超高效液相測定棉酚含量方法的建立

2 黃小貞2 趙德剛3

(1.貴州大學生命科學學院/農業生物工程研究院/山地植物資源保護與種質創新省部共建教育部 重點實驗室， 貴陽 550025； 2.貴州大學茶學院， 貴陽 550025； 3.貴州省農業科學院/國家農業農村部DUS中心貴陽分中心， 貴陽 550006)

棉花(Gossypiumspp.)是世界上最重要的經濟作物之一，棉花種籽纖維是天然纖維的主要來源，富含蛋白質和油脂的棉花種子是極具應用價值的生物原料[1]。棉酚(Gossypol)是棉屬植物特有的植物防御素，主要發揮抵御病蟲害的生理功能[2]，棉酚衍生物在抗生育[3]，抗氧化[4]，抗癌[5]，抗病毒[6]，抗寄生蟲[7]和抗菌[8]等方面具有卓越的功效。但過量的棉酚對人[9-10]和多種單胃動物[11-12]具有不可逆的毒害作用。棉籽中的棉酚含量較高，這嚴重限制了棉籽的廣泛應用。國家制定了一系列嚴格的質量標準，預防種子飼料中的棉酚對人畜產生毒害，如《飼料衛生標準》(GB 13078—2017)中規定每千克棉籽餅中包含的游離棉酚不能超過1 200 mg。

檢測棉酚含量的方法有高效液相色譜法[13]、高效毛細管電泳法[14]、分子印跡法[15]、比色法[16]、薄層色譜法[17]等。其中高效液相色譜法(HPLC)因其具有分析速度快、靈敏度高、重復性好、選擇性高、檢測自動化等優點被廣泛應用[18-19]，與其他技術聯用使HPLC的應用更為便捷[20]。超高效液相色譜法(UItra Performance Liquid Chromatography，UPLC)是在高效液相色譜的原理上進行技術優化產生的新興技術，UPLC使用粒徑低于2μm的小顆粒填充色譜柱，柱子效能顯著增加，與傳統的HPLC相比，UPLC的分析速度更快、分離度更高、靈敏度更強。目前使用UPLC技術檢測棉酚含量的相關報道并不多，建立棉酚UPLC的檢測方法尤為必要。……