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研究黃芩苷提取方法和高效液相含量測定情況分析

2019-10-21 08:57:49井子伊禧
中國化工貿易·下旬刊 2019年6期

摘 要:目的:本次主要對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析,了解HPLC(高效液相)含量的相關測定狀況。方法:經正交實驗設計,考查指標為黃芩苷總量,應用最佳的提取方法,應用HPLC法對黃芩苷的含量展開相應的測定。結果:提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響,其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本,最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍,進行三次,每次1小時。在轉移率實驗之中,平均轉移率超過77.5%,RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中,黃芩苷含量為89.9%,RSD為1.15,篩選的工藝合理且穩定,可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良,其加樣回收率超過99.0%。討論:這種提取黃芩苷的方法穩定且合理,在實驗中的可實踐性高。應用HPLC進行含量測定,可保障數據結果的準確性和精準性,且實驗重復性佳,可在黃芩提取物含量控制之中應用該方法。

關鍵詞:HPLC;黃芩苷;含量測定;提取方法

黃芩為唇形科植物,黃芪本身可起到瀉火解毒、清熱燥濕、安胎以及止血的效果。黃芩中主要是以黃芩苷、黃芩苷元以及漢黃芩素等成分,其中黃芩苷是最為有效的成分,主要可起到抗過敏、抗腫瘤和抗炎的效果。近些年來,臨床的研究發現黃芩苷可有效的對HIV病毒感染、復制產生阻止作用,成為了艾滋治療的有效藥物[1]。為了保障黃芩能夠更好的被利用,本次主要是應用黃芩苷總量作為本次的考察指標,對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析,了解HPLC(高效液相)含量的相關測定狀況。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

本次主要是應用高效液相色譜儀、超聲波清洗儀、旋轉蒸發儀、循環水真空泵、真空干燥箱、電子恒溫水浴鍋。應用的試劑為:乙醇、磷酸、氫氧化鈉、鹽酸、水(超純水)、甲醇。

1.2 藥品

本次主要是應用黃芩藥材,藥材主要是購買于藥材市場,經過鑒定為正品的黃芩,黃芩苷對照品。

1.3 方法

本次實驗設計主要是應用正交實驗展開,水煮提取因受到多個因素產生的影響,其中主要包括由提取時間、溶劑倍數以及提取次數。在單個因素實驗的基礎之上,對三個因素進行分別設置,其中主要是應用L9正交表,誤差項極為空白列,將黃芩苷干膏之中把黃芩苷總量作為本次考察的指標,將黃芩苷提取重量和黃芩苷百分含量進行相乘,極為黃芩苷的總量。在進行樣品制備的時候,需要準備好9份黃芩藥材,每一份均為80克。按照正交實驗表之中列出的條件,先進行水煎煮,300目濾布進行過濾,濾液濃縮成400毫升,冷卻到和室溫保持一致,之后進行抽濾,將濃鹽酸進行適量的加入,之中pH值在1-2之間。把沉淀防治在80攝氏度水浴之中保持1小時,室溫靜置,進行抽濾。沉淀應用蒸餾水洗滌,直至pH值為中性。在70攝氏度的狀態之下進行減壓干燥,之后對其進行稱重。在轉移率實驗之中,準備好3份藥材,每一份為240克,按照工藝選定的最佳條件進行制備,對黃芩苷的轉移率進行測定。干膏重量和干膏之中黃芩苷含量相乘,將所得數據除以藥材重量和藥材之中的黃芩苷的含量,即為黃芩苷的轉移率。在工藝驗證實驗之中,取3份黃芩藥材,每一份為500克,選用優選的提取方法進行純化工藝。黃芩苷的含量進行測定的時候,取黃芩苷標準品溶液、波長范圍掃描200-400nm,濃度為46.52ug/mL,最強吸收為277nm,將其作為檢測波長。

2 結果

經過實驗統計計算、方差結果分析展開判斷,提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響,其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本,最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍,進行三次,每次1小時。在轉移率實驗之中,平均轉移率超過77.5%,RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中,黃芩苷含量為89.9%,RSD為1.15,篩選的工藝合理且穩定,可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良,其加樣回收率超過99.0%。

3 討論

國內關于黃芩苷的提供方法研究文獻有諸多報道,提取工藝主要是由超濾法、溫浸法、微波法以及煎煮法。在實際工業生產之中,黃芩大多是是應用水提酸沉法進行提取,因此黃芩苷的提取方法、制備方法在臨床研究之中變得越加重要[2]。在本次研究之中,經過實驗統計計算、方差結果分析展開判斷,提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響,其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本,最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍,進行三次,每次1小時。在轉移率實驗之中,平均轉移率超過77.5%,RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中,黃芩苷含量為89.9%,RSD為1.15,篩選的工藝合理且穩定,可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良,其加樣回收率超過99.0%。概而言之,這種提取黃芩苷的方法穩定且合理,在實驗中的可實踐性高。應用HPLC進行含量測定,可保障數據結果的準確性和精準性,且實驗重復性佳,可在黃芩提取物含量控制之中應用該方法。

參考文獻:

[1]馬敏怡.高效液相色譜法測定解毒祛痰濃縮丸中黃芩苷的含量[J].新疆中醫藥,2017,35(06):39-42.

[2]楊必浩,周應碩.高效液相色譜法同時測定龍膽瀉肝片中龍膽苦苷、梔子苷和黃芩苷的含量[J].系統醫學,2017,2(08):127-131.

作者簡介:

井子伊禧(1985- ),女,彝族,四川金陽人,當前職務:中藥室副主任,當前職稱:助理工程師,本科學歷,研究方向:中藥檢測、醫藥化工。

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