宮頸疾病患者HPV 感染分型及微量元素檢測分析

司百會 劉海霞 司 凡 萬 輝

1.河北省承德市中心醫(yī)院婦科 067000；2.河北省承德市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學科 067000

宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤，其發(fā)病率逐年遞增[1]。國內每年新發(fā)病例為13 萬～14 萬例，死亡病例在3000 例以上[2]。性生活開始的2 年內，超過50%的女性會感染人乳頭瘤病毒（HPV），且性生活頻率越高的女性感染率越高[3]。HPV 持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要和必需因素，與其相關的HPV 亞型高達100 余種[4]。較多研究認為宮頸癌是目前唯一有望消滅的惡性腫瘤。而臨床發(fā)現不同亞型HPV 導致宮頸細胞學異常的風險不同[5]。除HPV 感染外，微量元素等潛在危險因素也參與癌前病變及宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展[6]。本研究分析了不同宮頸疾病患者HPV 感染分型和血清微量元素水平，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017 年12 月～2018 年12 月河北省承德市中心醫(yī)院（以下簡稱為“我院”）收治的宮頸細胞學異常患者600 例作為研究組，年齡23～78 歲，平均（49.65±10.32）歲，妊娠（2.78±0.82）次；另取同期收治的慢性宮頸炎患者360 例作為對照組，年齡27～76 歲，平均（50.15±9.79）歲，妊娠（2.73±0.95）次。研究組納入標準：病理檢查明確診斷為宮頸細胞學異常者。排除標準：①術后行進一步補充治療者；②既往采用化療或放療治療者；③既往治療后未控制或復發(fā)者；④服用激素類藥物或避孕藥者；⑤合并其他惡性腫瘤者；⑥有金屬接觸史。對照組納入標準：①符合《中華婦產科學》[7]中慢性宮頸炎診斷標準者；②宮頸液基細胞學檢查未見異常者。排除標準：①無性生活史；②既往診斷為宮頸病變后接受治療者；③合并其他惡性腫瘤；④未服用激素類藥物或避孕藥者；⑤有金屬接觸史。兩組患者年齡及妊娠次數比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 實驗方案

1.2.1 HPV 分型檢測 標本采集前24 h 內禁止陰道內用藥或性生活，患者取截石位，充分消毒宮頸外口和外陰，將宮頸表面分泌物擦拭干凈，隨后用細胞刷在宮頸外口上方10～12 mm 處旋轉1 周，將細胞刷在采集管中洗脫，提取HPV-DNA，聚合酶鏈式反應（PCR）擴增基因，按HPV 核酸分型檢測試劑盒（上海透景生命科技股份有限公司，生產批號：20171132）說明書進行核酸分子快速雜交，檢測HPV6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83 等23 種亞型。

1.2.2 微量元素檢測 入組后24 h 內采集患者空腹靜脈血5 mL，血清分裝后，-20℃保存，按微量元素鑒定標準測定，標準品由國家標準物質檢測中心提供，檢測儀器為電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀（Integra XL）。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。多因素相關性分析采用Logistic 回歸分析，相關性分析采用Spearman 分析法。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者HPV 感染分型情況

研究組516 例（86.00%）患者為HPV 陽性，對照組162 例（45.00%）患者為HPV 陽性，兩組HPV 陽性率比較差異有統計學意義（χ2=182.311，P＜0.05）。研究 組 患 者HPV 類 型 為HPV18、16、31、33、52、58、59和HPV6，對照組患者HPV 類型為HPV33、52、58、66、68 和HPV6、11、43。研究組高危型HPV 陽性共452 例（87.60%），對照組高危型HPV 陽性共68 例（41.98%），兩組HPV 感染分型比較，差異有統計學意義（χ2=235.446，P＜0.05）。見表1。Spearman 相關性分析發(fā)現，宮頸細胞學異常與HPV 感染及高危型HPV 感染均呈正相關（r=0.403、0.468，P＜0.05）。

2.2 兩組患者感染情況

研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽率低于對照組，差異有統計學意義（χ2=135.776，P＜0.05）。見表2。

表1 兩組患者HPV 感染分型情況[例（%）]

表2 兩組患者感染情況[例（%）]

2.3 兩組患者血清微量元素比較情況

研究組血清鎘元素、鎳元素、砷元素、銅元素水平高于對照組，血清鋅元素和硒元素水平低于對照組，差異均有高度統計學意義（P＜0.01）。見表3。

表3 兩組患者血清微量元素比較（）

表3 兩組患者血清微量元素比較（）

2.4 Logistic 回歸分析結果

Logistic 回歸分析發(fā)現銅元素≥28.73 μmol/L是宮頸細胞學異常的獨立危險因素，而鋅元素≥71.96 μmol/L 和硒元素≥36.47 μg/L 對機體起到保護作用（P＜0.01）。見表4。

表4 Logistic 回歸分析結果

3 討論

本研究對960 例宮頸疾病患者HPV 感染分型進行觀察，結果發(fā)現共有678 例患者檢出HPV，陽性率為70.63%。同時發(fā)現，研究組HPV 陽性率高于對照組，提示宮頸細胞學異常與HPV 感染有關；研究組HPV 亞型以高危型為主，對照組以低危型為主；統計學分析也證實，研究組高危型HPV 陽性率高于對照組。Spearman 相關性分析發(fā)現，宮頸細胞學異常分別與HPV 感染及高危型HPV 感染呈正相關性，提示HPV 感染及高危型HPV 感染與患者發(fā)生宮頸細胞學異常密切相關[8]。

HPV 亞型高達100 余種，且各亞型間基本無交叉保護抗體，二重或多重感染在臨床上極為常見[9-10]。研究發(fā)現，研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽性率低于對照組。與Wentzensen 等[11]研究結果一致，宮頸病變患者多以高危HPV 亞型單一感染為主。研究組單一感染主要為高危HPV 亞型，占比高達85.13%，提示單純高危型HPV 感染導致宮頸細胞學異常的風險更高。也有研究認為高危型HPV 和低危型HPV 對宮頸致病的潛伏時間不同可能是導致多重感染與單一感染分布差異的重要原因[12]。

微量元素有助于維持機體各器官的正常運轉。微量元素處于健康濃度時，經相應的酶消除體內自由基；平衡狀態(tài)打破后，常導致正常細胞損傷及病毒感染[13]。鋅元素缺乏可引起外陰部、肛門及口眼等部位發(fā)生丘疹、發(fā)紅、濕疹；鐵元素缺乏可引起缺鐵性貧血。目前關于微量元素變化對宮頸細胞學異常的影響機制尚無定論。可以明確的是，微量元素對核酸和細胞的結構穩(wěn)定性、機體免疫力均有重要影響[14-15]。微量元素可能通過影響HPV 感染、機體免疫反應等過程影響宮頸細胞學異常的發(fā)生、發(fā)展。徐又先等[16]研究發(fā)現，年輕女性宮頸癌致病因素中，硒和鋅等微量元素水平低時效應微弱，一旦與高危型HPV 感染或其他強致癌因素結合時，將出現明顯增效作用。有研究發(fā)現，維吾爾族女性高危型HPV 感染率低于漢族女性，而宮頸癌發(fā)病率和病死率均顯著高于漢族婦女，推測與維吾爾族女性體內微量元素水平異常有關[17]。

本研究發(fā)現，銅≥28.73 μmol/L 是宮頸細胞學異常的獨立危險因素，而鋅≥71.96 μmol/L 和硒≥36.47 μg/L 對機體起到保護作用。銅是金屬酶的必要元素，介導神經、內分泌、呼吸等多個生理過程，對促進多種酶合成并維持其活性有著重要作用。目前已知卵巢癌、肝癌、胃腸道癌及乳腺癌等多種惡性腫瘤中銅元素均表現為異常增高，且隨病情惡性程度的增高而增高[18]。銅元素對DNA 的G-C 堿基對有直接破壞和致突變作用，也可產生自由基導致部分腫瘤抑制基因失活或消失，因此其水平異常增高可能導致宮頸細胞學異常的發(fā)生[19]。硒元素是自由基捕獲劑，有助于抑制致癌物引起的染色體斷裂。此外，硒元素對腫瘤細胞的增殖過程也有一定抑制作用[20]。HPV 感染率會隨著血清硒元素含量的升高呈現下降趨勢，兩者間存在劑量反應關系[21]。鋅元素是基因表達的關鍵元素，其含量降低可導致p53 基因等促腫瘤生物信號過表達，影響DNA 的完整性，進而促發(fā)腫瘤[22]。同時，鋅元素對T 細胞輔助因子合成過程具有抑制作用也可導致機體免疫監(jiān)視功能紊亂，無法逆轉癌變生物信號，導致腫瘤發(fā)生[23]。而鋅元素和硒元素血清水平增高時，以上癌變過程均可得到有效控制，提示鋅元素和硒元素血清水平增高是宮頸細胞學異常保護因素的主要原因。陶華等[24]的研究發(fā)現對高危型HPV 感染患者的全身血細胞和微量元素的變化檢測同時進行早期干預，可能是臨床上預防宮頸癌行之有效的方法。

綜上所述，宮頸疾病患者宮頸細胞學異常與HPV 感染分型、血清鋅、硒和銅元素水平異常密切相關，但宮頸細胞學異常與以上因素間的因果關系有待進一步研究。