葛路路,石 雁,朱靜靜,李艷娟,馬東波,王 靜,吳秋歌
1)鄭州大學第一附屬醫院呼吸與危重癥醫學科 鄭州 450052 2)新鄉市中心醫院呼吸內科 河南新鄉 453000
癌癥是全世界主要的公共衛生問題,肺癌位居癌癥相關性死亡原因之首,預后差,其5 a生存率約為18%[1],其中非小細胞肺癌約占肺癌的85%,大部分患者在確診時已屬中晚期,喪失了手術機會[2]。以順鉑為主的一線化療方案是非小細胞肺癌的主要治療手段,順鉑化療耐藥的出現是治療失敗的關鍵原因[2-3]。轉錄因子叉頭框C1(forkhead box C1,FOXC1)是叉頭框超家族的一個重要成員,參與胚胎的正常發育和器官形成的調節,越來越多的研究[4-6]指出,FOXC1不僅與鼻咽癌、口腔癌、肝癌、乳腺癌、黑色素瘤、胰腺癌等多種腫瘤的發生發展有關,還能促進癌細胞的增殖、遷移、侵襲和遠處轉移。Xu等[7]發現FOXC1過表達可誘導散發性三陰性乳腺癌對蒽環類化療藥物的耐藥。本研究通過向肺癌A549細胞內轉染FOXC1 siRNA,觀察細胞對順鉑敏感性的變化及細胞內Bcl-2、Bax、FOXC1蛋白及mRNA表達的變化,以期為改善非小細胞肺癌化療耐藥、提高治療效果提供新的思路。
1.1主要試劑與儀器A549細胞購自中國科學院上海生命科學研究院細胞庫;RPMI 1640培養基和胎牛血清購自美國HyClone公司;兔抗人FOXC1多克隆抗體購自美國Abcam公司;兔抗人Bcl-2、Bax單克隆抗體購自美國CST公司;辣根過氧化物酶標記的羊抗兔IgG-HRP二抗購自上海生工生物工程有限公司;FOXC1陰性對照(NC siRNA)、FOXC1 siRNA合成于上海吉瑪制藥技術有限公司;Lipofectamine2000購自美國Invitrogen公司;CCK-8試劑盒購自日本同仁化學研究所;……