淺談獸醫實驗室技能競賽血凝抑制試驗技能培訓

文│達劍森（江蘇省揚州市邗江區畜牧獸醫站）

雞新城疫抗體水平檢測既是常規檢測技術，又是一項具有典型代表性的試驗技能，常作為一個固定項目在獸醫實驗室技能比武中出現。筆者曾數次參加和指導省、市級獸醫實驗室檢測技能比武，對縣、市、省級競賽的培訓工作總結如下。

一、培訓的組織

1.積極爭取主管部門支持。各市級、縣級農業主管部門都積極推進獸醫實驗室檢測人員參加各級獸醫實驗室檢測技能競賽，進一步形成“自上而下倡導、自下而上爭取”的雙促雙升良好局面。一方面，以競賽為手段培養獸醫實驗室人員操作技能；另一方面，在省級競賽乃至國家級競賽中拿到相應的名次和獎項，既是該地區獸醫實驗室水平和人才儲備實力的充分體現，同時所取得的榮譽對實驗室人員個人職稱的晉升也有重要的幫助。

2.嚴格按照技能操作標準。血凝抑制試驗（新城疫抗體水平檢測）以國家職業標準《動物疫病防治員》(三級)技能要求為基礎，依據《新城疫診斷技術》( GB/T16550—2008) 標準，確定技能競賽操作標準和規程。要求獸醫實驗室檢測人員在日常操作中嚴格按照競賽操作標準規范操作。

3.認真研讀競賽評分標準。指導教練需要逐項研究上級競賽承辦方下發的競賽評分標準，溝通咨詢承辦單位，搜集各項競賽權威解釋，并整理歸納近幾年的參賽真題資料中的考點分布及重點。一方面，由于國標方法中不可能對競賽評分標準中每一個操作細節進行具體說明；另一方面，各個地區的操作流程也各有側重。所以，競賽提供的評分標準需要專業解讀，如“配制適量的紅細胞懸液”，實際操作中多少容積算為“適量”各方有各自的理解，所以每個地區有各地區相應的競賽標準。所謂“仁者見仁智者見智”，筆者曾作為選手多次參加近年江蘇省獸醫實驗室技能競賽及比對活動，在競賽和培訓過程中將自己的感受作一積累，每項操作中注重強調細節以及容易失分的關鍵點，都需要在培訓中給選手進行針對性的解讀，從而使參賽選手在的重點環節有重點發揮。

4.全面考慮競賽選手選拔。選拔參賽選手時注重細心認真、操作熟練，更重要的是要有較好的心理素質。培訓時可每兩人一組，選手間資源共享、獨立完成，并能應對突發情況隨機應變。首先進行理論培訓和考核，并在該輪次中篩選出理論功底扎實、應試能力較強的獸醫實驗室人員作為種子選手。該輪培訓一般由各縣市區獸醫站推薦1～2名選手參加培訓，在選拔過程中我們發現：一方面，新進人員剛走出校園，思維敏捷，理論基礎和理解能力都優于年長同志，選手大多理論基礎較好，但動手能力較差，因為學校缺乏相關課程設置或實踐動手機會較少，需要經過較長一段時間的實踐和摸索才能成功采集雞血；另一方面，長期從事獸醫實驗室工作的同志，技術熟練，統籌安排能力較強，但存在知識更新速度慢，對于實際問題的機理理解和解決較慢等問題。因此，如何在現有的動物防疫隊伍中選擇合適年齡段的選手是個關鍵。在態度方面，對于參加培訓不積極主動，試驗操作中缺乏維護實驗臺面衛生意識，欠缺生物安全意識的選手應盡早讓其退出。對篩選留下的選手，嚴格按照競賽規程和評分標準，開展區域內技能競賽，讓真正優秀的選手脫穎而出，選拔心理素質過硬、勇于擔當、現場表現最穩定的選手參加上一級競賽。

二、培訓的過程

1.試驗材料準備。競賽時應按照規范為每組選手配備齊全儀器設備、實驗試劑和采集紅細胞的公雞（一般需三只以上）。儀器設備是競賽的前提保障，如果儀器設備陳舊、操作器械使用不順手、紅細胞懸液品質不佳等，都會嚴重影響選手試驗操作及競賽結果。因此，只有保證試驗操作臺和儀器設備齊備，才能夠滿足多組選手同時進行試驗以及舉行地區內技能競賽，讓更多選手感受到技能競賽的氛圍，從而促進日常檢測工作。

2.紅細胞的制備。采血能否成功以及紅細胞懸液能否成功制備是決定試驗的進度和成敗的直接因素，進而影響選手的競賽心理。首先，規范采血前的準備工作、采血技術、采血過程中如何避免發生溶血等；其次，在洗滌雞紅細胞過程中加入生理鹽水（或PBS）的體積、離心轉速和時間的確定、洗滌次數等都須按規范操作；第三，根據檢測樣品的數量，計算試驗所需1%紅細胞懸液的總量，并準確熟練地配制。

3.抗原與血清。抗原應在首次開封后分裝冷凍保存，以后試驗按需取用，避免因反復凍融而降低抗原的血凝效價。每次試驗前都必須重新測定抗原血凝價。陰性血清和陽性血清也應進行分裝冷凍保存，并避免反復凍融。待檢血清樣品可冷凍保存，防止腐敗變質。

4.血凝試驗。血凝反應板使用前需保證潔凈（也可使用一次性血凝反應板），并進行標記，依照規范加樣、振蕩、靜置。按規范注意使用多道移液器、加入紅細胞懸液、振蕩強度和時間以及靜置時封板的細節事項。對于血凝試驗結果判定，首先以陰性對照成立為前提，以完全凝集紅細胞懸液的病毒抗原的最大稀釋度，確定為該病毒的血凝價，并以1∶nlog2形式表示試驗結果。

5.單位抗原的配制。根據血凝試驗血凝價來配制4單位病毒抗原。計算4單位病毒抗原的操作方法和用量都須按規范進行操作，并注意清晰標記。需要注意的是病毒配制過多，容易造成病原浪費，也存在污染的風險。

6.血凝抑制試驗。首先對血凝反應板清晰標記，加樣步驟、振蕩、感應作用時間等都按照新城疫診斷技術規范進行。血凝抑制試驗的結果判定是在病毒對照完全凝集、陰性血清對照完全不凝集的情況下，將能完全抑制紅細胞凝集的血清最大稀釋度確定為該血清樣品的血凝抑制價。

7.報告單規范化和實驗臺整理。在試驗過程中應及時填寫HA/HI檢測報告單，并在相應時間節點向評委舉手示意，請評委來評判試驗步驟和結果是否準確，否則視為違規或步驟缺失而被扣分。報告單中逐項填寫血凝價、4單位抗原稀釋度和血清樣品的血凝抑制價等。

整理試驗工作臺面是競賽過程的收尾環節，也是日常檢測工作中的重要環節。實驗廢棄物和已使用工具的處理以及移液器的復位等細節都應全面規范。只有在選手熟悉整個競賽流程后，數天進行一輪模擬競賽，反復強化訓練，積累臨場經驗，提高心理素質，增強應變能力，鍛煉參賽選手在競賽壓力下的有序操作的能力和冷靜思維。

三、培訓的效果

1.專業能力。經過技能競賽的數輪培訓，進一步規范參賽選手對“新城疫抗體檢測”技能操作，反復練習操作步驟，通過實踐充分理解其原理，發現不足、不斷改進，進而提升參賽選手的知識水平和專業技能。

2.方法能力。競賽培訓過程中，需要培訓人員與參賽選手一起查找資料、搜集信息，促使選手學會從各種媒體搜集專業信息；對于每輪模擬競賽，要求每名選手都進行總結經驗、整理歸納、發現問題、優化時間安排等，提高其分析問題和解決問題的能力，提升其科學思維的能力；啟發選手通過設計實驗來檢測實際生產中遇到的各種問題。

3.社會能力。通過規范化和標準化的操作規程，使選手深入理解操作規程背后的原因，培養選手高度的責任感、強烈的事業心以及實事求是的科學態度；通過小組討論溝通，培養選手臨場表達能力、應變能力和人際溝通能力；通過團隊參賽的形式，培養選手良好的團隊意識和合作精神。

四、結語

筆者曾指導選手參加過省級獸醫實驗室技能比武。培訓過程中，選手的試驗思維進一步邏輯化、縝密化，試驗操作進一步規范化、標準化，切實提升血凝抑制試驗檢測水平，提高了日常工作效率。一定程度上講，該項競賽受益的不只是部分“種子選手”，還可普及到全體獸醫實驗室檢測人員，若在地區內舉行更大范圍的初賽則能更好地達到團隊整體提高的目的。除了地區內交流，各縣市區之間也可相互學習，比學趕超。此外，建議競賽組織者在賽前公布更為細致的評分標準，而不是作為內部資料，只對評委公布。同時，也可在賽后對競賽做總結通報，指出選手的不足之處，讓培訓人員和參賽選手共同總結提高，從而提高獸醫實驗室檢測隊伍整體水平。