禽流感病毒的免疫研究進(jìn)展

陳志雄 姜平 趙志輝

摘 要 禽流感（Avian Influenza， AI）是由A型流感病毒引起的一種急性的禽類傳染病。1878年首次在意大利發(fā)現(xiàn)該病后，慢慢從世界各地都開(kāi)始出現(xiàn)了各種由不同毒株而引起的禽流感，導(dǎo)致禽類生產(chǎn)性能顯著降低，甚至引起死亡。禽流感病毒（Avian Influenza Virues， AIV）的暴發(fā)和流行給人類和家禽業(yè)都帶來(lái)了巨大的健康危害及經(jīng)濟(jì)損失，有研究發(fā)現(xiàn)，不同種類的家禽對(duì)于相同亞型的AIV會(huì)產(chǎn)生不同的致病性，導(dǎo)致不同的臨床表現(xiàn)。AIV的亞型較多，并且不同亞型之間也沒(méi)有交叉防護(hù)作用，阻礙了AI的防治進(jìn)程。基于此，為有效應(yīng)對(duì)禽流感病毒，分析禽流感病毒的免疫研究進(jìn)展。

關(guān)鍵詞 禽流感病毒;致病性;免疫

中圖分類號(hào)：S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.18.080

1 禽流感的研究進(jìn)展

禽流感（Avian Influenza， AI）是由A型流感病毒引起的一種急性禽類傳染病，主要發(fā)生在家禽和野鳥之間，存在多種表現(xiàn)形式，常見(jiàn)的臨床癥狀有輕度上呼吸道感染以及急性致死等，高致病性AI被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織確定為A類急性傳染病，我國(guó)也將其列為一類動(dòng)物疫病[1-2]。

1.1 AI的發(fā)現(xiàn)

1878年，Perroncito[3]首次報(bào)道在意大利雞群中暴發(fā)AI的情況，最初懷疑是雞瘟病毒，而在1901年，Centannic和Sarunozzi[4]兩位研究者分離了該病的病原并對(duì)該病原進(jìn)行了詳細(xì)描述，直到1955年，Schafer[5]證實(shí)這種疑似雞瘟的病原實(shí)際上就是現(xiàn)在的A型流感病毒。

1.2 AI的分布

AI在世界上分布廣泛。美國(guó)就曾多次發(fā)生AI，造成大范圍的禽類死亡和經(jīng)濟(jì)損失。1983年，美國(guó)賓夕法尼亞一產(chǎn)蛋雞群突然死亡，且死亡率較高，經(jīng)診斷和病毒分離鑒定后，確定為AI H5N2亞型[6]。澳大利亞歷史上發(fā)生過(guò)多次嚴(yán)重的AI，主要發(fā)生于二十世紀(jì)八九十年代，大多是由H7亞型的禽流感病毒（Avian Influenza Virues， AIV）引起的[7-8]。墨西哥在1994—1995年暴發(fā)了一次嚴(yán)重的H5N2亞型AI，席卷12個(gè)州的大、中、小型禽場(chǎng)，范圍較大且死亡嚴(yán)重[9]。英國(guó)在20世紀(jì)20年代也曾發(fā)生過(guò)AI，但以1979年暴發(fā)的火雞流感最為嚴(yán)重，共有16個(gè)牧場(chǎng)中發(fā)病的火雞全部被捕殺[10]。1992年陳伯倫等[1]首先在我國(guó)華南地區(qū)某雞群中分離到一株低致病力的AIV H9N3。1997年陳福勇等[11]從北京某雞場(chǎng)分離到H9N2毒株。1998年唐秀英等[12]報(bào)道從四川某禽群中分離到H4N6和H9N2以及H5N1病毒株。AI具有廣泛流行、病毒亞型多、變異率較高、傳染性強(qiáng)的主要特性，給許多國(guó)家都造成了重大損失。因此，控制AI的發(fā)生是全人類的共同目標(biāo)。

2 AIV的研究進(jìn)展

2.1 AIV的分類和命名

AI的病原為AIV，屬正黏病毒科，流感病毒屬，是一種有囊膜的單股負(fù)鏈RNA病毒，其基因組由7～8個(gè)節(jié)段組成，編碼10種蛋白質(zhì)。AIV主要包括A型、B型、C型三個(gè)流感病毒屬，其主要是根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白的抗原性不同而加以區(qū)分，不同亞型的AIV針對(duì)的宿主種類和宿主范圍不同，同時(shí)在致病性上也有很大差別[13]。在這三個(gè)屬的流感病毒中，只有A型流感病毒具有高致病性的感染能力，能夠引起宿主之間的轉(zhuǎn)換，導(dǎo)致病毒流行[14]。A型流感病毒表面的囊膜主要源自于宿主細(xì)胞的脂膜。囊膜表面有血凝素（Hemagglutinin， HA）、神經(jīng)氨酸酶（Neuraminidase， NA）和基質(zhì)蛋白2（ Matrix Protein-2， M2）這三種蛋白突起[15]。A型AIV的HA被發(fā)現(xiàn)存在14種，NA有9種，分別以H1～H14、N1～N9命名[16]。

2.2 AIV的組成和結(jié)構(gòu)

AIV粒子是由0.8%～1.1%的RNA、70%～75%的蛋白質(zhì)、20%～24%的脂質(zhì)和5%～8%的碳水化合物組成。AIV粒子具有多形性，其中最典型的病毒粒子主要呈球形，直徑為80～120 nm，有些病毒最初分離時(shí)其形態(tài)呈長(zhǎng)絲狀，長(zhǎng)短不一，通過(guò)雞胚培養(yǎng)或者細(xì)胞培養(yǎng)后，再經(jīng)后續(xù)進(jìn)行連續(xù)傳代，其病毒形態(tài)由長(zhǎng)絲狀變?yōu)榍蛐巍Ａ鞲胁《镜哪夷ぶ饕怯衫w突、雙層內(nèi)脂膜和基質(zhì)蛋白組成。在囊膜表面主要呈放射狀排列的突起，分別為棒狀的三聚體HA和蘑菇狀的四聚體NA。基質(zhì)蛋白是病毒粒子中含量最多的結(jié)構(gòu)蛋白，其主要作用是維持病毒形態(tài)[17]。

2.3 AIV的流行病學(xué)特征

2.3.1 易感動(dòng)物

AIV的主要易感群體是家禽，并且在世界范圍內(nèi)均廣泛感染，一些野禽也屬易感動(dòng)物。家禽包括雞、火雞、石雞、珍珠雞、鶴鶉、雉、鵝等，野禽包括天鵝和燕鷗等都是AIV的易感動(dòng)物群體[18]。

2.3.2 傳播途徑

AIV的傳染源主要包括病禽的排泄物、分泌物及病禽尸體。當(dāng)AIV的傳染源污染到飲用水、飼料或者其他禽類能接觸到的物體時(shí)，正常健康的易感動(dòng)物就會(huì)通過(guò)直接接觸或者間接接觸而被感染，導(dǎo)致疫情不斷擴(kuò)大。目前來(lái)看，AIV的主要的傳播形式是橫向傳播，但也不能否定沒(méi)有垂直傳播的可能性，呼吸道和消化道是AIV感染的主要途徑。

2.3.3 潛伏期

AIV的潛伏期可以是數(shù)小時(shí)，也可以長(zhǎng)達(dá)21 d左右，根據(jù)感染AIV的種類、感染的病毒量、傳播途徑以及當(dāng)前感染動(dòng)物的抵抗能力、動(dòng)物機(jī)體的免疫能力、生存環(huán)境清潔級(jí)別等都有著密切的關(guān)系。

2.3.4 流行季節(jié)及致死率

AI一般全年均可發(fā)生，但是據(jù)統(tǒng)計(jì)，冬春季發(fā)生較多。主要原因是由于AIV對(duì)溫度比較敏感，在低溫狀況下抵抗力較強(qiáng)，但是在紫外線強(qiáng)的夏季，隨著環(huán)境溫度的升高，病毒的存活時(shí)間相對(duì)較短。AIV的致死率主要取決于感染動(dòng)物種類和病毒的致病性等，最常見(jiàn)的表現(xiàn)形式為高發(fā)病率和低死亡率。

2.3.5 臨床癥狀

AI的臨床表現(xiàn)主要根據(jù)感染禽類的品種、日齡、病毒毒力、感染程度、機(jī)體的免疫能力和抵抗能力以及外界的環(huán)境等因素決定，不同情況下不同病雞的臨床表現(xiàn)不同。最急性型AI的發(fā)生主要是由高致病力的病毒引起的，通常不產(chǎn)生明顯癥狀，感染后會(huì)突然死亡。亞急性型通常是被中等毒力的病毒所感染，在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)有4～5 d潛伏期，主要臨床表現(xiàn)為精神沉郁，禽類體溫升高，食欲減退，產(chǎn)蛋性能明顯下降等;慢性型的AI主要是由低致病力病毒感染引起的，一般只會(huì)出現(xiàn)輕微的呼吸道癥狀，死亡率也較低。

3 AIV的防治

3.1 疫苗

由于AIV基因組極易發(fā)生變異，且血清型眾多，各血清型間也無(wú)交叉保護(hù)性，嚴(yán)重阻礙了疫苗的研制。在預(yù)防AIV的過(guò)程中，通過(guò)注射疫苗能夠?qū)η蓊愄峁┳銐虻拿庖弑Ｗo(hù)作用。通過(guò)非口服的方式接種低致病性AIV滅活疫苗，就會(huì)產(chǎn)生動(dòng)物機(jī)體的免疫應(yīng)答。

3.1.1 包含完整病毒顆粒的疫苗

包含完整病毒顆粒的疫苗最初僅僅在雞胚中擴(kuò)繁，利用化學(xué)方法滅活后，輔入佐劑，可進(jìn)行免疫接種。這種滅活疫苗可以刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答反應(yīng)，有效預(yù)防低、高致病性AIV的攻擊。但是，滅活疫苗也存在部分缺陷，免疫效率低，不能誘導(dǎo)有效的黏膜免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答，無(wú)法高效抑制呼吸道和消化道中的流感病毒[19]。

3.1.2 亞單位疫苗

以HA基因作為靶向的亞單位疫苗具有多種使用形式，例如，將HA基因插入到不同病毒載體，如雞痘病毒重組病毒[20]。雞痘病毒重組載體的HA疫苗具有很好的免疫作用，尤其是現(xiàn)在廣泛應(yīng)用的H5雞痘疫苗，已經(jīng)進(jìn)入商業(yè)化生產(chǎn)，對(duì)雞痘病毒的預(yù)防發(fā)揮著重要的作用[21]。

3.1.3 DNA疫苗

DNA疫苗是一種包含HA基因的裸露質(zhì)粒，并通過(guò)真核生物的啟動(dòng)子進(jìn)行啟動(dòng)表達(dá)的新型疫苗。接種裸露的質(zhì)粒DNA的方式主要有兩種，即肌肉注射和基因槍接種。DNA疫苗能夠快速有效誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答[22]。最近也有研究提出，以疫苗接種的方式進(jìn)行AIV防治，能否完全保護(hù)禽類動(dòng)物免受AIV的攻擊，尤其是高致病性的AIV。細(xì)胞免疫作用能夠降低AIV病毒復(fù)制的能力，在動(dòng)物感染早期細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答阻礙病毒的復(fù)制，但在感染病毒一段時(shí)間后，這種免疫應(yīng)答才能被檢測(cè)到，所以這種形式的應(yīng)答似乎不太能夠全面阻止病毒的入侵[23]。

3.2 AI的防治

目前，對(duì)于AI還沒(méi)有特別有效的治療方法，最佳的辦法就是預(yù)防為主，同時(shí)要注意觀察，盡早進(jìn)行診斷，一旦發(fā)現(xiàn)相關(guān)疫情或疑似疫情，及時(shí)上報(bào)，并按照國(guó)家相關(guān)規(guī)定，及時(shí)、嚴(yán)格對(duì)病雞群進(jìn)行隔離、捕殺、銷毀。如果發(fā)現(xiàn)致病力較弱的毒株導(dǎo)致的禽流感要及時(shí)使用相關(guān)藥物，同時(shí)添加一些抗生素藥物，降低疫病感染的死亡率和繼發(fā)感染等，禽場(chǎng)要及時(shí)帶雞消毒，一天一次或一天多次，連用7～14 d，阻斷AI水平傳播，必要時(shí)也要對(duì)雞群進(jìn)行隔離和封鎖[17]。

4 結(jié)語(yǔ)

AI的發(fā)病率很高，流行范圍也較廣泛，嚴(yán)重影響了家禽生產(chǎn)性能。而且，這種病毒不僅能從家禽傳染到人，而且也可在人與人之間相互傳染，并引起眼結(jié)膜炎。控制AI將是一項(xiàng)長(zhǎng)期任務(wù)，應(yīng)采取嚴(yán)格的生物安全防范措施，減少養(yǎng)殖業(yè)間不同動(dòng)物的接觸和傳播，以期達(dá)到對(duì)流感病毒更早更好的預(yù)防和控制。

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