牛支原體病的診治與預防*

齊彪，李穎，張曉利,劉志勇，項愛麗

（1.唐山市畜牧獸醫研究所 河北唐山 063004；2.唐山市食品藥品綜合檢驗檢測中心 河北唐山 063006）

牛支原體病是由牛支原體（M. bovis）引起的一種牛的常見疾病，該病在牛場中普遍存在。美國人Hale 于1961 年從患有乳腺炎病牛的牛乳中分離到牛支原體。牛支原體病在歐洲、亞洲、美洲等地均普遍存在。歐洲犢牛肺炎中有30%左右是由牛支原體引起的，美國部分牛場由牛支原體引發的牛呼吸系統疾病和乳腺疾病接近70%，英國牛呼吸道疾病中近四分之一是由支原體引發。我國于2008 年在患壞死性肺炎肉牛中首次分離到牛支原體，并引起廣泛關注。目前我國多個省份均有牛支原體病報道，對我國養牛業健康發展造成嚴重危害。

1 病原特征

牛支原體無細胞壁，可在無細胞活性的培養基中自行繁殖，顯微鏡下通常呈球形、絲狀或桿狀、螺旋體、顆粒狀，基因結構為雙股DNA。牛支原體基因組較小，最適培養pH 值為7.9±0.1，其對培養基中營養物質要求較高，需要加入血清等營養物質，為其提供生長必需的脂肪酸和膽固醇等營養物質。牛支原體在固體或液體培養基中生長均較慢，通常在5%CO2環境中培養5～7d，可形成較小菌落，呈“油煎蛋”樣，邊緣整齊圓滑，四周較薄、中央較厚，瑞氏染色呈淡紫色，吉姆薩染色呈藍色。牛支原體對環境抵抗力較弱，在高溫或普通消毒劑作用下可迅速滅活。在冷藏牛乳中可存活兩個月以上，在-20℃冷凍條件下可存活半年以上，但在70℃ 1min 或65℃ 2min 作用下可失去活性。

2 流行病學

不同日齡、品種的牛均可感染牛支原體，肉牛和奶牛易感，2～6月齡犢牛更容易感染，且死亡率較高，成年牛一般呈陰性感染，臨床表現不明顯。患病牛可通過呼吸道、乳汁、尿液等傳播疾病，感染途徑主要為呼吸道。長途運輸、飼養環境的改變可誘發該病，由于牛支原體病可導致免疫抑制，從而引起繼發感染，造成較大經濟損失。

3 臨床癥狀

牛支原體病是由牛支原體引起的重要疾病，可引起牛肺炎、乳腺炎、關節炎、中耳炎、眼結膜炎等多種疾病。

3.1 肺炎

病牛表現為食欲減退、體溫升高、體形消瘦、被毛雜亂、呼吸困難，伴有咳嗽，患病初期鼻腔部流鼻涕，后期轉為黏性或膿性鼻液[1]。病變主要集中在胸腔肺部，以壞死性肺炎為特征，肺部形成白色結節，可見干酪樣壞死灶，胸腔下有淺綠色膠凍樣物浸潤，支氣管、肺泡周圍有大量白細胞聚集。

3.2 中耳炎

病牛生產緩慢，耳朵左右搖晃，站立不穩，摩擦欄桿，嚴重時從耳道流出膿性分泌物。

3.3 關節炎

臨床表現為跪地不起，關節腫脹，不愿走動，關節軟組織出現干酪樣壞死。

3.4 結膜炎

眼角有大量分泌物，結膜潮紅，視力嚴重受損。

3.5 乳腺炎

乳房腫脹發熱，內有塊狀物，乳汁呈水樣，后期含有絮狀物，

4 診斷

4.1 細菌學診斷

采集患病牛肺組織等病料，無菌條件下接種PPLO 固體培養基，在37℃、5%CO2環境中培養2～3d，在低倍光學顯微鏡下觀察菌落呈“煎蛋樣”形態，PPLO 培養基由紅色變成黃色渾濁樣，再結合生化試驗可進行初步診斷。

4.2 分子生物學檢測

通常采用聚合酶鏈式反應（PCR）進行檢測，該方法簡便、高效、特異性強。早期我國對M. bovis 進行分析研究，發現M. bovis 和M. agalactiae（無乳支原體）均含有p81 蛋白，我國部分學者根據P81 基因引物建立了PCR方法[2]，為國內首次建立的牛支原體PCR 高效、快速檢測方法。隨著PCR 技術的發展，熒光定量PCR 和環介導等溫擴增技術（LAMP）逐步成熟應用到牛支原體檢測中，大大縮短檢測時間，便捷高效，且成本低。

4.3 血清學檢測

該方法針對血清中牛支原體抗體進行檢測分析，可有效區分感染牛和免疫牛[3]。常用檢測方法有酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、間接血凝試驗（HA）、膠體金層析試驗等。

5 防控措施

1）加強飼養管理。牛舍保持干燥衛生，及時清理污水糞便，牛舍通風，養殖密度適宜，合理搭配飼料，定期到運動場活動。

2）做好檢疫。新購進牛時，做好檢疫工作，防止引進帶菌牛，混群前進行隔離飼養，確認無問題后再混養。定期對牛舍進行消毒，消除病原生存環境。

3）及時處置發病牛。發現患病牛后，立即隔離飼養，消毒飼養環境，按照輪換用藥和交叉用藥原則，使用恩諾沙星、大觀霉素等抗生素進行治療，防止發生繼發感染和產生耐藥性。

6 結語

牛支原體病是牛的一種重要疾病，給養牛業造成巨大危害。該病的致病機理尚未研究清楚，無有效商業化疫苗，因此應堅持預防為主的方針，采用高效便捷的檢測方法和有效措施進行防控。