天津地區奶牛乳房炎致病菌流行狀況調查

文/董 永 仇普斌 郝東升 任 妮

（嘉立荷牧業集團有限公司）

奶牛乳房炎是牧場的三大疾病之一，一直是困擾奶牛養殖業的世界性難題，每年給奶牛養殖業造成巨大的經濟損失[1～3]。引起奶牛乳房炎的致病菌有200 余種，最主要的致病菌包括金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、環境性鏈球菌（停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、糞腸球菌等）、凝固酶陰性葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯菌等[4]。受地域、氣候、季節、墊料方式、養殖規模、管理模式等多種因素的影響[5]，引起奶牛乳房炎致病微生物的種類各異。根據多個國家對臨床型乳房炎致病菌流行狀況的調查和報道數據顯示，不同國家、地區間流行的乳房炎致病菌存在很大差異。例如，在挪威和瑞典，臨床型乳房炎最常見的致病菌為金黃色葡萄球菌，停乳鏈球菌和大腸桿菌居于次位；在荷蘭，大腸桿菌性臨床型乳房炎最常見，肺炎克雷伯菌引起的乳房炎較少；而在美國，引起乳房炎最常見的致病菌是大腸桿菌和肺炎克雷伯菌；在新西蘭，乳房鏈球菌是引起乳房炎（包括臨床型和隱性乳房炎）的最主要致病菌，大腸桿菌性臨床型乳房炎較為少見。

掌握乳房炎致病菌的發病規律，牧場可以根據病原菌特點，判斷屬于傳染性還是環境性，使其在評估高發風險因素時有的放矢，選擇性淘汰高風險傳染源；亦可對執行的治療方案進行評估，及時調整。例如，出現大量某種抗生素的耐藥基因時，可及時調整抗生素的使用類型。本文對天津地區乳房炎致病菌的流行情況進行調查，以對現階段的致病菌特點進行宏觀的了解，并對在不同區域、不同管理模式下的乳房炎發生情況進行對比和剖析。

表1 牛奶樣品類型與數量

表2 檢測指標

表3 2017—2018年檢測指標檢出率

1 材料與方法

1.1 樣品來源與數量

牛奶樣品來自天津地區各牧場的臨床型乳房炎奶樣、亞臨床型乳房炎奶樣以及大罐奶型奶樣，類型和采樣數量見表1。

1.2 樣品采集

1.2.1 樣品采集標準

采集對象是上市大罐奶、臨床型和亞臨床型乳房炎患病牛，包含乳房腫脹、產量降低、水樣乳、血乳或乳汁成絮狀以及體細胞數檢測＞50×104個/mL的樣品。

1.2.2 樣品采集方法

樣本采集要求無菌，乳房炎患病牛嚴格按照擠奶程序，采集棄掉前三把奶后的乳汁3 m L[6]，自然脫杯后再采集3 mL乳汁混合于無菌容器內，置-20 ℃保存。

1.3 檢測方法

1.3.1 檢測設備

恒溫擴增微流控芯片核酸分析儀（晶芯?RTisochip TM-B）、微型分光光度計（晶芯NanoQ?）、奶牛乳房炎致病微生物快速檢測試劑盒（晶芯）。

1.3.2 檢測指標

試驗檢測指標16 項，詳見表2。

2 試驗結果

2.1 致病菌流行情況

2017—2018年共檢測樣本516個，檢測結果為陽性的樣本共計415 個，陽性率80.43%，主要致病微生物及β-內酰胺類、甲氧西林的耐藥基因檢出率見表3。

表4 2018年與2017年檢測指標檢出率對比

檢測結果顯示，引起天津地區奶牛乳房炎發病率最高的微生物為乳房鏈球菌，其次為牛支原體、牛棒狀桿菌、大腸桿菌，發病比例均＞15.00%，無乳鏈球菌和肺炎克雷伯氏菌的發病率接近10.00%，而耐β-內酰胺類基因和耐甲氧西林葡萄球菌2 個耐藥基因合計為11.24%。

2.2 2017—2018 年 流 行 情況對比

2018年與2017年奶牛乳房炎致病菌流行情況對比發現，差異顯著的指標為牛支原體發病率降低13.80 個百分點，牛棒狀桿菌降低10.93 個百分點，無乳鏈球菌降低7.37 個百分點，而耐藥基因增加6.43 個百分點，其中耐甲氧西林葡萄球菌增加7.05 個百分點（表4）。

3 分析與討論

乳房炎是困擾奶牛養殖行業的重大問題，受地域、氣候、季節、墊料類型、養殖規模、管理模式等多種因素的影響，因此引起奶牛乳房炎致病微生物的種類各異。國內外研究發現，引起乳房炎的主要致病微生物是金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌，占90%以上[7，8]。本研究發現，引起天津地區奶牛乳房炎發病比例最高的致病微生物是乳房鏈球菌，與其他研究結果一致。

由于在奶牛乳房炎臨床治療過程中不合理地使用抗生素，導致了乳房炎致病菌出現嚴重的抗生素耐藥現象。蘇洋等[9]研究結果顯示，在內蒙古地區，金黃色葡萄球菌乳房炎對青霉素的耐藥率高達94.74%。而本研究發現，在僅檢測2 個耐藥基因的情況下，耐藥性比例高達11.24%，并且2018年相較2017年耐藥性呈現顯著上升趨勢，導致近年來乳房炎的治療效果不佳，治愈率降低，因乳房炎造成的奶牛淘汰率也隨之增加。因此，在臨床治療上，只有結合致病菌的分離鑒定和藥敏試驗指導牧場用藥，加強抗生素使用的管理，注意輪換用藥、交叉用藥，才能快速、準確地提高治療效果，減少耐藥性的產生。