兩個培育品種豬生長肥育早期采食行為特性研究

付言峰，方曉敏，王鋒超，潘晶晶，王學敏，涂 楓，趙為民，任守文

（1.江蘇省農業科學院畜牧研究所/農業部種養結合重點實驗室/江蘇省農業種質資源保護與利用平臺，江蘇南京 210014；2.江蘇省明天農牧科技有限公司，江蘇 南京 210014；3.阜寧縣畜牧獸醫站，江蘇 鹽城 224400）

我國是一個養豬大國，國家統計局（http：//www.stats.gov.cn/tjsj/ndsj/2018/indexch.htm）數據顯示，2017 年我國生豬出欄量為7.02 億頭，年底存欄量為4.4 億頭，豬肉產量5 451.8 萬t，2017 年我國生豬出欄量約占世界生豬出欄總數的一半以上[1]。近年人們生活水平不斷提高，加之我國人民的烹飪習慣，決定了肉質鮮美、風味獨特的豬肉產品更受市場青睞[2]。外來豬種的肉質風味不及我國大多數地方豬，而以地方豬種為母本，導入外來豬種血統培育的新品種或雜交商品豬，更符合國人的消費方向，市場前景更廣闊[3]。

蘇山豬是江蘇省農業科學院畜牧研究所養豬團隊歷經15 年，利用二花臉豬、梅山豬和杜洛克豬培育的一個新品種，于2018 年獲得國家畜禽新品種（配套系）證書（編號：農01 新品種證字第28 號）（http：//jiuban.moa.gov.cn/fwllm/hxgg/201711/t20171124_5919183.htm）。蘇山豬經產母豬產仔數13.6 頭，有效乳頭7 對以上，日增重786 g，料重比2.89，胴體瘦肉率59.4%，肌內脂肪含量2.56%，飼糧中粗纖維11.39%時仍可正常生長，是一個優質豬品種[4]。蘇紫豬是江蘇省農業科學院畜牧研究所養豬團隊正在培育的優質瘦肉型黑豬新品種。該豬全身被毛黑色，腹部中等大小，背腰平直，具有繁殖力高、肌內脂肪含量高、肉色鮮紅、大理石花紋明顯、抗逆性強等特點，預計再經過2～3 個世代的持續選育，即可達到品種審定標準。蘇山豬和蘇紫豬經生產試用，市場歡迎度均較高。

為了挖掘蘇山豬和蘇紫豬的種質資源特性，提高其育種水平和生產效率，故從以下兩個方面開展本試驗：一是利用OSBORNE 種性測定站分析試驗豬群的體重、采食量、采食次數、采食時間等采食數據，再分析豬群的采食習性，不同品種、性別和類型豬的采食差異性，估算每頭豬的飼料報酬。二是利用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定試驗豬血液中的豬生長激素（GH）和促生長激素釋放激素（GHRH）濃度，再分析不同品種、性別和類型豬的GH 和GHRH 濃度差異。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗地點為江蘇省農業科學院六合試驗豬場，試驗動物為蘇山豬32 頭，蘇紫豬32 頭，按性別、品種、類型、體重分成8 欄飼養（表1），試驗期40 d，預試期5 d，正試期35 d。試驗開始日期為2019 年5月14 日。試驗開始時所有豬體重（30±3）kg，日齡（60±5）d。在測定第30 天時，對每一欄豬隨機選取3 頭豬（共24 頭）進行豬生長激素（GH）和促生長激素釋放激素（GHRH）濃度的測定。

表1 試驗豬分組情況

1.2 主要試驗儀器和試劑

生長性能測定：本試驗采用8 套美國奧飼本（OSBORNE, FIRE）全自動種豬生產性能測定系統，進行種豬生長肥育性狀測定，奧飼本測定站能準確記錄豬的日采食量、采食次數、采食時間、采食時的體重等數據。

激素測定：芬蘭（Labsystems Multiskan MS）352型酶標儀、芬蘭（Thermo Labsystems）AC8 型洗板機、上海一恒隔水式恒溫培養箱GNP-9080 型；江蘇酶免（MEIMIAN）豬促生長激素釋放激素（GHRH）ELISA 試劑盒96T、江蘇酶免（MEIMIAN）豬生長激素（GH）ELISA 試劑盒96T。

1.3 測定流程

選擇60 日齡左右公豬進入奧斯本測定站開測，100 日齡左右結束測定；測定過程中，采用自由采食和飲水、每欄8 頭左右測定豬，測定站將自動獲得每天的采食數據，包括體重、采食量、采食次數、采食時間等。接下來，試驗人員每隔5 d 左右將測定站數據傳送到電腦終端，同時備份。最后，我們將測得的原始數據導出，進行統計分析。

1.4 激素測定方法

豬生長激素（GH）和豬促生長激素釋放激素（GHRH）酶聯免疫吸附試驗均根據試劑盒說明書進行測定。1）先進行標準品的稀釋，即將150 μL 的標準品加入150 μL 標準品稀釋液中稀釋。2）加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50 μL，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測樣品10 μL（樣品最終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3）溫育：用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min。4）配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用。5）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，如此重復5 次，拍干。6）加酶：每孔加入酶標試劑50 μL，空白孔除外。先后分別重復溫育和洗滌1 次。7）顯色：每孔先加入顯色劑A 50 μL，再加入顯色劑B 50 μL，輕輕震蕩混勻，37 ℃避光顯色10 min。8）終止：每孔加終止液50 μL，終止反應（此時藍色立轉黃色）。9）測定：以空白孔調零，450 nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止液后15 min 以內進行。

1.5 數據統計分析

數量儲存、篩選、分類匯總等整理通過Excel 和Access 軟件分析。不同組別間測定數值的差異性顯著水平通過SAS 8.2 統計軟件包進行GLM 分析，結果以最小二乘均值±標準誤（LSmeans±SE）表示。

激素濃度計算是以OD 值為橫坐標，以標準物的濃度為縱坐標，繪出標準曲線，再用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

2 結果與分析

2.1 采食數據分析

試驗期間共獲得33 195 條采食數據，每一條采食數據均包括以下11 類信息：順序號、測定站號、電子耳牌、日期、采食開始時間、采食結束時間、料槽初重、料槽末重、采食量、體重和投料量。

采食開始時間：自由采食貫穿全天24 h，其中下午16：00 為采食峰值，其次為下午17：00 和上午8：00；早晨5：00 至晚上19：00 間，中午11：00 為采食低谷。其他時間（晚上20：00 至次日凌晨4：00）均有采食，但采食次數均比較低。不同品種（蘇山豬和蘇紫豬）間、不同性別（公豬和母豬）間、不同類型（種豬和肥豬）間采食開始時間（小時）差異均不顯著（表2）。

表2 試驗豬不同采食時間采食次數分布（n=62）

各欄間試驗豬比較結果顯示：第7 欄豬收集到的數據量最高（4 799 條），第8 欄豬的最低（2 167條）。料槽初重比較，第4 欄豬最高，達到0.95 kg，其他欄都在0.72～0.79 kg 之間，其中第3 欄最低。料槽末重比較，第8 欄最高，達到0.596 kg，第2 欄最低，達到0.563 kg。次采食量比較，第4 欄最高，第3 欄最低（P＜0.05）。體重比較，第4 欄最高，第3 欄最低。次投料量比較，第4 欄最高，第2 欄最低。這些結果說明，體重和次采食量最高值和最低值比較結果一致，料槽初重、次采食量、體重和次投料量最高值均發生在第4 欄豬上（表3）。

不同品種、性別和類型豬間的采食數據比較結果顯示：蘇山豬、公豬和種豬均為30 頭，數據采集量分別為15 889、15 277 和15 684 條；蘇紫豬、公豬和肥豬均為32 頭，數據采集量分別為17 306、17 918和17 511 條。品種間比較，蘇紫豬的料槽初重、料槽末重、次采食量、體重和次投料量均顯著高于蘇山豬（P<0.05）。性別間比較，公豬的料槽初重、次采食量和次投料量均顯著高于母豬（P<0.05），母豬的料槽末重和體重均顯著高于公豬（P<0.05）。類型間比較，種豬的料槽末重顯著高于肥豬（P<0.05），肥豬的料槽初重、次采食量、體重和次投料量均顯著高于種豬（P<0.05）。這些結果說明，不同品種、性別和類型豬間的采食性狀均差異顯著，蘇紫豬的所有采食性狀均顯著高于蘇山豬（表4）。

表3 各欄料槽初重、料槽末重、次采食量、體重和次投料量等比較結果

表4 不同品種、性別和類型豬間料槽初重、料槽末重、次采食量、體重和次投料量等比較結果

2.2 日數據分析

日數據指每頭試驗豬每天采集的匯總性數據，所以每頭豬每天會有一條日數據。表5 各欄間試驗豬日數據比較結果顯示：第7 欄豬收集到的數據量最高（456 條），第6 欄豬的最低（315 條）。日采食量比較，第6 欄豬最高，達到3.088 kg，第4、3、8 欄在2~3 kg 之間，第7、5、1 在1~2 kg 之間，第2 欄最低，低于1 kg。日采食次數比較，第3 欄最高（11.88次），其次為第4、8 欄，這兩欄均不低于11 次；第5、1、7、6 欄均在9~11 次之間，第2 欄最低，低于6 次。日采食時間比較，第4 欄最高，為4 823.19 s，其次為第7、8 欄，均超過4 000 s；第5、1、6、3 欄均在3 000~4 000 s 之間，第2 欄最低，低于3 000 s。日體重比較，第4 欄最高，超過90 kg，遠高于其他欄，第8、6 欄均在60~70 kg，第7、2 欄在50~60 kg，第5、1、3 欄在40~50 kg，其中最低的是第3 欄。這些結果說明，日采食時間和日體重均為第4 欄最高，日采食量、日采食次數、日采食時間均為第2 欄最低（表5）。

表5 各欄日采食量、日采食次數、日采食時間、日體重等比較結果

不同品種、性別和類型豬間的日數據比較結果顯示：蘇山豬、公豬和種豬均為30 頭，數據采集量分別為1 586、1 420 和1 553 條；蘇紫豬、公豬和肥豬均為32 頭，數據采集量分別為1 478、1 644 和1 511條。品種間比較，蘇紫豬的日采食量、日采食次數、日體重和日采食時間均顯著高于蘇山豬（P<0.05）。性別間比較，母豬的日采食量、日采食次數和日采食時間均顯著高于公豬，體重相反（P<0.05）。類型間比較，肥豬的日采食量和體重顯著高于種豬（P<0.05），而日采食次數和日采食時間則是種豬顯著高于肥豬（P<0.05）。這些結果說明，不同品種、性別和類型豬間的日性狀均差異顯著（P<0.05），日采食量、日采食次數和日采食時間，均為蘇紫豬高于蘇山豬，母豬高于公豬（表6）。

表6 不同品種、性別和類型豬間日采食量、日采食次數、日采食時間、日體重等比較結果

2.3 豬生長激素（GH）測定結果

圖1 用于測定豬生長激素（GH）濃度的標準曲線制定

對5 個豬GH 標準物（濃度已知），按照1∶1 對其進行稀釋，再測定其OD 值，繪制出下面的標準曲線（圖1），根據此標準曲線，測定試驗豬血清的OD值，計算出其GH 含量（表7）。各欄之間比較結果如下：共8 欄豬，其中第2 欄的GH 濃度最高，為蘇山豬公肥豬（即蘇山豬閹豬），處于第一梯隊；其次為蘇紫豬母肥豬、蘇山豬母種豬，處于第二梯隊；剩下的第1、3、4、6、7 欄豬都處于第三梯隊；第一梯隊與第三梯隊間GH 含量差異顯著（P<0.05）。品種之間比較結果如下：蘇山豬和蘇紫豬間GH 含量無顯著差異；性別之間比較結果如下：公豬與母豬間GH 含量無顯著差異；類型之間比較結果如下：肥豬的GH 含量顯著高于種豬（P<0.05），見圖2。

表7 試驗豬生長激素（GH）濃度

圖2 不同品種、性別、類型豬的生長激素（GH）濃度比較

2.4 豬促生長激素釋放激素（GHRH）測定結果

對5 個豬促生長激素釋放激素（GHRH）標準物，按照1∶1 對其進行稀釋，再測定其OD 值，繪制出GHRH 的標準曲線（圖3），根據此標準曲線，測定試驗豬血清的OD 值，估計其GHRH 含量。

各欄之間比較結果如下：共8 欄豬，其中第8 欄的GHRH 濃度最高（P<0.05），為蘇山豬母肥豬，處于第一梯隊；其次為第7、5、3、1、2 欄，處于第二梯隊；最低的為第4、6 欄豬，處于第三梯隊；第一梯隊與第三梯隊間GHRH 含量差異顯著（P<0.05），見表8。不同品種、性別、類型豬的GHRH 濃度差異均不顯著：蘇山豬（39.89±2.19）μg/L，蘇紫豬（45.94±2.25）μg/L；公豬（40.87±2.30）μg/L，母豬（44.97±2.35）μg/L；種豬（44.79±2.31）μg/L，肥豬（41.04±2.23）μg/L。

圖3 用于測定促生長激素釋放激素濃度的標準曲線制定

表8 試驗豬促生長激素釋放激素（GHRH）濃度

3 討論與結論

豬飼料報酬（料重比）是一個非常重要的育種性狀，隨著種豬自動測定站的推廣，育種場可以更加準確得獲得豬采食數據。有研究指出，在每臺設備不超過11 頭的情況下，隨著飼養密度的降低（自0.56 頭/m2降低至0.44 頭/m2），日采食次數、日采食時間及采食量逐漸增加，若再降低飼養密度則無顯著影響[5]。本試驗每個欄中平均飼料8 頭豬，飼料密度約為0.8 頭/m2。本研究表明，豬自由采食貫穿于全天24 h，其中下午16：00 為采食最高峰，其次為下午17：00 和上午8：00；白天的中午11：00 為采食低谷。晚上（20：00 至次日凌晨4：00）均有采食，但采食次數均比較低。不同性別（公豬和母豬）間、不同類型（種豬和肥豬）間采食開始時間差異均不顯著。不同品種、性別和類型豬間的采食性狀均差異顯著，蘇紫豬的所有采食性狀均顯著高于蘇山豬。有研究表明，在自由采食情況下，豬的采食行為多發生在白天，圩豬閹公豬、閹母豬全期平均白晝（6：00～18：00）采食時間分別為夜間的2.82 和2.97 倍，在白晝的采食量分別為夜間（18：00 至次日6：00）的2.78 和2.74 倍[6]，大白豬的采食行為多發生在白天[5，7-8]。

生長激素（GH）與下丘腦分泌的促生長激素釋放因子、抑制素、類胰島素樣生長因子和胰島素等體內激素形成刺激和反饋機制，能降低脂肪含量，提高蛋白質合成量，促進礦物質元素的吸收，促進豬肌肉生長，提高胴體瘦肉率和飼料效率，改善胴體品質[9-11]。本研究結果表明，蘇山豬公肥豬（即蘇山豬閹豬）的GH 含量最高，蘇山豬和蘇紫豬間GH 含量無顯著差異，公豬與母豬間GH 含量無顯著差異，肥豬的GH含量顯著高于種豬（P＜0.05），這說明閹割（因為肥豬經閹割處理）會對豬GH 含量產生影響。

促生長激素釋放激素（GHRH）作為GH 的正性調控因子，能促進GH 的合成和分泌[12]。本研究表明，蘇山豬母肥豬的GHRH 含量最高，蘇山豬和蘇紫豬間、公豬與母豬間、種豬和肥豬間的GHRH 含量均差異不顯著（P＜0.05）。有研究表明，血清中GH和GHRH 含量對豬背最長肌肌纖維面積有正效應，可促進肌纖維生長[13]。GH 可使瘦肉型豬肌肉、皮膚和骨的沉積率增大，使各種肌纖維變粗[14]。

綜上所述，自由采食時，豬只喜歡16：00～17：00和上午8：00 間集中采食，體重大的豬采食量更大，蘇紫豬的所有采食性狀均顯著高于蘇山豬，母豬日采食量、日采食次數、日采食時間均顯著高于公豬，GH 和GHRH 的最高值不出現在同一欄豬中，肥豬的GH 濃度顯著高于種豬。