半夏瀉心湯對慢性萎縮性胃炎大鼠炎癥因子的影響*

陳永燦 楊汐茵 陳 宇 曾國良 白 鈺,2 王恒蒼,2 嚴茂祥 范天田

1 浙江省中醫藥研究院 浙江 杭州 310007

2 浙江省立同德醫院 浙江 杭州 310012

3 浙江省杭州市蕭山區瓜瀝鎮社區衛生服務中心 浙江 杭州 311200

4 廣西梧州市中醫醫院 廣西 梧州 543000

5 浙江省中醫院 浙江 杭州 310006

6 浙江中醫藥大學 浙江 杭州 310053

慢性萎縮性胃炎（CAG）是臨床常見的消化內科疾病，是腸型胃癌Correa模式的關鍵環節。臨床實踐表明，半夏瀉心湯治療CAG作用明顯[1]。本實驗通過觀察半夏瀉心湯對CAG大鼠胃組織部分炎癥因子的影響，探討其可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物：選擇健康Wistar大鼠60只，雌雄各半，6周齡，SPF級，購于上海斯萊克實驗動物有限公司[SCXK（滬）2013-0016]。飼養于浙江省中醫藥研究院實驗動物中心SPF屏障系統[SYXK（浙）2014-0003]。

1.2 半夏瀉心湯制備：半夏瀉心湯（半夏、炙甘草、黃芩各9g，黨參、大棗各30g，干姜6g，黃連3g），由浙江省中醫院中藥制劑室制成流浸膏，每毫升含2.4g生藥，冷藏4℃備用。

1.3 CAG模型建立：60只大鼠隨機分成正常組10只和造模組50只。正常組以生理鹽水代替注射或灌胃，造模組大鼠采用主動免疫-去氧膽酸-酒精綜合法造模16周。

1.4 分組及給藥：造模大鼠隨機分成5組，每組10只。模型組給予生理鹽水灌胃，半夏瀉心湯（下稱中藥）低（6g/kg·d）、中（12g/kg·d）、高（24g/kg·d）劑量組給予中藥流浸膏灌胃，陽性對照組給予葉酸（5mg/kg·d）混懸液灌胃，均連續給藥8周。

1.5 檢測方法：采用Realtime-PCR技術檢測胃組織核因子-κB（NF-κB）、白細胞介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的mRNA表達，Western Blot技術檢測NF-κB、磷酸化核因子-κB（P-NF-κB）的蛋白表達水平。

1.6 統計學方法：采用SPSS 17.0軟件進行統計分析，計量資料以±s表示。應用單因素方差分析，方差齊用LSD檢驗；方差不齊用Dunnett’s T3檢驗。

2 結果

2.1 半夏瀉心湯對CAG大鼠胃組織NF-κB、IL-1β、TNF-αmRNA表達的影響：與正常組比較，模型組上述指標mRNA表達水平皆上調（P＜0.01）；與模型組比較，中藥組及葉酸組上述指標mRNA表達水平降低，且中藥高劑量組接近正常組，療效優于葉酸組（P＜0.01，P＜0.05）。見圖1～3。

圖1 各組CAG大鼠胃組織NF-κBmRNA相對表達量

圖2 各組CAG大鼠胃組織IL-1βmRNA相對表達量

圖3 各組CAG大鼠胃組織TNF-αmRNA相對表達量

2.2 半夏瀉心湯對CAG大鼠胃組織NF-κB、P-NF-κB蛋白表達影響：與正常組比較，模型組上述指標蛋白表達均明顯增加（P＜0.01）；與模型組比較，中藥組及葉酸組上述指標蛋白表達水平均下調，且中藥高劑量組NF-κB及P-NF-κB蛋白降低更明顯（P＜0.01，P＜0.05）。見圖4～5。

圖4 各組CAG大鼠胃組織NF-κB蛋白表達

圖5 各組CAG大鼠胃組織P-NF-κB蛋白表達

3 討論

CAG以胃黏膜炎癥反應、固有腺體數目減少、胃黏膜變薄等為主要特點，或伴腸化生，或有異型增生，主要累及胃底和胃體。中醫學將其歸屬于“痞滿”“脘痛”等范疇，病位在胃，與肝、脾有關。脾胃失司、寒熱錯雜是其主要病機。半夏瀉心湯為張仲景治療心下痞主方，寒熱同調、辛開苦降，近年來研究其對胃腸道疾患尤其是CAG療效明顯[2]。Notch信號通路由不同受體、配體及下游靶基因組成，參與CAG及胃癌發生[3]。其中，IL-1β、TNF-α、NF-κB、P-NF-κB等炎癥因子及炎癥調節因子關鍵分子起著重要作用。本實驗研究顯示，半夏瀉心湯使CAG大鼠NF-κB、IL-1β、TNF-αmRNA及NF-κB、P-NF-κB蛋白表達明顯下降，以高劑量組作用最明顯。提示半夏瀉心湯可能通過下調Notch信號通路下游靶基因NF-κB的表達，來抑制炎性細胞IL-1β、TNF-α的轉錄、釋放，促進慢性萎縮性胃炎大鼠胃黏膜組織修復，減輕胃黏膜萎縮、腸上皮化生及異型增生，阻斷其向胃癌發展。