四種清熱解毒中藥注射液對血培養(yǎng)產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌感染的干擾實驗及應(yīng)對策略

劉 佳 陶慶春 趙桂榮 隗立國

1.北京中醫(yī)藥大學(xué)房山醫(yī)院檢驗科，北京 102400；2 北京中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科，北京 100029；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)房山醫(yī)院，北京 102400

表1 四種中藥注射液實驗組藥物濃度、用量及菌液

隨著臨床創(chuàng)傷性診療技術(shù)的廣泛開展以及抗生素和激素的濫用，導(dǎo)致血流感染病死率高。北美地區(qū)每年有超過575 000 人發(fā)生血流感染并導(dǎo)致近80 000 人死亡[1]。我國醫(yī)院獲得性血流感染發(fā)病率達5.7‰，為許多危重患者死亡原因之一[2]。因此，血培養(yǎng)檢測對臨床診斷和治療菌血癥有重要價值。肺炎克雷伯桿菌是血液感染的主要革蘭陰性病原體，成為第二大條件致病菌[3]。文獻報道，血培養(yǎng)分離的致病菌陽性報警時間一般在72h 之內(nèi)[4]，及時報告陽性結(jié)果可以幫助醫(yī)生早期實施有效治療。段學(xué)光等[5]在血培養(yǎng)干擾實驗研究中發(fā)現(xiàn)，雙黃連和清開靈注射劑對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有不同程度的干擾作用。本實驗旨在幫助醫(yī)護人員了解中藥注射液對血培養(yǎng)陽性報警時間干擾，預(yù)防并積極采取應(yīng)對措施提高血培養(yǎng)陽性檢出率。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705 來自首都醫(yī)科大學(xué)附屬友誼醫(yī)院微生物室。

1.2 試劑

中藥注射液均由醫(yī)院藥劑科提供：熱毒寧注射液，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，批號170606；清開靈注射液，石家莊神威藥業(yè)有限公司，批號160516B1；痰熱清注射液，上海凱寶藥業(yè)股份有限公司，批號1705109；喜炎平注射液，江西青峰藥業(yè)有限公司，批號 2017061703；血培養(yǎng)瓶法國生物梅里埃產(chǎn)品，批號：104864。

1.3 儀器

一次性注射器、微量加樣器、比濁儀、法國生物梅里埃Bact/ALERT 3D 60 全自動血培養(yǎng)儀。

1.4 方法

1.4.1 菌液配制 挑取經(jīng)麥康凱血平皿純化培養(yǎng)的產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌單菌落，制備成0.5 麥氏單位菌懸液，濃度為125CFU/mL。

1.4.2 藥物注射液濃度配制 分別取痰熱清注射液（10mL/ 支）、清開靈注射液（10mL/ 支）原液濃度即100%，用0.9%無菌氯化鈉注射液將其稀釋至50%濃度；取熱毒寧注射液（10mL/支）、喜炎平注射液（5mL/ 支），原液濃度即100%，用0.9% 無菌氯化鈉注射液分別將其濃度稀釋至50%、25%、12.5%。

1.4.3 實驗方法 按照表1 要求配置菌液、藥液濃度。每組實驗重復(fù)3 次。

2 結(jié)果

痰熱清組藥物濃度50% 和100% 時，ATCC BAA-1705 陽性報警時間與對照組比較延長25.6%和41.9%；清開靈組藥物濃度50% 和100% 時，ATCC BAA-1705 陽性報警時間延長4.7%和9.3%；熱毒寧組藥物濃度為12.5%、25%、50% 和100%時，ATCC BAA-1705 陽性報警時間分別比較延長27.9%、32.6%、51.1% 和62.8%；喜炎平組藥物濃度分別為12.5%、25%、50%、100%時，ATCC BAA-1705 陽性報警時間與實驗組相同，延長率為0%。見表2。

表2 四組藥物不同濃度血培養(yǎng)報警時間比較

圖1 四種藥物實驗濃度的陽性報警時間延長比較結(jié)果

3 討論

血流感染是導(dǎo)致菌血癥的主要原因，所以采集患者的血液標本培養(yǎng)分離出致病菌后進行鑒定是診斷菌血癥的金標準[6]。本實驗?zāi)M血培養(yǎng)產(chǎn)KPC酶肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae carpenemase，KPC 酶）感染，觀察四種中藥注射液陽性報警時間差異。清熱解毒中藥注射液是一類清瀉里熱作用的藥物。熱毒寧注射液具有抗病毒、抗菌、消炎等多種功效， 能迅速改善全身癥狀， 縮短病程[7]；痰熱清主要成分黃芩具有瀉火解表，清熱止利的功效[8]；金銀花具有解表和宣肺、清熱解毒作用[9]。清開靈亦含金銀花成分有清熱、解毒作用。張涓[10]清熱藥體外抗菌作用的文獻再評價討論中通過查閱文獻，發(fā)現(xiàn)黃連、黃芩、金銀花等具有明顯的體外抗菌作用，對革蘭陽性球菌、革蘭陰性桿菌和真菌均有較好的抑菌活性。喜炎平對肺炎克雷伯菌體外并無關(guān)或拮抗菌作用，與文獻報道相符[11-12]。

研究顯示四種中藥注射液對血培養(yǎng)產(chǎn)KPC 酶肺炎克雷伯菌感染陽性報警時間有不同程度的干擾影響，其中熱毒寧藥物干擾效果最為明顯，而喜炎平未產(chǎn)生干擾。實驗參照《干擾實驗指南》，藥物實驗濃度應(yīng)至少三倍于治療濃度或最高預(yù)期濃度[13]。痰熱清最高治療濃度為13.8%，實驗濃度為41.4%。清開靈最高治療濃度為28.6%，實驗濃度85.8%。熱毒寧最高治療濃度為7.4%，實驗濃度22.2%。喜炎平最高治療濃度7.4%，實驗濃度為22.2%。痰熱清實驗組50%濃度接近與三倍治療濃度，ATCC BAA-1705 陽報警時間延長25.6%；清開靈實驗組100%濃度近似三倍治療濃度，陽性報警時間延長9.3%；熱毒寧和喜炎平實驗組25%濃度接近三倍治療濃度，陽性報警時間延長分別為32.6%和0%。四種藥物實驗濃度陽性報警時間結(jié)果為熱毒寧＞痰熱清＞清開靈＞喜炎平。見圖1。

菌血癥患者僅1/3 血液培養(yǎng)有陽性結(jié)果[14]，藥物干擾是其重要的影響因素。只有充分了解干擾藥物，才能提高血培養(yǎng)檢出陽性率，并提出應(yīng)對策略：首先，應(yīng)嚴格執(zhí)行使用抗生素之前留取血培養(yǎng)標本，陶世龍等[15]對不同臨床標本微生物檢驗的陽性率結(jié)果對比發(fā)現(xiàn)護士人員采集標本操作不規(guī)范影響結(jié)果；其次，患者使用清熱解毒類藥物，臨床醫(yī)生要在申請單備注，便于檢驗人員綜合考慮藥物干擾血培養(yǎng)陽性報警時間結(jié)果；最后，重視藥物對血培養(yǎng)干擾實驗研究。

綜上所述，清熱解毒中藥注射液應(yīng)用越來越廣泛，臨床應(yīng)盡量避免藥物對血培養(yǎng)報警時間造成干擾，保證血培養(yǎng)結(jié)果的時效性和準確性，以提高清熱解毒類中藥的臨床療效，促進中醫(yī)藥的合理使用。