采用“自上而下”方法評定11項生化檢測指標的測量不確定度

黃羽萍

摘?要：采用自上而下法（Top-Down 法）對實驗室11項生化檢驗項目進行測量不確定度評定。方法：收集本室2018年3月至2018年8月之間的生化室內質控數據，和2017年至2018年參加衛生部臨檢中心連續6次的室間質評回報結果，采用Top-Down 法評定葡萄糖（Glu）、尿素（Urea）、尿酸（UA）、肌酐（Cr）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（TG）、甘油三酯（TC）、總膽紅素（T-Bil）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）以及天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）11項生化項目的測量不確定度。結果：由羅氏c501生化分析儀檢測Glu、Urea、UA、Cr、TP、ALB、TG、TC、T-Bil、ALT、AST11項生化指標，合成相對擴展標準不確定度U（%）分別為3.11%、6.69%、1047%、11.84%、4.43%和5.70%，7.04%、8.78%、10.36%、4.68%和7.02%均符合WS/T 403-2012 要求的目標擴展不確定度。結論：本實驗室11項生化檢測項目通過Top-Down法評定測量不確定度結果均為符合。

關鍵詞：測量不確定度;生化;評估

測量是通過實驗獲得并合理賦予某物一個或多個量值的過程，臨床檢驗中的測量就是對臨床標本的特性進行賦值，其賦值準確與否將直接影響疾病診斷及治療。目前，賦值的準確與否常用測量不確定度表示，測量不確定度是表征合理的賦予被測量值的分散性，與檢測的準確度呈負相關。[1]測量不確定度的測量有兩種模型：“自下而上（bottom-up）”和“自上而下（up-bottom）”，“自下而上”是基于對測量不確定度來源進行綜合分析，并分別評定各不確定度分量，然后進行合成，而“自上而下”是使用統計原理直接估計總不確定度，本文采用“自上而下”模型，引入實驗室日常質控數據及室間質評計算測量不確定度，并將其與目標不確定度進行比較，以確保本實驗室賦值準確可靠。

1 材料與方法

1.1 室內質控數據

收集本室2018年3月至2018年8月之間的生化室內質控數據，判斷該時間段內各項質控品批號一致，室內質控每日進行 1 次，遵守westgard六個基本質控規則。

1.2 室間質評數據

采用實驗室2017年至2018年參加衛生部臨檢中心連續6次的室間質評回報結果。

1.3 儀器與試劑

主要儀器為羅氏501全自動生化測定儀，試劑均為羅氏配套試劑，包括：葡萄糖（Glu）方法為己糖激酶法;尿素（Urea）方法為脲酶紫外速率法;尿酸（UA）方法為尿酸酶比色法;肌酐（Cr）方法為酶法;總蛋白（TP）方法為雙縮脲終點法;白蛋白（ALB）方法為溴甲酚綠法;總膽固醇（TG）方法為膽固醇氧化酶法;甘油三酯（TC）方法為GPO-POD（紫外），總膽紅素（T-Bil），方法為礬酸鹽法，丙氨酸氨基轉移酶（ALT）;天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）方法為速率法。

1.4 試驗程序

（1）確保儀器處于良好的性能，儀器每年由廠家校準，由實驗員和廠家定期維護保養，實驗員儀器操作遵循羅氏公司的用戶手冊;（2）按照實驗室SOP進行日常室內質控和室間質評操作。

1.5 測量不確定度計算

偏移（系統誤差）和實驗室內測量復現性（隨機誤差）是醫學實驗室分析（測量）過程測量不確定度的最重要的兩個分量。

（1）不精密度分量計算：由實驗室連續6個月的室內質控數據引入，因本實驗室室內質控所使用的質控品與常規樣本檢測流程一樣，表達類似基體，則根據質控數據計算出來的標準偏差就是實驗室內測量復現性，其計算公式為：

u（Rw）=s（Rw）=∑ni=1（xi-x-）2n-1

x-=∑ni=1xin

urel（Rw）=RSD（Rw）=s（Rw）|x-|×100%

其中：xi：單個測量值;

x-：平均值;

n：測量次數;

u（Rw）：實驗室內測量復現性引入的測量不確定度;

s（Rw）：實驗室內測量復現性;

RSD（Rw）：相對的實驗室內測量復現性;

urel（Rw）：實驗室內測量復現性引入的相對測量不確定度。

（2）偏倚分量計算：由實驗室6次參與衛生部臨床檢驗中心 EQA 回報結果計算。其包含偏倚本身和室間質評靶值不確定度，其計算為：

①偏倚本身不確定度計算：

b=∑bi（%）26，bi（%）=xi-xtarget（i）xtarget（i）×100%

b：6次室間質評總相對偏移;

bi（%）：每次室間質評的相對偏移;

xi：實驗室每次室間質評的值;

xtarget（i）：每次室間質評給定靶值。

②室間質評靶值不確定度計算：

utarget=∑utarget/6，utarget（i）=cvi/Ni

utarget：連續6次室間質評靶值不確定度;

utarget（i）：每次室間質評不確定度;

cvi參加室間質評的所有實驗室的組內的變異系數;

Ni 代表參加室間質評實驗室個數。

③偏倚引入測量不確定度為：

ubias，rel（%）=b2+utarget2

（3）合成相對標準不確定度：

uc=urel（Rw）2+ubias，rel（%）2

（4）計算相對擴展標準不確定度：

U（%）=uc（%）×2，取K=2，95%可信區間。

2 結果

（1）本實驗室12項生化檢測項目的合成相對標準不確定度、相對擴展標準不確定度及與目標不確定度結果（目標不確定度來源于WS-T403-2012）比較如下表：

（2）由上表可知通過選擇室內質控數據作為不精密度來源，室間質評數據作為偏倚來源，用Top-Down 法評定本室11項生化項目的測量不確定度均符合WS-T403-2012要求。

3 討論

測量結果準確與否是醫學實驗室的根本之基，臨床生化更應該保證患者結果的可追溯性和最高可參考性，[2]測量不確定度是客觀反映測量結果是否可靠的重要數據，GUM《測量不確定度表述指南》中建議采用“模式辦法”評估不確定度，[3]但該方法需了解測量過程中每個不確定度來源，而“自上而下”法，較GUM推薦的模式方法簡單易行，更易在醫學實驗室使用推廣，[4]加之計算方法簡單，所利用的“室內質控和室間質評”數據能夠真實反映實驗室內測量不確定度，[5]因此，本實驗室采用“自上而下”模型，引入實驗室質控數據及連續6次室間質評計算測量不確定度，并將其與目標不確定度進行比較，結果均滿足要求，初步評定本實驗室賦值準確可靠。

參考文獻：

[1]Fuentes Arderiu X.Uncertainty of measurement in clinical laboratory sciences[J].Clin Chem，2000，46（9）：1437-1438.

[2]White G H.Metrological traceability in clinical biochemistry[J].Ann Clin Biochem，2011，48（5）：398-409.

[3]International Organization For Standardization.ISBN92-67-10188-9.ISO guide to the expression of uncertainty in measurement.Geneva：ISO，1995.

[4]王前明，宋秀宇，洪強.“自上而下”方法在評定生化檢測指標測量不確定度中的應用[J].國際檢驗醫學雜志，2014，35（9）：1170-1171.

[5]張曉紅，魯辛辛.依據Nordtest 準則評估測量不確定度更適合于臨床實驗室[J].中華檢驗醫學雜志，2012，35（5）：404-406.