要依靠環境控制和藥物治療來控制該病的發生，而且臨床生產中經常會出現綿羊肺炎支原體和其他細菌的混合感染，增加了科學防控該病的難度[3,4]。前期調研發現，北疆某規模化羊場存在疑似綿羊肺炎支原體的感染，各種年齡階段的羊只均有零星咳嗽，體溫輕度升高，腹式呼吸比較明顯，為了查明是否存在綿羊肺炎支原體的感染及程度，本試驗采集不同日齡的血液，分離血清，選擇綿羊肺炎支原體抗體和抗原檢測ELISA 試劑盒，進行該病的血清流行病學調查，以給本場提供一個科學有效的綜合防控方案。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 樣品的采集與處理對北疆某規模化羊場不同年齡階段的綿羊（湖羊）進行頸靜脈采血。分別為10～30 日齡，16 只；30～60日齡，18 只；60～120 日齡，14 只；成年雌性綿羊，24 只；成年雄性綿羊，6 只。將采集好的綿羊血液靜置于室溫自然析出血清。待血清析出后3000r/min 離心5min，取上清于離心管中，置于4℃或-20℃保存。

1.1.2 主要試劑與儀器 綿羊肺炎支原體抗體檢測試劑盒、綿羊肺炎支原體抗原檢測試劑盒均購自美國TSZ 公司；酶聯免疫檢測儀購自美國GENE 有限公司；微量移液器購自德國Eppendorf 公司。

1.2 試驗方法

綿羊肺炎支原體抗原、抗體檢測方法按照試劑盒說明書嚴格操作。綿羊肺炎支原體抗體/抗原檢測結果判定標準：試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00；陰性對照平均值≤0.10；臨界值（CUTOFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；陰性判定：樣品OD 值＜臨界值（CUTOFF）為肺炎支原體抗體/抗原陰性；陽性判定：樣品OD 值≤臨界值（CUT OFF）者為肺炎支原體抗體/抗原陽性。

2 試驗結果

從圖1 可以看出，不同階段的綿羊肺炎支原體抗體陽性率平均為67.95%，最高的為成年母羊，為79.17%，最低的是10～30 日齡羔羊，為43.75%；不同階段的綿羊肺炎支原體抗原陽性率平均為41.03%，最高的為60～120 日齡的羔羊，為71.43%，該階段咳嗽、喘氣的羊只較多，最低的為成年公羊和母羊，為16.67%。

表1 不同階段綿羊血清中MO-Ab和MO-Ag檢測結果表

圖1 不同階段綿羊血清中MO-Ab 和MO-Ag 檢測結果分析圖

3 討論

剡文亮等[5]研究發現，新疆北疆瑪納斯、奇臺、石河子等地綿羊MO 抗體陽性率為46.66%～100%，MO 抗原的陽性率為26.66%～100%，其中個別散養場野毒感染達到100%，遠遠高于本試驗結果中該規模化羊場的野毒感染現狀，可能規模化與散養模式的管理、營養、防疫等現狀有關。

本試驗綿羊肺炎支原體抗體檢測結果表明，抗體的野毒感染率為67.95%，但抗原的陽性率為41.03%，其中成年綿羊的抗原和抗體陽性率吻合率不高，說明成年綿羊存在早期支原體野毒感染現象，但機體免疫系統已經將病原清除；各個階段羔羊的抗體和抗原陽性率吻合率較高，存在綿羊肺炎支原體正在感染的可能。

綿羊支原體肺炎作為一種主要影響羔羊生產性能的疫病，目前已經威脅到我國各個不同地區的羊場，有關該病的進一步研究，尤其是疫苗的開發迫在眉睫，另外養殖模式、養殖水平的層次不齊也是導致該病多發的主要因素，為了科學的防控該病的發生，應該建立一套集營養保健、免疫接種、環境控制和早期干預治療的綜合防控措施[6]。