細(xì)胞蠟塊在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值

王曉琳 王昭順 付振鵬

【摘 要】 目的： 探討細(xì)胞蠟塊在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)檢查中的應(yīng)用價(jià)值。方法：對(duì)3例IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎和5例非IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎的細(xì)針穿刺細(xì)胞進(jìn)行涂片并制作細(xì)胞蠟塊，通過免疫組織化學(xué)方法觀察分析IgG和IgG4的表達(dá)情況。結(jié)果：涂片中IgG及IgG4的表達(dá)均為陰性，非IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細(xì)胞蠟塊切片IgG及IgG4的表達(dá)均為陰性;IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細(xì)胞蠟塊IgG及IgG4均可見陽性表達(dá)，表達(dá)陽性細(xì)胞率分別為4%-7%和2%-3%。結(jié)論： 細(xì)胞蠟塊在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎的篩查中具有重要的診斷意義。

【關(guān)鍵詞】 ?細(xì)胞蠟塊;IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎;細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)

【中圖分類號(hào)】 R446.9 ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A ? ?【文章編號(hào)】1005-0019（2019）19-026-02 ?甲狀腺細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)檢查（fine needle aspiration FNAC）因其準(zhǔn)確、快速、方便、安全性高的特點(diǎn)，已廣泛用于臨床。細(xì)胞學(xué)檢查在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎（Hashimoto's thyroiditis，IgG4 HT）診斷中的應(yīng)用，目前未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)報(bào)道。此研究嘗試探討細(xì)胞蠟塊檢測在IgG4 HT診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 濰坊市中醫(yī)院2012-2018年因甲狀腺占位入院患者，選取超聲檢查考慮橋本甲狀腺炎，并且外周血TPOAb和TgAb升高，同時(shí)有FNAC、細(xì)胞蠟塊和術(shù)后常規(guī)病理資料的病例共8例。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)針吸取制片 10ml一次性干燥注射器（7號(hào)針頭）快速經(jīng)皮膚刺入腫塊，取部分吸出物制成涂片4張，95%酒精迅速固定，分別行HE和免疫組織化學(xué)染色。

1.2.2 細(xì)胞蠟塊制備 將針頭及針管內(nèi)剩余部分立即用4%甲醛20ml反復(fù)抽吸沖洗入50ml尖底塑料試管內(nèi)后，以3000 r/分鐘離心15分鐘;此時(shí)可見細(xì)胞小團(tuán)塊組織聚集在試管尖底部。用刀切取出細(xì)胞塊，再進(jìn)行常規(guī)固定、脫水、石蠟包埋及連續(xù)切片，行HE和免疫組織化學(xué)染色。

1.2.3 免疫組化試劑 選用邁新單克隆抗體IgG、IgG4，Envision二步法對(duì)常規(guī)涂片、細(xì)胞切片及術(shù)后常規(guī)切片進(jìn)行免疫組化染色，已知陽性片作陽性對(duì)照，PBS液替代一抗作陰性對(duì)照。

1.2.4 樣本分組并觀察分析 根據(jù)術(shù)后常規(guī)明確診斷，并分為IgG4 HT組和非IgG4 HT組，對(duì)比觀察涂片及細(xì)胞蠟塊切片中陽性細(xì)胞占全部細(xì)胞比例。

2 結(jié)果

HE染色制片，3例IgG4 HT及5例非IgG4 HT細(xì)胞學(xué)涂片中，可見極少或缺乏漿細(xì)胞。細(xì)胞蠟塊切片中，IgG4 HT組可見漿細(xì)胞存在，所占細(xì)胞百分比分別為5%、6%和8%，非IgG4 HT組漿細(xì)胞百分比均低于2%。術(shù)后組織切片中，IgG4 HT組可見多量漿細(xì)胞及淋巴細(xì)胞存在，漿細(xì)胞百分比分別為7%、7%和8%;非IgG4 HT組可見大量淋巴細(xì)胞及少許漿細(xì)胞存在，漿細(xì)胞百分比均低于3%。

免疫組化檢查，3例IgG4 HT及5例非IgG4 HT細(xì)胞學(xué)涂片中，IgG及IgG4表達(dá)均為陰性。細(xì)胞蠟塊切片中，IgG及IgG4陽性表達(dá)于漿細(xì)胞的胞膜和胞漿（圖3）。IgG4 HT組IgG陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比分別為4%、5%和7%，IgG4陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比分別為2%、3%和3%;非IgG4 HT組IgG及IgG4表達(dá)均為陰性。術(shù)后組織切片中，IgG4 HT組IgG陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比分別為5%、6%和7%，IgG4陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比分別為2%、3%和4%;非IgG4 HT組IgG及IgG4表達(dá)均為陰性。

3 討論

細(xì)胞蠟塊與傳統(tǒng)細(xì)胞涂片相比，細(xì)胞集中，背景清晰，清除部分血細(xì)胞及炎癥細(xì)胞，不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞重疊擁擠、厚薄不一的現(xiàn)象，在一定程度上，提高了細(xì)胞學(xué)診斷的陽性率。細(xì)胞蠟塊最大特點(diǎn)是標(biāo)本易于保存，可以連續(xù)切片，除常規(guī)細(xì)胞染色外，還可進(jìn)行免疫組織化學(xué)、免疫熒光、原位雜交及分子基因檢測等[1]，更好的滿足診斷需要。而傳統(tǒng)涂片免疫組化細(xì)胞成分復(fù)雜，有較強(qiáng)的非特異性背景著色，三維細(xì)胞團(tuán)易于抗體及探針的進(jìn)入，產(chǎn)生假陽性。同時(shí)脫落細(xì)胞有完整的細(xì)胞膜，雖經(jīng)乙醇固定，其胞膜上的類脂質(zhì)不能充分融解，影響試劑的滲透造成陽性細(xì)胞著色不良[2.3]，影響結(jié)果判斷。

有文獻(xiàn)認(rèn)為，由于甲狀腺穿刺樣品細(xì)胞量較少，因此，細(xì)胞蠟塊僅在6%-31%的甲狀腺病變中具有診斷價(jià)值[4]。回顧本組的制片和免疫組化情況，細(xì)胞蠟塊切片IgG和IgG4檢測的陽性率均明顯優(yōu)于FNAC涂片，定位準(zhǔn)確，顯示出較高的實(shí)用推廣價(jià)值。尤其是作為術(shù)前的檢測結(jié)果，對(duì)臨床治療方案的選擇具有一定意義，若能結(jié)合臨床特征及外周血IgG4檢測，指導(dǎo)意義更大，值得推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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