在宮頸癌篩查中液基細胞學制片方法及染色方法探討

胡鑫瑜

【摘要】 目的：探討沉降式液基細胞學制片聯(lián)合蘇木素-伊紅染色用于宮頸癌篩查中的臨床價值。方法：以2018年1月至2018年12月為時限，擇取于本院行宮頸癌篩查的10500名受檢者，取宮頸細胞樣本為研究對象，分別接受液基細胞學檢查（研究組）與宮頸涂片檢查（對照組）。研究組采用泰普沉降式制片，行蘇木素-伊紅染色;對照組制成傳統(tǒng)涂片，行巴氏染色。鏡下觀察，評價兩組制片質(zhì)量，比較兩組細胞學檢查結(jié)果。結(jié)果：研究組制片滿意度（98.62%）高于對照組（87.05%），宮頸上皮異常檢出率（6.05%）高于對照組（4.05%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論：沉降式液基細胞學制片聯(lián)合蘇木素-伊紅染色能有效提高涂片質(zhì)量及宮頸上皮異常檢出率，在宮頸癌篩查中具有重要應(yīng)用價值。

【關(guān)鍵詞】

宮頸癌;液基細胞學;沉降式制片;蘇木素-伊紅染色

宮頸癌是我國女性生殖系最常見的惡性腫瘤，流行病學統(tǒng)計顯示，年新發(fā)病例約14萬，占世界患者總數(shù)的35%左右，死亡超過5萬，約占女性惡性腫瘤死亡人數(shù)的20%，是威脅我國女性健康與生命的重要疾病[1]。本病早期治療收效理想，但宮頸癌早期缺乏特異性癥狀和體征，容易被忽視，因此，早期發(fā)現(xiàn)和診斷成為臨床診治的關(guān)鍵。液基細胞學基于人體組織正常脫落細胞進行疾病診斷，能夠利用中介液體有效去除標本中的干擾成分，近年用于宮頸癌篩查中，在提高診斷率方面發(fā)揮了重要作用[2]。筆者現(xiàn)對基細胞學有效制片及染色方法進行分析探討，旨在為提高宮頸癌篩查效果提供依據(jù)參考，報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

隨機從2018年1月至2018年12月本院行宮頸癌篩查的受檢者中擇取10500名，取受檢者宮頸細胞樣本為研究對象，分別接受液基細胞學檢查（研究組）與宮頸涂片檢查（對照組）。標本來源：婦科門診6300例，體檢4200例。

1.2方法

1.2.1研究組取樣避開經(jīng)期，停止性生活、陰道沖洗及用藥3d以上。受檢者膀胱截石位，常規(guī)清潔消毒后，置入一次性宮頸刷至宮頸口，旋轉(zhuǎn)數(shù)圈，刮取宮頸分泌物，置于細胞保存液中，密封送檢。實驗室內(nèi)，標本常規(guī)排序并編號，采用泰普沉降式制片，混勻器充分振蕩后，上機離心5min，離心速率2000r/min，棄上清液，取適量底部與側(cè)壁樣本，自然沉降約10min，吸取底部沉淀液制作薄層涂片，常規(guī)脫水、固定，行蘇木素-伊紅染色（HE染色）。涂片染色步驟：蒸餾水5min;蘇木精液染色5min;蒸餾水沖洗1～3s，稍洗去染液;1%鹽酸乙醇1～3s，退去多余顏色;蒸餾水徹底沖洗;0.5%伊紅液染色1～3min;蒸餾水稍洗1～2s。染色完成后，乙醇梯度脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

1.2.2對照組取樣前準備同研究組，受檢者膀胱截石位，刮取宮頸適量組織樣本，均勻涂于載玻片上，乙醇固定后，行巴氏染色。

1.3觀察指標與評價標準

鏡下觀察兩組制片，評價質(zhì)量，比較細胞學檢查結(jié)果。樣本評價依據(jù)TBS分級系統(tǒng)，統(tǒng)計標本質(zhì)量滿意度以及宮頸上皮異常檢出率。標本質(zhì)量評價標準：涂片有形態(tài)完好清晰的鱗狀上皮細胞超過8000個，覆蓋面不低于10%，有移行區(qū)細胞成分或2團及以上宮頸管柱狀上皮細胞團，每團細胞數(shù)量5個及以上——滿意;涂片中形態(tài)完好清晰的鱗狀上皮細胞不足，未至上述標準，或存在明顯細胞重疊、其他細胞過多等，導致超過75%的上皮細胞被覆蓋而難于觀察——不滿意。TBS標準將上皮細胞分為正常（NILM）、非經(jīng)典鱗狀細胞（ASC）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細胞癌（SCC），本研究擬定以LSIL及以上分類為異常。

1.4統(tǒng)計學方法

以SPSS 21.0軟件統(tǒng)計分析所得數(shù)據(jù)，計量資料采用（±s）表示，行t檢驗;計數(shù)資料以%表示，行χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

研究組標本滿意度高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。見表1?；谘芯拷M制片方法，受檢者宮頸異常上皮檢出率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。見表2。

3討論

細胞學檢查是臨床診斷宮頸癌常用方法。既往，臨床使用傳統(tǒng)宮頸刮片，以刮板、棉簽取材，獲取樣本范圍小，存在取材不全的問題。另外，血液、宮頸分泌液等異物混雜和覆蓋，常導致標本細胞重疊，導致制片質(zhì)量下降，影響臨床觀察與診斷[3]。液基細胞學檢查以專用宮頸刷取材，宮頸脫落細胞收集全面，加之采用薄層細胞檢測系統(tǒng)檢查，檢測前中介液體去除干擾成分，涂片細胞重疊少，清晰度高，質(zhì)量好，大大提高了診斷效果，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于宮頸癌篩查中[4]。

目前，臨床可行液基細胞學制片技術(shù)有多種，本研究采用沉降式技術(shù)制片，其制片原理為密度分層與重力自然降沉，能夠有效去除雜質(zhì)，更加有效地獲得病變細胞，并達到薄層制片的效果[5]。另外，自然沉降能夠最大可能地減少器械操作對細胞組織的影響和破壞，對保留鱗狀上皮細胞形態(tài)與完整性方面具有積極作用，更利于臨床觀察。液基細胞學診斷宮頸癌，關(guān)鍵在于觀察細胞形態(tài)及細胞核的大小、結(jié)構(gòu)及染色深淺。HE染色是液基細胞學常用染色方法，其主要原理為不同組織和細胞的不同成分對蘇木精與伊紅的親和力與染色性質(zhì)存在差異。經(jīng)蘇木精染色后，細胞核著清楚的深藍色，其他成分駝色，再利用伊紅染色后，胞漿不同成分呈現(xiàn)不同程度的粉紅色，能夠很好地勾勒和顯示病變組織形態(tài)及結(jié)構(gòu)[6]，對提高宮頸異常檢出率具有重要意義。

綜上所述，沉降式液基細胞學制片聯(lián)合蘇木素-伊紅染色能有效提高涂片質(zhì)量及宮頸上皮異常檢出率，在宮頸癌篩查中具有重要應(yīng)用價值。

參考文獻

[1] 莊粵冰，潘雪萍，陳瑞興，等.p16INK4a免疫細胞化學染色在宮頸癌篩查中的作用[J].深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018，28（12）：6769.

[2] Tripathy K，Mishra A，Singh A，et al.Immunocytochemistry using liquid-based cytology： A tool in hormone receptor analysis of breast cancer[J].Journal of Cytology，2018，35（04）：260264.

[3] 王艷.宮頸癌篩查TCT細胞學檢查與傳統(tǒng)巴氏染色法的比較[J].世界最新醫(yī)學信息文摘，2018，18（08）：108，111.

[4] 金寧，王焱，熊林，等.沉降式液基細胞技術(shù)和傳統(tǒng)涂片在體液細胞學檢查中的應(yīng)用比較[J].世界最新醫(yī)學信息文摘，2017，17（66）：56，13.

[5] 王瓏，吳霞，謝愛華，等.在宮頸癌篩查中液基細胞學制片方法及染色法探討[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2017，35（04）：532535.

[6] 賀德智.沉降式液基細胞學制片質(zhì)量12000例分析[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2016，32（14）：22232225.