齊墩果酸抑菌活性的初步研究

黑育榮 劉彥超

【摘? ?要】 以20種植物病原菌為供試菌種，采用離體抑菌活性測(cè)定法系統(tǒng)地測(cè)定了齊墩果酸的抑菌譜和抑菌毒力。結(jié)果表明，齊墩果酸對(duì)多種植物病原菌具有抑制作用，對(duì)油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、煙草赤星病菌、白菜黑斑病菌、楊樹(shù)潰瘍病菌、棉花黃萎病菌和小麥赤霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果高于對(duì)其它供試病原菌，其中對(duì)番茄早疫病菌和白菜黑斑病菌防效最高，其有效中濃（EC50值）分別為59.3和74.0mg L-1。本研究結(jié)果為將齊墩果酸開(kāi)發(fā)為植物原殺菌劑提供了一定的理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 齊墩果酸;植物病原菌;抑菌譜;植物源殺菌劑

齊墩果酸（oleanolic acid，簡(jiǎn)稱(chēng)OA），屬于五環(huán)三萜類(lèi)化合物，化學(xué)名稱(chēng)3β-hydroxy-olea-12-en-28-oic acid，在多種植物中以游離體和配糖體的形式存在 [1]。

以往對(duì)于齊墩果酸的研究都在于醫(yī)藥和醫(yī)用方面進(jìn)行的較多[2-3]，相比之下，對(duì)其農(nóng)藥學(xué)活性的測(cè)定較不多見(jiàn)。僅有的農(nóng)藥學(xué)活性還主要集中在其殺蟲(chóng)活性[4]。本實(shí)驗(yàn)就從其農(nóng)藥抑菌活性入手，進(jìn)行農(nóng)藥菌種活性篩選，測(cè)定OA的抑菌譜，為開(kāi)發(fā)出新型高效的殺菌農(nóng)藥和為下一步對(duì)OA進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和衍生物的合成等試驗(yàn)提供參考資料和奠定基礎(chǔ)。

1? 材料與方法

1.1? 供試菌株

20種植物病原菌菌株（見(jiàn)表1）均由西北農(nóng)林科技大學(xué)無(wú)公害農(nóng)藥研究服務(wù)中心提供。

1.2? 供試藥劑

齊墩果酸（98%）（安耐吉化學(xué)試劑公司），50%速克靈可濕性粉劑（奧邦生物科技（北京）有限公司）

1.3? 培養(yǎng)基

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基（PDA培養(yǎng)基）。

1.4? 抑菌活性測(cè)定方法

1.5? 數(shù)據(jù)處理方法

測(cè)定所得數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)間多重比較采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 齊墩果酸的抑菌譜的確定

由表1可知，齊墩果酸對(duì)多種植物病原菌具有抑制作用，但其抑菌效果并不理想，抑菌譜較窄。100mg/L的供試濃度下，對(duì)20種病原菌的抑制率都普遍不高，其中對(duì)玉米大斑病菌、蘋(píng)果輪紋病菌 、水稻稻瘟病菌、黃瓜炭疽病菌、棉花立枯病菌、黃瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、小麥根腐病菌、辣椒疫霉病菌、蘋(píng)果腐爛病菌、小麥紋枯病菌的抑制率都在30%以下，對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌則完全無(wú)效。但對(duì)于小麥赤霉病菌、煙草赤星病菌、油菜菌核病菌、棉花黃萎病菌、番茄早疫病菌、楊樹(shù)潰瘍病菌、白菜黑斑病菌防效在40%以上，其中最高為對(duì)番茄早疫病菌抑制率為77.42%，對(duì)白菜黑斑病菌和油菜菌核病菌也有較好的防治效果。而當(dāng)供試濃度降至50mg/L時(shí)，齊墩果酸對(duì)番茄早疫病菌、油菜菌核病菌的抑制率仍高于30%，但對(duì)其他大多數(shù)菌種幾乎都未表現(xiàn)出明顯抑制效果，尤其對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌、小麥根腐病菌和黃瓜炭疽病菌抑制率為0。齊墩果酸分別在50mg/L和在100mg/L濃度下對(duì)煙草赤星病菌、小麥赤霉病菌、棉花黃萎病菌、番茄早疫病菌、楊樹(shù)潰瘍病菌、白菜黑斑病菌等6種病原菌的抑制作用。

2.2? 齊墩果酸對(duì)6種病原菌的抑制毒力測(cè)定

在對(duì)齊墩果酸進(jìn)行抑菌譜測(cè)定的基礎(chǔ)上，測(cè)定了其EC50值，由表2可見(jiàn)，齊墩果酸對(duì)番茄早疫病菌的毒力最高，EC50為59.3 mg L-1;對(duì)白菜黑斑病菌和煙草赤星病菌的毒力次之，EC50分別為74.0和94.8mg L-1;而對(duì)棉花黃萎病菌、楊樹(shù)潰瘍病菌和小麥赤霉病菌的毒力較差，EC50分別為111.3、 108.1和115.8mg/L。由此可以看出，齊墩果酸對(duì)于番茄早疫病菌和白菜黑斑病菌在適當(dāng)濃度內(nèi)具有一定的防效，有必要對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后在進(jìn)行進(jìn)一步的活性測(cè)定，以篩選出活性更高的衍生物。

3? 討論

本研究表明齊墩果酸對(duì)多種植物病原菌具有抑制作用，尤其對(duì)于番茄早疫病、白菜黑斑病等6種菌株具有較明顯的抑制作用。五環(huán)三萜具有廣泛的抑菌活性，對(duì)其進(jìn)行抑菌活性研究，可望發(fā)現(xiàn)新的抑菌先導(dǎo)物。

以往對(duì)齊墩果酸的研究多在于消炎、免疫抑制[5]、抑制血小板凝集、降糖[6]、抗氧化[7]和利尿[8]等，及護(hù)肝[9]、抗高血脂[10]、抗動(dòng)脈粥樣硬化[11]、抗腫瘤[12]等，對(duì)其農(nóng)用活性關(guān)注甚少。本實(shí)驗(yàn)從農(nóng)用抑菌活性入手，測(cè)定了其殺菌譜，為下一步對(duì)它進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和衍生物的合成等試驗(yàn)提供參考資料和奠定基礎(chǔ)。

齊墩果酸在植物界分布廣泛，這為研究并開(kāi)發(fā)齊墩果酸的農(nóng)用抑菌活性提供了必要的原料來(lái)源。近年來(lái)，為了進(jìn)一步增強(qiáng)齊墩果酸的生物活性，改善溶解性，提高生物利用度，對(duì)齊墩果酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)修飾與構(gòu)效關(guān)系的研究也引起人們的普遍關(guān)注。以五環(huán)三萜為活性先導(dǎo)物，研究其化學(xué)結(jié)構(gòu)與生物活性的關(guān)系，是研制新型農(nóng)用殺菌劑的一條有效途徑。