血清降鈣素原水平鑒別血流感染病原菌種類的研究

杜娟，桑衛洪，馬順高，李薇，張燦清，張燦梅，蒙健偉，龍安雄

(大理州人民醫院檢驗科，大理 671000)

血流感染是臨床上較嚴重的感染性疾病，血培養是診斷血流感染的金標準，但存在培養時間長，陽性率低等缺點。PCT近年來已成為診斷細菌感染的一個重要標志物[1-2]，亦有研究[3-4]表明PCT水平與血流感染的相關性，為研究PCT水平與血流感染病原菌種類的關系，筆者收集了495例血流感染的臨床資料，現分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料收集標準

大理州人民醫院2016年至2018年血培養分離出單一菌株(在一次住院期間多次分離出同一株菌的只取第一次結果)，且在采集血培養的同時檢測了血清PCT，血培養及PCT檢測標本的采集在本院使用抗生素之前；結合血流感染相關診斷標準[5]，以及文獻[6-7]研究方法排除污染菌后確定血流感染病原菌；將病原菌按種類分組；去除48 h內新生兒、大手術后、嚴重創傷、燒傷、甲狀腺C細胞癌、小細胞肺癌及支氣管肺癌的患者；統計分析PCT水平與血流感染病原菌種類的關系。

1.2 儀器與試劑

采用BacT/Alert 3D 血培養儀進行血培養、Vitek-2Compact 型細菌鑒定藥敏分析儀及配套鑒定卡進行質控及菌株鑒定、法國生物梅里埃公司VIDAS全自動熒光定量分析儀與配套原裝試劑盒進行PCT校準、質控及樣本檢測。

1.3 統計學分析

采用SPSS17.0統計軟件進行數據統計分析。各組計量資料數據先進行正態分布檢驗，符合正態分布的以均數±標準差(±s)表示，再采用單因素方差分析比較；不符合正態分布的采用中位數(M)及四分位數間距(QL-QU)表示集中趨勢和離散趨勢，組間比較采用非參數檢驗的兩個獨立樣本檢驗；性別比較采用交叉表的卡方檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義；根據菌種分組進行受試者工作曲線(ROC曲線)分析，以曲線下面積確定最佳閾值。

2 結果

2.1 血流感染患者病原菌構成

按照標準共收集495例血流感染患者資料，根據感染病原菌不同將患者分為革蘭陰性菌組(338例，男175例，女163例，年齡55.65±17.60歲)、革蘭陽性菌組(129例，男74例，女55例，年齡52.98±17.99歲)和真菌組(28例，男19例，女9例，年齡48.96±13.18歲)。三組患者性別及年齡兩兩比較差異無統計學意義。血流感染病原菌構成見表1。

2.2 病原菌血清PCT水平比較

三組患者血清PCT水平兩兩比較差異有統計學意義，革蘭陰性菌組高于革蘭陽性菌組和真菌組，革蘭陽性菌組高于真菌組。革蘭陰性菌組中PCT水平較高的肺炎克雷伯菌分別與大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、陰溝腸桿菌復合群及銅綠假單胞菌比較差異無統計學意義，與PCT水平較低的沙門菌群及馬爾他布魯菌比較差異有統計學意義。革蘭陽性菌組中PCT水平較高的屎腸球菌分別與金黃色葡萄球菌、棒狀桿菌屬(非白喉棒狀桿菌)、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌人亞種及肺炎鏈球菌比較差異無統計學意義，但與PCT水平較低草綠色鏈球菌群比較差異有統計學意義。血流感染常見病原菌的PCT水平見表1，三組病原菌PCT水平兩兩比較的P值見表2。

2.3 三組病原菌血清PCT水平的ROC曲線分析

經ROC曲線分析，血清PCT閾值分別為7.09、1.06、0.97 ng/mL時鑒別革蘭陰性菌與革蘭陽性菌、革蘭陽性菌與真菌、革蘭陰性菌與真菌的的尤登指數最大，ROC曲線下面積分別為0.64、0.65、0.76。具體結果見表2、圖1～3。

3 討論

本次研究根據血流感染相關診斷標準、排除污染菌后發現血流感染以大腸埃希菌占主導地位，其次是肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌，結果與文獻報道[8-9]相似。革蘭陽性菌中凝固酶陰性葡萄球菌和棒狀桿菌屬(非白喉棒狀桿菌)引起的血流感染也占一定比例，通過查閱病歷資料發現這兩類菌主要分離自腎內科及重癥監護病房留置導管的患者，是引起導管血流感染的重要病原菌。

表1 血流感染病原菌構成及血清PCT水平

通過三組病原菌感染患者的血清PCT水平比較，發現革蘭陰性菌組明顯高于革蘭陽性菌組及真菌組，革蘭陽性菌組明顯高于真菌組，與文獻報道一致[10]。脂多糖是革蘭陰性菌細胞壁的成分，脂多糖及炎癥因子刺激PCT的產生，當革蘭陰性菌感染時，脂多糖可迅速誘導PCT-mRNA翻譯產生PCT[11]，而革蘭陽性菌及真菌則缺少脂多糖，這可能是造成革蘭陰性菌PCT水平明顯升高的原因 。有研究[12]認為血清 PCT 水平直接依賴于宿主對病原菌反應性釋放的炎癥因子的影響，且不同細菌入侵機體后通過其不同的相應信號的途徑刺激機體內源性免疫途徑中炎癥因子的釋放。本研究還發現在革蘭陰性菌組中的馬爾他布魯菌及沙門菌群PCT水平較低、在革蘭陽性菌組中的草綠色鏈球菌群PCT水平亦較低。馬爾他布魯菌及沙門菌群屬于胞內寄生菌，機體對抗胞內寄生菌的免疫主要是細胞免疫而非體液免疫，也許細胞免疫并不能刺激產生大量PCT，有待更多的研究來證實。草綠色鏈球菌在本研究的病例中主要引起感染性心內膜炎，為什么這類病例PCT水平較低，也有待進一步的研究。

表2 三類病原菌血清PCT水平分組比較及ROC曲線分析結果

圖1 革蘭陰性菌與革蘭陽性菌PCT水平的ROC曲線

圖2 革蘭陽性菌與真菌PCT水平的ROC曲線

圖3 革蘭陰性菌與真菌PCT水平的ROC曲線

在PCT水平用于鑒別菌種方面的研究，陳國強等[13]認為PCT水平為9.1 ng/mL是鑒別革蘭陰性菌與陽性菌的最佳閾值，Charles等[14]認為最佳閾值為16.0 ng/mL，龔劍鋒等研究[15]認為PCT水平用于鑒別革蘭陽性菌與真菌的意義不明確。本研究以最佳閾值7.09、1.06 ng/mL時鑒別革蘭陰性菌與革蘭陽性菌、革蘭陽性菌與真菌準確性較低，以最佳閾值0.97 ng/mL鑒別革蘭陰性菌與真菌有一定準確性。研究結果與相關文獻報道存在較大差異，這可能與研究時入組的條件、病例的數量、PCT的檢測方法及線性范圍、血培養及PCT檢測標本是否同時采集、病人感染的嚴重程度、基礎疾病及抗生素使用情況等有關，需要在今后進一步研究。

通過研究筆者認為血清PCT水平可預測血流感染的菌種類別，但準確性不高。血清PCT水平不能鑒別革蘭陰性菌中的常見菌種，亦不能鑒別革蘭陽性菌中的常見菌種，血流感染中還存在PCT水平較低的菌種，故血清PCT水平鑒別血流感染病原菌種類的價值是有限的。