發酵中藥制劑對育肥豬肉品質、血清生化指標及免疫功能的影響

方磊涵,劉詩柱,王 留

(商丘職業技術學院，河南商丘476100)

中藥具有不易產生耐藥性，低或無殘留和毒性的飼料添加劑，在畜禽生產中得到了廣泛的應用[1]。尤其是隨著規模化、集約化養殖業的發展，為了減少疾病而大量使用抗生素導致畜產品中藥物殘留嚴重，進而影響著人們對健康畜產品的需求以及畜產品的出口貿易，在這種養殖和畜產品需求的矛盾中亟待尋求各類藥物的替代品以解決動物源食品安全問題[2]。眾所周知，中藥具有簡、便、廉、驗等特點，是我國具有國際優勢的潛在資源，并為中化民族提供了健康保障。

發酵是中藥材的傳統炮制方法之一，大量研究表明，經過微生物發酵后的中藥，有效成分含量升高，利于機體吸收利用，有增效減毒作用，可擴大治療范圍和藥物品種[3-4]。另外，發酵后的中藥，因療效增強，可明顯降低用量，節約養殖成本。發酵中藥作為一種新型功能性飼料添加劑，可提高動物生產性能和免疫功能及改善肉品品質，具有替代抗生素的潛力[5]。Ahmed等[6]用中藥石榴皮、銀杏葉、甘草組方發酵后飼喂育肥豬，可有效地提高其生產性能和免疫力，改善肉品質。崔艷紅等[7]研究表明，益生菌復合發酵飼料使仔豬營養素合成代謝能力增強，利于生長。本試驗選擇具有清熱解毒、燥濕，健脾理氣，殺蟲、消積導滯等功能的中藥組方，用乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌綜合發酵，以不同比例添加在育肥豬的飼料中，探討其對育肥豬肉品質、血液生化指標及免疫功能的影響，為中藥發酵制劑在生長育肥豬養殖中合理應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 未發酵中藥制劑和發酵中藥制劑 試驗用未發酵和發酵中藥制劑組方相同：黃芪4份、白術4份、秦皮3份、蒼術2份、黃連3份、何首烏2份、陳皮2份、焦三仙各3份、松針4份、貫眾1份。中藥均購自亳州中藥材專業市場。

未發酵中藥制劑：將以上藥物除去雜質，烘干，按比例充分混合均勻后粉碎，過80目篩于干燥處密封保存備用。

發酵中藥制劑：將以上12味中藥，按照孫曉燕等[8]方法制作。中藥烘干，粉碎過60目篩，混合均勻，用活化計數后的復合益生菌(乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌，按1∶1∶1的比例混合)接種(總接種量為12%)于粉碎的中藥中，放入發酵罐中發酵72 h(溫度為30 ℃～37 ℃，濕度為70%～80%)。將上述發酵產物烘干(濕度控制在60 ℃～80 ℃)后即得發酵中藥制劑，備用。

1.2 試驗動物與分組處理 選擇60頭日齡、體重相近的三元雜交(杜×長×大)生長育肥豬(商丘鳳飛種豬場提供)，隨機分為5組，4個重復，每個重復3頭。對照組(基礎日糧)，試驗Ⅰ組(基礎日糧+2%未發酵中藥制劑)，試驗Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組(基礎日糧+1%、1.5%或2%發酵中藥制劑)，預試期3 d，正試期37 d。

1.3 基礎日糧 基礎日糧為玉米-豆粕型日糧，按照 NRC(2012)育肥豬營養需要標準配制，基礎日糧組成及營養水平見表 1。

表1 日糧配方及營養水平

* : 預混料配方見表2；營養成分含量為計算值

表2 預混料配方(每千克日糧提供)

1.4 飼養管理 試驗期間各組飼養管理條件一致，自由采食和飲水，所有豬只采用單籠飼養，每天飼喂 3次，飼喂時間分別為7:00、14:00 和20:00，飼喂量以料槽內略有剩余為標準。每天進行圈舍清潔和消毒，并保持舍內通風和干燥，保持圈舍清潔衛生。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 肉品質檢測 方法參見文獻[9]。活豬屠宰后，分割胴體，取左側胸椎至第六腰椎的背腰最長肌作為樣本，置于 4 ℃冰箱中待測。分別測定樣本的 pH 值( pH值45 min、pH值24 h )、肉色(亮度L*、紅度a*和黃度b*)、滴水損失、剪切力、失水率、背膘厚度和眼肌面積。

1.5.2 血液生化指標測定 試驗結束后，對所有試驗豬禁食12 h，耳緣靜脈采血5 mL，靜置2 h析出血清后, 3 000 r/min離心15 min，制備血清樣品。用半自動生化分析儀測定總蛋白( TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、尿素氮(BUN)、谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、血糖(GLU)、甘油三脂(TG)、總膽固醇(GHO)的含量(商丘市第四人民醫院檢測)。

1.5.3 血清免疫球蛋白指標測定 運用免疫比濁法測定血清中免疫球蛋白(IgG 、IgA、IgM)的含量。

1.6 數據統計分析 采用 SPSS19.0軟件對試驗數據進行統計學分析，各組間的差異顯著性檢驗采用單因素方差(One-Way ANOVA)分析，LSD法多重比較，P<0.05為差異顯著，結果以平均數±標準誤差(X±SD)表示。

2 結果與分析

2.1 發酵中藥制劑對育肥豬肉品質的影響 由表3可知，與對照組相比，試驗各組的豬背長肌肉中的pH值45 min和pH值24 h值均有不同程度的下降，但差異不顯著(P>0.05)；試驗Ⅲ、Ⅳ組肉色的紅度值顯著高于對照組(P<0.05)；試驗Ⅲ組的剪切力明顯低于對照組、試驗Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05)與試驗Ⅳ組差異不顯著(P>0.05)；試驗各組的眼肌面積值與對照組相比均有顯著的增加(P<0.05)，試驗Ⅲ組最高，與試驗Ⅳ組相當，4個試驗組之間差異不顯著(P>0.05)；發酵中藥制劑對育肥豬肉的L*和b*、滴水損失、背膘厚度無顯著影響(P>0.05)。

2.2 發酵中藥制劑對育肥豬血清生化指標的影響 由表4可知，試驗各組豬血清中的總蛋白和堿性磷酸酶含量顯著高于對照組(P<0.05)，試驗Ⅲ組最高，但與試驗Ⅳ組之間差異不顯著(P>0.05)；試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組總膽固醇含量顯著低于對照組、試驗Ⅰ、Ⅱ組(P<0.05)；其余各項血液生化指標各組間差異均不顯著(P>0.05)。

表3 發酵中藥制劑對育肥豬肉品質的影響

表中數據右上角標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下表同

表4 發酵中藥制劑對育肥豬血清生化指標的影響

2.3 發酵中藥制劑對育肥豬血清免疫球蛋白的影響 由表5可知，試驗各組血清中lgA的含量與對照組相比均有顯著的提高(P<0.05)，試驗Ⅲ組最高，與試驗Ⅳ組差異不顯著(P>0.05)，但均顯著高于試驗I組和試驗II組(P<0.05)；試驗Ⅲ組lgG的含量顯著高于對照組、試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組(P<0.05)，與試驗IV組無顯著差異(P>0.05)；發酵中藥制劑對豬血清中lgM的含量沒有明顯影響。

表5 發酵中藥制劑對育肥豬血清免疫球蛋白的影響

3 討論

3.1 發酵中藥制劑對育肥豬肉品質的影響 肉色、嫩度(剪切力)、pH值、滴水損失、系水力、口感風味等是評價豬肉感官品質的主要指標[10]。 pH值作為評定豬肉品質的關鍵指標，也是反映動物宰后肌糖原酵解速度和強度的指標，直接影響肌肉的嫩度、滴水損失和色度。一般情況下，正常豬肉的pH值為6.0～6.5，如果屠宰后肌肉 pH 值下降過快會導致豬肉色澤蒼白或深暗，pH值>7.0時鮮味消失而影響豬肉品質[11]。滴水損失是反映豬肉系水力的重要指標之一，其指標高低可影響到肉品質地、風味及組織狀態，它的值越小表明系水力越高，肉品質越好[12]。肉的顏色也是肉質和肉品衛生檢驗的一項重要指標，雖然肉色與食用品質(嫩、味、汁)沒有直接關系，但具有重要的商業意義。嫩度是人們對肌肉口感滿意程度的一個重要指標，直接影響著肉的食用價值和商品價值，它反映了肉中肌原纖維、結締組織及肌肉脂肪的含量、分布和化學結構狀態，肌束中的肌纖維越多越細，肉越嫩，并且肌間脂肪與嫩度成正比[13]。李婉濤等[14]研究表明，杜仲和桑葉提取物能減慢豬屠宰后肌肉pH值的下降速度，降低滴水損失和背膘厚。李濤[15]、徐秀景等[16]利用乳酸桿菌發酵飼料飼喂育肥豬后，豬肉亮度(L*值)和紅度(a*)均高于對照組，改善了豬肉顏色，降低了剪切力，增加了肉的嫩度。本試驗取得了類似結果，隨著發酵中藥制劑添加水平的增加，剪切力明顯降低，肉色有所改善，眼肌面積增加，表明育肥豬日糧添加發酵中藥制劑能改善豬肉的顏色和嫩度，提高肉品質。

3.2 發酵中藥制劑對育肥豬血清生化指標的影響 通過血液生化指標測定可以間接了解動物機體功能狀態、營養代謝水平和生產性能。

血清中的總蛋白、白蛋白和球蛋白可反映動物對蛋白質的消化吸收程度，維持機體膠體滲透壓，蛋白質的含量升高，其機體免疫力也會相應提高，機體營養水平得到增強，可以提高機體抵御外界不良環境影響的能力[16]。侯海鋒等[17]利用發酵的中藥渣添加在豬的日糧中，血清中的總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的含量顯著提高。通過試驗發現，在豬飼料中添加發酵的中藥在一定程度上能夠提高豬血清中總蛋白和白蛋白的含量。鄒志恒等[18]研究表明，復方中藥發酵制劑能促進斷奶仔豬體內蛋白合成，血清中的總蛋白、白蛋白和球蛋白的含量明顯高于對照組。本試驗中試驗組的血清總蛋白有顯著的提高，原因可能是中藥發酵飼料促進了豬機體蛋白質的合成。血清中的尿素氮值能準確反映動物體內蛋白質代謝與氨基酸的平衡狀況，血清尿素氮值較低表明氨基酸平衡良好，蛋白質合成率高。孟祥宇[19]在豬飼料中添加復合益生菌制劑，結果表明，復合益生菌的添加對豬血漿中尿素氮的含量沒有影響。趙香菊等[20]研究表明，留蘭香莖葉粉可使豬血液中尿素氮有下降的趨勢。本試驗中，發酵中藥制劑的添加對豬血漿中尿素氮的含量沒有明顯的影響。血清中AST和ALT的活性變化是反映肝功能是否正常的重要指標；ALP的含量變化不僅能表現出成骨細胞活性，也能反映出骨骼的生長發育是否旺盛。嚴念東等[21]證明了益生菌發酵飼料能顯著提高仔豬血液中堿性磷酸酶的活性。孟祥宇[19]研究表明，在豬的日糧中添加復合微生物制劑，血液中的堿性磷酸酶的含量會顯著上升。本試驗結果與上述研究結果相一致。血液甘油三脂和膽固醇含量可以反映體內脂類代謝的情況和日糧能量水平的高低；血糖水平主要反映機體碳水化合物代謝是否正常。蓋麗婷等[22]將夜交藤用于仔豬的飼料中，各組血清中甘油三酯、總膽固醇含量沒有顯著性變化。彭宏剛[23]試驗結果表明，APS可使育肥豬血清中的甘油三脂、總膽固醇含量降低。本試驗發酵中藥制劑1%和1.5%劑量組豬血清中總膽固醇的含量下降較為顯著；試驗各組的甘油三脂和血糖沒有明顯的變化。

本試驗結果顯示，育肥豬飼料中添加發酵中藥制劑后，血液中白蛋白和球蛋白、尿素氮、谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶、葡萄糖及甘油三脂等生化指標沒有明顯的變化，表明發酵中藥制劑對豬的心臟和肝臟沒有影響。其中試驗各組血液中總蛋白含量、堿性磷酸酶活性顯著提高，降低膽固醇含量，以發酵中藥制劑中(1%)、高(1.5%)劑量組效果最好。說明飼喂發酵中藥制劑后，對蛋白質的代謝和氮沉積有一定的增強作用，對豬的骨骼發育也起到一定的幫助作用，有利于豬的生長，提高豬抵御外界不良環境影響的能力。

3.3 發酵中藥制劑對育肥豬血清免疫球蛋白的影響 豬血清中免疫球蛋白是體液免疫的主要活性成分，可以反應其免疫能力的高低，免疫球蛋白含量水平可判斷豬抵抗外界病原體侵襲能力的高低[24]。IgG 是血清中含量最多，是抗感染的主力；IgA在維持黏膜上皮表面完整性和功能方面有重要作用，發揮著抗菌、抗病毒的作用；IgM是一種高效能抗體，在機體的免疫防護中占有重要地位[25]。對免疫球蛋白水平的檢測通常是衡量機體免疫狀況的常用指標。武洪志等[26]在仔豬的日糧中添加以蒼術、黃柏和白術組成發酵復方中藥，可顯著提高仔豬血清中IgA、IgG 和IgM的含量，增強仔豬免疫力。龔澤修等[27]在生長豬基礎日糧上添加了0.15%益生菌和0.04%玉屏風散多糖，進行了兩個階段的試驗(第一階段：1～30 d，第二階段：31～60 d)，結果表明，在兩個階段中IgG和IgA的含量顯著高于對照組(P<0.05)，益生菌和玉屏風散多糖均能夠提高豬的免疫能力。本試驗結果與上述試驗相一致，在育肥豬飼料中添加中藥復方發酵制劑，各組血清中lgA和lgG的含量與對照組相比均有顯著的提高，其中以試驗Ⅲ組最高。說明添加發酵中藥制劑對豬免疫能力有一定提高，效果好于中藥復方制劑。

4 結論

在育肥豬日糧中添加不同劑量的中藥復方發酵制劑可改善肉品質，增強蛋白質的代謝和氮沉積作用，提高豬的免疫能力，效果好于中藥復方制劑，尤其是1.5%和2%劑量添加效果最好，且日糧中添加以1.5%發酵中藥制劑為最佳。